生殖免疫及其免疫检测ppt课件.pptx

临床免疫学检验技术 第二十九章生殖免疫及其免疫检测 王芳 目录 第一节概述第二节常用的生殖相关免疫检验项目及其检测方法和临床意义 人类生殖过程图示 生殖免疫学是近年来发展起来的生殖生物学与免疫生物学交叉的边缘学科 着眼于研究生殖医学领域免疫学问题 主要包括神经 生殖内分泌 免疫调节 母 胎免疫调节及生殖免疫调节等方面 第一节概述 重点提示 生殖道组织的局部免疫妊娠与免疫自然流产与免疫性激素与免疫 一 生殖道组织的局部免疫 一 宫颈与阴道免疫1 抗原提呈细胞 1 性质 树突状巨噬细胞 2 分布 宫颈和阴道上皮层2 T细胞 1 成分 主要为CD8 T细胞 2 分布 宫颈天然上皮 转化区上皮细胞3 B细胞 1 分布 阴道 宫颈阴道部 宫颈管组织 2 分泌抗体 分泌型IgA 一 生殖道组织的局部免疫 二 子宫局部免疫1 T细胞 1 免疫营养作用 2 免疫杀伤作用2 巨噬细胞主要的抗原提呈细胞3 大颗粒淋巴细胞 LGL 一 生殖道组织的局部免疫 三 卵巢免疫1 免疫细胞 1 巨噬细胞 2 淋巴细胞 3 肥大细胞 4 多形核细胞2 细胞因子 1 胰岛素样生长因子 IGF 2 转化生长因子 TGF 3 表皮生长因子 EGF 二 妊娠与免疫 一 配子免疫1 精子抗原 1 膜抗原 2 结构抗原 3 血型抗原 4 组织相容性抗原 5 精子内部各种酶系抗原 二 妊娠与免疫 2 卵细胞 透明带抗原由颗粒细胞分泌并包裹于卵细胞膜表面的一层基质 为糖蛋白 在受精过程中起重要作用 透明带抗原可诱发免疫系统产生抗透明带抗体 当抗体与透明带结合可影响卵细胞的受精及着床 二 妊娠与免疫 二 胚胎免疫胚胎同种抗原 1 定义 来源于胚胎期和胚胎组织的一类抗原 2 分类 胚胎同种抗原 HLA AFP 二 妊娠与免疫 三 母体 胎儿免疫胎儿不被母体所排斥的因素 1 妊娠期母体的免疫防御反应受到严重抑制 2 胎盘的免疫屏障作用将胎儿抗原封闭起来 3 母体的抗体及其他免疫因子受到胎盘屏障的阻碍 妊娠与免疫 四 胎盘免疫1 胎盘机械屏障作用 2 胎盘限制大分子抗原物质进入胎儿血液循环 3 滋养层细胞表达的HLA G抗原发挥免疫抑制作用 4 胎盘分泌多种具有免疫抑制作用的蛋白质及激素 三 自然流产与免疫 免疫机制 非免疫相关 免疫相关 40 50 50 60 染色体异常 生殖道解剖异常 内分泌异常 生殖道感染 自身免疫型 同种免疫型 三 自然流产与免疫 1 自身免疫型 1 抗磷脂抗体定义 是一组自身免疫性抗体 包括狼疮抗凝因子 抗心磷脂抗体 抗磷脂酸丝氨酸抗体 抗磷脂酸抗体等 意义 若阳性 则流产的发生率高达66 89 2 抗精子抗体作用 阻碍精子获能 干扰精子穿过卵子透明带等 三 自然流产与免疫 2 同种免疫型 1 组织相容性抗原系统 HLA 与自然流产 HLA DR HLA DQ抗原 滋养层 淋巴细胞交叉反应抗原 TLX 2 封闭抗体 blockingantibodies BA 与自然流产BA与母胎界面上来自父系的抗原相结合 阻止母体Th细胞识别胎儿抗原后引发的对胚胎的攻击 3 细胞免疫与复发性流产Th1 Th2平衡失调 四 性激素与免疫 泌乳素孕激素雌激素 四 性激素与免疫 一 泌乳素性质 垂体激素 分布 以胸腺 卵巢 淋巴细胞为主 作用 促进胸腺内T细胞分化成促进B细胞的分化和成熟 也是NK细胞的重要调节因子 四 性激素与免疫 二 孕激素孕酮通过识别胎儿来源的抗原 活化 TCR 形成孕酮受体对妊娠的免疫保护作用 孕酮通过PIBF干扰花生四烯酸的代谢和诱导免疫反应向TH2偏移 