宫腔内注射酪蛋白对大鼠胎仔存活的影响：一个新的避孕的药理学途径.doc

宫腔内注射酪蛋白对大鼠胎仔存活的影响：一个新的避孕的药理学途径?48?基础研究l文ll文l001宫腔内注射酪蛋白对大鼠胎仔存活的影响:一个新的避孕的药理学途径f英/halperinr/contraception.-2006,73(5).?641644有报道官腔内存在含有人蜕膜相关蛋白(1ldp)200的高分子量复合物,能与免疫球蛋白聚合.研究显示这些免疫聚合物可能参与植入过程.在酶联免疫吸附试验中,乳剂特别是酪蛋白能强烈抑制hdp200与血清免疫球蛋白结合.另外,近来有报道显示子宫内存在一种ct2-酪蛋白样物质,促使笔者验证.酪蛋白在植入过程中的直接作用.方法:选取1o15周,体质量180230g的大鼠,喂养于人工光周期为14h的空气控制房间.每天行阴道涂片检查,在发现阴道内有精子的当天分笼隔离.第5天将28只大鼠轻度麻醉.采用背外侧切口外置子宫角.将150p,g牛.酪蛋白溶于磷酸盐缓冲液(pss)配置成1mr/me的酪蛋白溶液,经官腔注射于一侧宫角,对侧宫角注射150p,lpbs作为对照.以排除针刺和注射液体对胎仔消融可能起到的非特异性影响.注射后轻轻钳夹注射部位约30s,以防液体外溢.复位子宫角,缝合皮肤切口.第6和第7天分别同法处理另8只和1o只大鼠.第5天还用浓度为0.3mg/ml的.酪蛋白溶液和pbs分别处理20只大鼠的两侧宫角.另外,第5天还进行2mu5mg/ml)a.酪蛋白溶液和2mlpbs腹膜内注射的比较研究.第14天用颈椎脱臼法处死大鼠,通过胎仔大小及大体表现,计数消融的和成活的胎仔数,用消融胎仔数除以总植入数作为胎仔消融率.结果:官腔内注射.酪蛋白溶液的浓度为1rag/me时,第5天.酪蛋白侧的胎仔消融率09.5%1显着高于pbs侧(4o.4%)<0.00o01),第6天ot.酪蛋白侧的胎仔消融率(55.1%)显着高于pbs侧(37.5%)(p<0.05),第7天.酪蛋白侧的胎仔消融率(45.5%)也显着高于pbs侧(19.0%)(j】<0.01),且第6和7天注射酪蛋白的大鼠中,所有的消融胎仔均在注射部位附近.当第5天酪蛋白溶液的浓度为0.3rag/me时,酪蛋白侧的胎仔消融率(73.1显着高于pbs侧(30.4%)<0.00o1).腹膜内注射.酪蛋白的胎仔消融率(9.1%)与腹膜内注射pbs的胎仔消融率(3.8%)无显着性差异.讨论:已知酪蛋白能抑制很多非特异性或低亲和力生物学反应,还可能与细胞毒t淋巴细胞介导的细胞溶解有关.更合理的可能性是酪蛋白的非特异性结合能力.抑制了正常妊娠开始所必需的免疫球蛋白的聚合过程.正如该研究显示,酪蛋白只有局部作用而无全身性作用.否则每次受孕都会被内源性或外源性乳剂所打断.微量浓度f1mml)的酪蛋国外医学计划生育,生殖健康分册2007年26卷第1期l摘l白即可达到满意的避孕效果,且最佳注射时间为第5天.酪蛋白用于避孕的确切作用机制有待于进一步研究.(张钰娟摘李奕校)收稿151期:2006.11-07临床研究男性生殖调节002采用实时定量pcr对azfb重复区域的初步分析【英】/writzlk/humreprod.?2006,21(3).?753-754少弱精因子(az1%是y染色体长臂上的一段基因,其缺失可引起男性不育.azfb基因的重复和缺失同样常见,但是.azfb区域的重复是否对精子发生有影响尚未见报道.研究旨在通过实时pcr的方法分析azfb基因重复对生精功能的影响.材料方法:选取150例因男性原因不孕的夫妇:其中79例为非阻塞性无精症,71例为少精症,所有患者核型分析均正常另取150例己育有1个以上孩子的男性作对照.采用单管实时定量pcr的方法快速检测基因量,使用abiprism7000序列检测系统,探针的检测位点为sy125位点或jarid1d基因.在检测sy125位点的反应体系中:总量25p,l,包括100ng基因组dna,12.5p,l的2xtaqmanuniversalpcrmastermix,1.25的rna聚合酶,1.25的pcrreactionmix20x;若检测jarid1d基因,则把最后一项换为0.416l的pcrreactionmix60x.pcr反应条件:502min,9510min激活.循环(加次循环):95c15s,601min,在每次退火/延伸步骤收集荧光染料.结果:研究发现3例因少弱精不育的男性被检测出有azfb区域的缺失,在对照组中,有2例核型为47,xyy的患者发现有s125位点及jarid1d基因的重复.讨论:通过大量分析y染色体的azfb区域及部分azfe区域的缺失,发现在y染色体长臂上有大量的回文序列,作为非等位基因同源染色体重组的底物,被称为p5和近端p,.其缺失是广泛的,可达到6.2mb.约有22个基因缺失,11个为睾丸特异性基因.p5和近端p,的缺失在非阻塞性无精症的男性中约为1.7%.实时pcr技术可以检测相互重复的微小缺失片段,已经确