高中物理 4.1 探索遗传物质的过程（2）课件 苏教版必修2.ppt

第四章遗传的分子基础 第1节探索遗传物质的过程 第二课时 学习目标 1 初步掌握dna的粗提取和鉴定的方法 2 观察提取出来的dna物质 3 理解dna的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理 4 利用dna的性质进行实验分析和实验设计 重点 1 dna的提取的原理 2 dna的提取的实验过程 3 dna的鉴定技术 难点 dna的粗提取的原理和过程 dna的提取与鉴定 dna提取试剂盒 你知道dna有何特性吗 探究一dna的粗提取 阅读课本p56 p57边做边学相关内容 并结合图4 4和图4 5 思考并小组讨论下列问题 dna的提取原理 1 dna的溶解性 dna和蛋白质等其他成分在不同浓度的nacl溶液中溶解度不同 2 dna在酒精溶液中的溶解性 dna不溶于酒精溶液 但是细胞中的某些蛋白质则可以溶于酒精 利用这一原理 可以将dna与蛋白质进一步分离 3 dna对酶 高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质 但是对dna没有影响 大多数蛋白质不能忍受60 80 c的高温 而dna在80 c以上才会变性 洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜 去除脂质和蛋白质 但对dna没有影响 1 实验原理 1 dna提取的原理 dna在nacl溶液中的溶解度 随着nacl浓度的变化而改变 dna在物质的量浓度为0 14mol l的nacl溶液中溶解度最低 利用这一原理 可以使溶解在nacl溶液中的dna析出 2 dna纯化的原理 dna不溶于酒精 而细胞中某些物质可溶于酒精 从而可提取出含杂质较少的dna 2 用品分析 1 材料 鸡血实验中用鸡血作为实验材料有三个原因 一是鸡血中血细胞含量高 dna含量丰富 二是材料易得 三是鸡血细胞极易吸水涨破 2 器具本实验过程中最好使用塑料烧杯和试管 因为玻璃表面带电荷 dna中的磷酸基也带电荷 因而易被吸附于玻璃表面 故实验中用塑料烧杯和试管可减少dna的损失 3 试剂在dna鉴定中所用的二苯胺是一种有毒性的试剂 在使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位 也不要近距离观察 3 实验步骤 探究二探究二dna的鉴定 阅读课本p57继续探究的相关内容 思考并小组讨论下列问题 4 归纳提升 1 加入抗凝剂的目的制备鸡血细胞液时要在取新鲜鸡血的同时加入抗凝剂 防止血液凝固 2 实验中几次重复操作的目的 实验中有两次使用蒸馏水a 第一次在第2步 目的是使血细胞吸水涨破 b 第二次在第4步 目的是为了稀释nacl溶液 析出dna 实验原理拓展介绍 1 dna的释放 dna主要在鸡血细胞的细胞核内 正常情况下不会释放出来 蒸馏水对于鸡血细胞是一种低渗液 水分可以大量进入血细胞 使之胀破 同时加上玻璃棒快速搅拌的机械作用 加速血细胞的细胞膜和核膜的破裂 但释放出来的大量dna与rna 蛋白质结合在一起 即释放的不是纯净的dna 常称为dna核蛋白 2 dna与蛋白质分离 在高浓度 2mol l 的氯化钠溶液中 核蛋白易溶解 析出dna并溶解在高浓度的氯化钠溶液中 3 dna的析出与获取 因为dna在低浓度 0 14mol l 的氯化钠溶液中溶解度小 而蛋白质的在其中的溶解度大 所以在向含dna的高浓度的氯化钠溶液中加入大量蒸馏水稀释氯化钠溶液 从而使dna溶解度下降 蛋白质溶解度增高 4 dna的再溶解 用高浓度 2mol l 的氯化钠溶液再溶解dna粘稠物 5 dna的沉淀和浓缩 对于除去了蛋白质的dna的氯化钠溶液 必须再进一步沉淀和浓缩 常用酒精沉淀法 即往含有na 的dna溶液 加入体积分数为95 的冷却酒精 混匀后可以使dna沉淀 浓缩 形成含杂质较少的dna丝状物 悬浮于溶液中 若丝状物较少 可将混合液再放入冰箱中冷却几分钟即可 浓缩后的dna丝状物可以用玻棒 玻棒有吸附dna的作用 缓缓旋转的方法卷起 6 dna的鉴定 鉴定时蓝色的深浅与溶液中dna的含量多少有关 加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 加速血细胞破裂 溶解dna 使2mol l的nacl溶液稀释至0 14mol l使得dna最大限度地释出 使含dna的黏稠物被留在纱布上 使含dna的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 除去含dna的滤液中的杂质 提取dna a出现蓝色b无变化 下列操作中 对dna的提取量影响较小的是 a 使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂 放出dna等核物质b 搅拌时 要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动c 在析出dna粘稠物时 要缓缓加入蒸馏水 直至溶液中粘稠物不再增多d 在用酒精沉淀dna时 要使用冷酒精 甚至再将混合液放入冰箱中冷却e 在dna的溶解和再溶解时 要充分搅拌 课堂巩固 2 在 dna的粗提取与鉴定实验 中 1 实验中两次使用蒸馏水 第一次目的是 第二次目的是 2 说明不同浓度的nacl溶液的作用 2mol lnacl的作用 0 14mol lnacl的作用 0 015mol lnacl的作用 3 提纯dna的原理是 所用试剂为 搅拌要 目的 4 能否用哺乳动物血液代替 简述理由 答案 1 使血细胞吸水破裂 溶解细胞核内的dna 降低nacl溶液的浓度 降低dna分子在nacl溶液中的溶解度析出dna分子 2 溶解含dna的核物质 使含dna的丝状粘稠物析出dna分子 进行dna鉴定 3 dna不溶于酒精溶液 但细胞中某些盐类蛋白质可溶于酒精溶液 95 的冷却酒精 轻缓 同方向 保持dna分子的完整性 4 不能 成熟的哺乳动物红细胞没有细胞核 3 向溶有dna的2mol