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文档简介
6 2基因工程及其应用 基因工程 即通俗的说 就是按照人们的意愿 把一种生物的某种基因提取出来 加以修饰改造 然后放到另一种生物的细胞里 地改造生物的 原理 操作水平 结果 一 基因工程 目的基因 基因重组 dna分子水平 定向地改造生物的遗传性状 获得人类所需要的品种 获得新性状 基因拼接技术或dna重组技术 定向 遗传性状 二 基因操作的工具 1 基因工程的 指 限制性内切酶 主要存在于微生物 一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列 并在特定切点切割 已发现的有200多种 这个特点说明了 酶具有专一性 1 被同一种限制酶切断的几个dna是否具有相同的黏性末端 思考 形成的黏性末端不同 不同的限制酶呢 具有 指 dna连接酶 连接 梯子 断口的 扶手 而非 梯子 中间的 踏板 其作用与限制性内切酶相反 作用点相同 连接酶的作用是 将互补配对的两个黏性末端连接起来 使之成为一个完整的dna分子 目的基因 a 条件 1 能够在宿主细胞中复制并稳定地保存 2 具有多个限制酶切点 每种限制酶切点最好只有一个 以便与外源基因连接 3 具有标记基因 便于进行筛选 b 常用的运载体 质粒 噬菌体和动 植物病毒等 标记基因 便于进行检测 其中质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中 是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状dna分子 c 它们的共同特点是 都有侵染或进入宿主细胞的能力 第一步 三 基因工程基本步骤 第二步 获取目的基因 目的基因与运载体结合 方法 1 直接分离 鸟枪法 2 人工合成 注意 要保持基因的完整性 注意 要用同一种限制酶切取目的基因和运载体 并用dna连接酶连接 结果要筛选 第三步 第四步 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测和表达 1 常用的受体细胞 大肠杆菌 枯草杆菌 酵母菌 动植物细胞等 2 常用微生物作受体细胞的原因 微生物增殖快 代谢快 目的产物多 一般检测 标记基因是否表达 思维拓展 细菌和人是差异非常大的两种生物 通过基因重组后 细菌能够合成人体的胰岛素 这说明了什么 这可不是普通的细菌 它是嫁接了
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