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文档简介
章末整合 人们按照微生物对营养物质的不同需求 配制出供其生长繁殖的营养基质 培养基 微生物在固体培养基表面生长 可形成肉眼可见的菌落 各种培养基一般都含有水 碳源 氮源 无机盐和生长因子五大类营养成分 培养微生物的营养基质 培养基 1 概念 2 营养成分 1 按培养基外观物理状态来分 培养基可分为固体培养基 半固体培养基和液体培养基三种 其中固体培养基用于菌种分离 鉴定 菌落计数等 2 按培养基的功能可分为选择培养基和鉴别培养基 3 按照人们对培养基中成分的了解程度可分为天然培养基和合成培养基 1 目的要明确 根据培养微生物的种类 培养目的等确定营养物质种类 2 营养要协调 根据所需微生物的营养需求确定各种营养物质的浓度和比例 3 培养基类型 4 配制原则 3 ph要适宜 根据所需微生物的适宜生长的酸碱度范围调节ph 尽管各种培养基的构成物质不尽相同 但配制过程基本相同 称量 溶化 调ph 分装 包扎 灭菌 5 配制过程 琼脂平板培养基分离纯化技术是一种简便有效的微生物学常规技术 它广泛应用于微生物菌种的筛选 鉴定 育种 计数以及各种微生物的测定工作中 纯化微生物的方法思路是将其充分地稀释 然后在固体培养基上分离为一个个单独的微生物 通过培养则可获得肉眼可见的菌落 纯化常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法 1 平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作 将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面 微生物的分离与纯化 1 平板培养基分离法 2 稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释 然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 进行培养 选择培养基分离法是分离微生物的另一种方法 所谓选择培养基 是指能允许特定种类的微生物生长 同时抑制和阻止其他种类微生物生长的培养基 选择培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学 物理因素的抗性而设计的培养基 其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌 从而提高该菌的筛选效率 2 选择培养基分离法 选择培养基通常有两种 第一种办法可利用该分离对象对某一营养物质有 嗜好 的原理 专门在培养基中加入该营养物 从而使它成为一种加富培养基 采用这类 投其所好 的策略即可使微生物大大增殖 在数量上超过原有占优势的微生物 以达到富集培养的目的 用于加富的物质主要是一些特殊的碳源和氮源 如纤维素可被用来富集纤维素分解类微生物 甘露醇用来富集自生固氮菌 第二种办法则可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性 在混合培养物中加入该抑制物质 经培养后 由于原来占优势的微生物的生长受到抑制 而分离对象却可趁机大大增殖 使之在数量上占据优势 用于抑制他种微生物的选择性抑制剂有染料 抗生素等 简析 1 原理消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物 不包括芽孢和孢子 灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物 包括芽孢和孢子 2 常用方法 灭菌与消毒 下列关于对灭菌和消毒的理解 不正确的是 a 灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞 芽孢和孢子b 消毒和灭菌实质上是相同的c 接种环用灼烧法灭菌d 常用灭菌方法有加热法 过滤法 紫外线法和化学药物法解析消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物 不包括芽孢和孢子 灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物 包括芽孢和孢子 答案b 典例1 简析 尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与鉴定 微生物与人类关系密切 虽然有些微生物能使动植物患病 但多数微生物对人类是有益的 请回答下列有关问题 1 下表为两种微生物的培养基配方 a培养基 典例2 b培养基 上述两种培养基中的物质溶解后 均用蒸馏水定容到1000ml 如果要进行土壤中分解尿素的细菌的分离 则需要选择上述哪种培养基 该培养基能分离尿素分解菌的原因是 在该培养基中可加入 指示剂 根据指示剂的颜色可鉴定该种细菌能够分解尿素 从功能上来看 上述两种培养基均属于 培养基 2 微生物接种的方法很多 平板划线法操作结束时 为什么仍需要灼烧接种环 3 微生物培养过程中还有什么方法或步骤要防止其他微生物污染 解析在进行土壤中分解尿素的细菌的分离时 培养基中尿素是唯一的氮源 只有能分解尿素的微生物才能生长繁殖 这种培养基属于选择培养基 接种时及接种操作结束后 仍需要灼烧接种环以杀死接种环上残留的细菌 避免污染环境和感染操作者 答案 1 a培养基培养基中尿素为唯一氮源 只有能分解尿素的微生物才能生长繁殖 酚红 选择 2 杀死接种环上残留菌种 避免污染环境和感染操作者 3 培养基灭菌 接种环境灭菌 接种过程无菌操作 重庆理综 下列有关细菌培养的叙述 正确的是 a 在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌b 在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长c 向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长d 在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动解析单个菌落中只含有一种细菌 青霉素能抑制细菌生长 而对真菌没有影响 破伤风杆菌是厌氧型细菌 通入氧气会抑制其生长 答案d 例1 课标全国理综 有些细菌可分解原油 从而消除由原油泄漏造成的土壤污染 某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株 回答问题 1 在筛选过程中 应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上 从功能上讲 该培养基属于 培养基 2 纯化菌种时 为了得到单菌落 常采用的接种方法有两种 即 和 3 为了筛选出高效菌株 可比较单菌落周围分解圈的大小 分解圈大说明该菌株的降解能力 4 通常情况下 在微生物培养过程中 实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌 和 无菌技术要求 例2 实验操作应在酒精灯 附近进行 以避免周围环境中微生物的污染 解析 1 要获得分解原油的细菌 只有在以原油为唯一碳源的培养基中 这种细菌可以大量繁殖 而其他细菌不能生存 此种培养基属于选择培养基 2 纯化菌种常用平板划线法和稀释涂布平板法 3 在以原油为唯一碳源的培养基上 在菌落周围的原油被分解而形成分解圈 分解圈越大 说明该菌株降解能力越强 4 实验室灭菌有灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 实验操作要在酒精灯火焰附近的无菌区进行 答案 1 原油选择 2 平板划线法稀释涂布平板法 3 强 4 干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰 考情分析本专题与工农业生产联系密切 历年高考试题中都会涉及 命题形式既有选择题也有非选择题 但以非选择题为主要命题形式 从高考试题来看 培养基的类型 微生物筛选 分离 接种 灭菌 消毒及计数等相关知识是考查的重点 并且常常与物质的提取与分离结合在一起进行综合考查 在2011年的高考试题中 全国新课标理综卷第39题与山东理综卷第34题都综合考查培养基的分析与
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