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文档简介
实验十一植物组织培养 植物组织培养的概念 概念 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下 将离体的植物器官 组织 细胞 培养在人工配制的培养基上 给予适宜的培养条件 诱导其产生愈伤组织 进而生根发芽 最终形成完整的植株 为什么植物的一个细胞就可以培育出完整的植株呢 1 含义 每个生活的细胞都具有遗传上的全能性 因而具有发育为完整植株的潜能 2 原因 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质 都有发育成为完整个体所必需的全部基因 从理论上讲 生物体的每一个活细胞都应该具有全能性 3 差异 1 受精卵的全能性最高一般受精卵 生殖细胞 体细胞 细胞的全能性 3 植物细胞 动物细胞 2 分化程度低的细胞 分化程度高的细胞 几乎所有的组织 为什么植物的花瓣在植物体内没有能发育成完整的植株呢 细胞失去了全能性 细胞中的基因部分丢失 细胞中的基因进行选择性表达 细胞中的基因变异不同 怎样才能由一个细胞或组织通过培养得到一株完整植株 应该如何操作 离体的植物器官 组织或细胞 外植体 脱分化 植物激素 细胞分裂素 生长素 再分化 植物组织培养基本流程图 根 芽 胚状体 植物体 愈伤组织 浓度比 植物组织培养技术实验成功关键 无菌技术 避免杂菌在上面迅速生长消耗营养 有些杂菌会危害培养物的生长 脱分化 再分化 愈伤组织 让已经分化的细胞 经过诱导后 失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程 由一团排列疏松而无规则 高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞团组成的新生组织 通过调节营养物质和生长调节剂的适当配比 从愈伤组织诱导出芽和根的顶端分生组织的过程 细胞分裂素和生长素诱导愈伤组织的分化 左 培养基中生长素含量较高 仅有根的形成 生根培养基 右 培养基中含高比值细胞分裂素 生长素 则仅有芽的形成 植物实现全能性的条件 离体的组织 器官或细胞 外植体 适宜光照 适合的ph 组成生物体的化学元素 c h o n s p k ca mg 大量元素 微量元素 fe mn b zn mo cu 含量占生物体总重量万分之一以上的元素 植物生活所必需 但是需要量却很少的一些元素 分类依据 根据元素在生物体内的含量 而不是生理作用 实验 植物组织培养 1 进行菊花的组织培养 实验目的 2 尝试植物激素的应用 实验步骤 培养基的制备 接种材料的消毒 材料的接种 丛壮苗培养 生根培养 移栽 炼苗 定植 实验用品 100ml三角瓶或大口培养瓶镊子 超净台 灭菌锅封口膜和橡皮圈 酒精灯有棉球的广口瓶 三角漏斗培养皿 培养基的制备 称量药品 确定配方 ms固体培养基 配置母液 按比例稀释 混匀 装瓶 高压蒸汽灭菌 接种材料的消毒 1 自然生长的材料 如茎 自来水清洗 70 乙醇浸泡10分钟 5 次氯酸钠溶液浸泡5分钟 另一5 次氯酸钠溶液浸泡5分钟 无菌水清洗 切段 0 5 1cm 2 无菌培养的菊花幼苗 切段 每段至少有1叶片 材料的接种 接种器具 封口膜 无菌水消毒茎的切段 接种工具消毒 装有发芽培养基的三角瓶口灼烧灭菌 接种 茎切段插入培养基 2 3段每瓶 封瓶 丛壮苗培养 2 条件 温度 18 25 光照强度 1500 2000lux 光周期 14 5h 培养期 2 3周 1 培养设备带日光灯的培养架 生根培养 材料 健壮的嫩枝 2 3枝每瓶 培养条件 同丛壮苗培养 周期 2周左右根长1cm左右出苗移栽 培养基 生根培养基 移栽 炼苗 定植 将苗转移至土中 直至开花 基质 草炭土或蛭石 周期 2 3天 管理 湿度逐渐降至自然湿度 植物组织培养的应用 1 微型繁殖 2 作物脱毒 3 人工种子 4 单倍体克隆 花药离体培养 繁殖速度快 不受季节影响 保持优良性状 取材 植物分生区组织 如茎尖 原因 病毒极少 甚至无病毒 5 突变体的利用 6 细胞产物的工业化生产 此生代谢产物如某些中药 从细胞培养产生的表现出遗传变异的新植株中 选择了具备有益农艺性状的作物新类型 在培养基中加入不同浓度的na
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