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文档简介
课题目标本课题通过尝试对植物或动物组织中的dna进行粗提取 了解dna的物理化学性质 理解dna粗提取以及dna鉴定的原理 课题重点与难点课题重点 dna的粗提取和鉴定方法 课题难点 dna的粗提取和鉴定方法 基础知识 知识要点 1 dna的物理化学性质 尤其是dna的溶解性 2 二苯胺法鉴定dna的方法和原理 1 为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂 答 蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体 水分可以大量进入血细胞内 使血细胞胀裂 再加上搅拌的机械作用 就加速了鸡血细胞的破裂 细胞膜和核膜的破裂 从而释放出dna 2 加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么 答 洗涤剂是一些离子去污剂 能溶解细胞膜 有利于dna的释放 食盐的主要成分是nacl 有利于dna的溶解 3 如果研磨不充分 会对实验结果产生怎样的影响 答 研磨不充分会使细胞核内的dna释放不完全 提取的dna量变少 影响实验结果 导致看不到丝状沉淀物 用二苯胺鉴定不显示蓝色等 4 此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分 答 可能含有核蛋白 多糖和rna等杂质 5 为什么反复地溶解与析出dna 能够去除杂质 答 用高盐浓度的溶液溶解dna 能除去在高盐中不能溶解的杂质 用低盐浓度使dna析出 能除去溶解在低盐溶液中的杂质 因此 通过反复溶解与析出dna 就能够除去与dna溶解度不同的多种杂质 6 方案二与方案三的原理有什么不同 答 方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白 从而使提取的dna与蛋白质分开 方案三利用的是dna和蛋白质对高温耐受性的不同 从而使蛋白质变性 与dna分离 观察你提取的dna颜色 如果不是白色丝状物 说明dna中的杂质较多 二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功 如果不呈现蓝色 可能所提取的dna含量低 或是实验操作中出现错误 需要重新制备 本实验提取的dna粗制品有可能仍然含有核蛋白 多糖等杂质 对于不同的实验方法 本课题可以采用分组的方法进行研究 首先选取不同的实验材料 其次同种材料还可以采用不同方法 从多方面比较实验结果 如dna的纯度 dna的颜色 二苯胺显色的深浅等 看看哪种实验材料 哪种提取方法的效果更好 答 提取dna的第一步是材料的选取 其目的是一定要选取dna含量较高的生物材料 否则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难 第二步是dna的释放和溶解 这一步是实验成功与否的关键 要尽可能使细胞内的dna全部溶解 第三步是dna的纯化 即根据dna的溶解特性 对酶及高温的耐受性的不同等特性 最大限度地将dna与杂质分开 最后一步是对dna进行鉴定 这是对整个实验的结果的检测 答 提取蛋白质比提取dna的难度大 这是因为 与dna相比 蛋白质对温度 盐浓度 ph等条件要敏感得多 很容易失活 并且蛋白质的空间
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