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文档简介
知识目标1 通过尝试对植物或动物组织中的dna进行粗提取 了解dna的物理化学性质 2 理解dna粗提取与鉴定的原理 能力目标掌握dna粗提取及鉴定方法 能利用dna的性质进行实验设计和操作 态度观念目标通过对dna的粗提取的实验过程的设计及操作 锻炼科学的思维方法 培养实事求是的科学态度 1 鸡血细胞做实验材料 一是因为鸡血细胞核dna含量丰富 材料易得 二是鸡血细胞极易吸水胀破 2 dna在不同浓度的nacl溶液中溶解度不同 3 嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶 其作用是分解蛋白质 使提取出的dna纯度较高4 预冷的乙醇溶液具有以下优点 一是抑制核酸水解酶活性 防止dna降解 二是降低分子运动 易于形成沉淀析出 三是低温有利于增加dna分子柔韧性 减少断裂 5 洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁 破坏细胞膜 同时也能使蛋白质变性 6 在60 75度条件下加温处理 蛋白质变性 而dna结构不会受到破坏 提取纯度较高的dna7 二苯胺的沸水浴能使dna染成蓝色 根据以上原理可设计提取和纯化dna的方案 方案一 30ml含dna的滤液 2mol lnacl 同方向搅拌 dna溶解 加入蒸馏水 dna析出 过滤得到过滤物 放到2mol lnacl溶液中溶解 dna nacl溶解液方案二 30ml滤液 嫩肉粉 木瓜蛋白酶 静置10 15分钟 dna滤液方案三 30ml滤液 60 75 恒温保温10 15分钟 过滤获得dna滤液 两种材料的dna粗提取与鉴定过程 以鸡血为材料以花菜为材料 释放组织细胞中的dna 粗提取dna 将粗提取的dna进一步纯化 鉴定提取物是dna 鸡血细胞液中dna的粗提取实验流程图 2mol l 鸡血细胞液中dna的粗提取实验流程图 5 过滤 取纱布上的滤物 纱布过滤 6 再次溶解dna 2mol lnacl溶液 取滤物 鸡血细胞液中dna的粗提取实验流程图 7 加冷酒精使dna析出 纯化 冷酒精 鸡血细胞液中dna的粗提取实验流程图 dna的鉴定 总结 1 下列关于dna粗提取与鉴定的说法正确的是a 氯化钠的浓度越低 对dna的溶解度越大b 人血也可代替鸡血进行实验c 柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂d dna不能溶于酒精2 在破碎鸡血细胞时 要先加入20ml的蒸馏水 其作用是a dna溶解于水b 血细胞破裂 dna释放c 稀释血液 防止凝固d 有利于搅拌3 若选择的实验材料为植物细胞 破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐 加入食盐的目的是a 利于dna的溶解b 分离dna和蛋白质c 溶解细胞膜d 溶解蛋白质4 在dna粗提取实验中 向在溶解dna的n
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