降低NK细胞活性 有助于妊娠维持 四 性激素与免疫 三 雌激素1 雌激素对免疫系统的作用 调节T淋巴细胞的生长和分化 增生 影响细胞因子的产生 刺激B细胞的活化和抗体的产生 2 雌激素受体 estrogenreceptor ER 第二节常用的生殖相关免疫检验项目及其检测方法和临床意义 重点提示 不孕症的生殖免疫学检测反复自然流产的免疫学检测生殖系感染的免疫学检测生殖系肿瘤的免疫学检测生殖系内分泌功能的免疫学检测 一 不孕症的生殖免疫学检测 不孕症 指婚后未避孕 同居2年未曾受孕者 抗精子抗体 抗透明带抗体是其中重要的免疫性因素 一 不孕症的生殖免疫学检测 一 抗精子抗体 AsAb 1 抗精子抗体产生机制 1 男性抗精子抗体 自身抗体 2 女性抗精子抗体 同种异体抗体 2 抗精子抗体类型 1 生殖道分泌物中主要为分泌型IgA 血清中以IgG和IgM为主 2 临床上通常检测的是血清中的IgG 一 不孕症的生殖免疫学检测 3 抗精子抗体的检测方法 1 精子凝集试验原理 精子表面结合了抗体后可相互凝集 检测方法 明胶凝集法 管板凝集法 圆盘凝集法 毛细管凝集法等 特点 本法特异性差 假阳性发生率高 精子凝集图 一 不孕症的生殖免疫学检测 2 补体依赖性细胞毒试验及精子制动试验原理 在补体作用下 精子与抗体结合后不能向前移动 特点 本法仅能检测作用于精子尾干等的精子抗体 特异性强 敏感性差 假阴性发生率高 3 免疫珠结合法原理 用抗人免疫球蛋白抗体包被的聚丙烯酰胺能结合于结合了精子抗体的精子表面 在相差显微镜可见此种免疫珠随精子前进而移动 特点 此法可靠性好但敏感性难以肯定 不能进行定量测定 一 不孕症的生殖免疫学检测 4 酶联免疫吸附法 ELISA 是不孕不育的一项初筛试验 敏感性高 重复性好 人抗精子抗体ELISA试剂盒 一 不孕症的生殖免疫学检测 二 抗透明带抗体 AzpAb 1 AzpAb产生机制透明带具有抗原性 感染或育龄妇女排卵过程中透明带反复破裂和吸收 机体处于抗原刺激的敏感状态 产生AzpAb 2 AzpAb对生殖的影响阻遏精子吸附和穿过透明带 干扰着床 影响卵细胞发育和生长 不孕症的生殖免疫学检测 3 AzpAb的检测方法 1 ELLSA及BA ELLSA法 2 透明带沉淀反应 3 放射免疫法 4 间接免疫荧光试验 5 被动血凝法 6 精子 透明带结合或穿透试验 二 反复自然流产的免疫学检测 一 封闭抗体 blockingantibodies 1 定义 是人类白细胞抗 HLA 滋养层及淋巴细胞交叉反应抗原 TLX 等刺激母体免疫系统所产生的一类IgG型抗体 2 分类 抗HLA DR抗体 抗TLX抗体 抗Fc受体抗体 抗基因抗体 抗冷B细胞抗体 二 反复自然流产的免疫学检测 3 检测方法 1 补体依赖性细胞毒试验女方血清内的封闭抗体与男方外周血淋巴细胞结合 在补体作用下致细胞死亡 经台盼蓝染色 使死亡细胞着色 显微镜下评判结果 2 单向混合淋巴细胞反应封闭试验丝裂霉素处理男方淋巴细胞后 分别在含有AB型血清及女方血清的培养条件下与女方淋巴细胞混合培育 3H 胸腺嘧啶核苷掺入法检测细胞增殖水平 结果以封闭效率表示 二 反复自然流产的免疫学检测 3 流式细胞术分析封闭抗体原理 采用竞争法原理 以AB型或小牛血清中抗CD3 CD4 CD25的抗体与测定管中的抗体竞争结合男方细胞 测定抗CD3 CD4 CD25封闭效率大于1 为阳性 流式细胞仪 二 反复自然流产的免疫学检测 二 抗磷脂抗体 APLA 1 定义 是一种广泛的 异种基因的自身抗体家族 分为狼疮抗凝物 LAC 和抗心磷脂抗体 ACA 两大类 2 抗心磷脂抗体 ACLA 的检测方法ELISA法最常用 二 反复自然流产的免疫学检测 三 夫妇双方HLA抗原检测HLA I类抗原多用血清学方法检测 HLA DR抗原检测常用混合淋巴细胞培养来鉴定 四 透明带抗体及抗精子抗体检测见第二十九章第二节 二 反复自然流产的免疫学检测 五 血型及抗血型抗体测定1 常见的血型不合引起的同种免疫病 1 ABO血型不合的同种免疫病 2 Rh血型不合的同种免疫病 2 诊断主要依据实验室特异性抗体检查 三 生殖系感染的免疫学检测 一 支原体检测1 定义 是一类缺乏细胞壁 能在无生命培养基中生长繁殖的最小原核生物 2 分类 16种 5种对人有致病性 1 肺炎支原体 2 解脲支原体 3 人型支原体 4 生殖支原体 5 发酵支原体 支原体示意图 三 生殖系感染的免疫学检测 3 检测方法 1 病原培养采用间接培养法 2 血清学试验1 特异性血清学检测方法 补体结合试验2 非特异性血清学检测方法 肺炎支原体冷凝集试验等 支原体培养基 三 生殖系感染的免疫学检测 3 抗原检测ELISA 间接免疫荧光法 反向间接血凝法等直接检测分泌物和体液中支原体抗原 具有较高的特异性和灵敏度 4 核酸检测基因探针 PCR等方法 三 生殖系感染的免疫学检测 二 衣原体检测定义 是一类能通过细菌滤器 有独特发育周期 专性细胞内寄生的原核细胞类微生物 分类 沙眼衣原体 鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体 衣原体 三 生殖系感染的免疫学检测 3 检测方法 1 寻找抗原1 鸡胚分离培养 2 细胞分离培养 3 涂片检查包涵体 4 ELISA或荧光法检查衣原体抗原 5 金标法衣原体快速检测 衣原体包涵体 三 生殖系感染的免疫学检测 2 寻找抗体微量免疫荧光法 3 寻找特异性核酸1 连接酶链反应2 转录介导的扩增试验3 聚合酶链反应4 实时荧光聚合酶链反应 四 生殖系肿瘤的免疫学检测 一 生殖系肿瘤常用的免疫学检测指标1 血清糖蛋白肿瘤标志物 1 鳞状细胞癌抗原 SCCA 可作为宫颈癌的独立风险因子和预后指标 2 CA 125 3 CA15 3 4 CA19 9 5 癌胚抗原 CEA 6 前列腺特异性抗原 PSA 四 生殖系肿瘤的免疫学检测 2 胎儿 胎盘蛋白肿瘤标记物 1 甲胎蛋白 AFP 2 人绒毛膜促性腺激素 HCG HCG用于早孕的诊断 对葡萄胎 绒毛膜癌等有重要的诊断和疗效监测价值 四 生殖系肿瘤的免疫学检测 3 酶类肿瘤标记物 1 碱性磷酸酶 ALP 胎盘型ALP常作为宫颈癌和卵巢上皮性癌的肿瘤标记物 2 乳酸脱氢酶 LDH 用于卵巢上皮性和生殖细胞肿瘤的检测 3 端粒酶与细胞衰老 肿瘤的发生 发展及分化程度具有相关性 四 生殖系肿瘤的免疫学检测 二 生殖系肿瘤免疫学指标的检测1 酶联免疫吸附试验 ELISA 2 化学发光酶免疫试验 CLEIA 3 电化学发光免疫试验 ECLIA 4 时间分辨荧光免疫试验 TRFIA 5 液相芯片技术 五 生殖系内分泌功能的免疫学检测 一 激素1 绒毛膜促性腺激素 HCG 2 雌三醇3 胎盘泌乳素 hPL 4 垂体催乳素 PRL 5 孕酮6 胎儿纤连蛋白 fFN 7 促卵泡激素 FSH 和黄体生成素 LH 五 生殖系内分泌功能的免疫学检测 二 激素受体1 雌激素受体 ER 和孕激素受体 PR 2 LH CG受体和FSH受体 本章小结 抗精子抗体及抗透明带抗体是免疫因素所致不孕中的重要因