甘肃中医药大学学生科技学术创新立项申请报告

编号： 密级：甘肃中医药大学学生科技学术创新基金项目立项申请报告项目名称：甘肃白条党参质量标准体系的初步研究项目负责人： 所在年级： 所在学院： 计划周期： 2015年 10 月至 2016年 11月 2015 年 11月 5日填报项目负责人学习简历（以时间先后为序）：时 间学校、单位情况研究成绩简介（发表论文、著作和科研成果名称，注明作者顺序及获奖或专利情况）：1.在两年多的学习和实践中,具有良好的团队合作意识，也有了一定的科研创新能力和科研思维能力，具有自主创新意识，能够独立进行实验操作；2.爱好科研实验研究，希望在基础实验及高端实验研究中得到更进一步的提升；3.系统的学习了中药学、中药化学、中药鉴定学、分析化学、仪器化学、生物化学等基础知识； 4.学习并掌握了文献检索的知识，能够熟练的运用中国知网、万方数据库维普网等进行文献检索；5.经过系统的理论学习和实践操作,能有效合理的利用计算机进行数据整理和数据分析；6.长期跟随老师学习，初步掌握了基础实验的实验方案设计与操作技能，有较强的实验动手能力；7.能够熟练的进行中药材有效成分的提取、测定等基本操作；8.初步掌握了薄层色谱、高效液相色谱等技术。1国内外研究现状、水平和发展趋势：中华人民共和国药典中药品的质量控制主要包括鉴别、检查、含量测定。鉴别是用来鉴定药物的真伪，而检查和含量测定则可用来判定药物的优劣和安全。所以，判断一个药物的质量是否符合要求，必须全面考虑鉴别，检查与含量测定三者的检验结果1。早期，对中药的质量控制主要依靠人的经验和控制药材产地，是建立在感性基础上的，随着科技不断发展，许多新的手段也不断应用于中药的质量控制上。中药质量的定性分析研究是从一般的经验鉴别，外观形态到显微鉴别，理化鉴别和薄层色谱鉴别，定量分析研究从分光光度法和容量法的总量测定，浸出物的测定，发展到目前的薄层扫描法，气相色谱法，高效液相色谱法和高效毛细管电泳法的单一成分的含量测定。在党参化学成分不断研究的基础上，人们都试图找到有效部位并进行检测，以提供鉴定其质量的参考。以往都以含糖量来衡量，味道甜的质量佳，也有用比色法测定含糖量的，但是缺乏专属性，不能确切的反应真实属性34。另外，也有研究以薄层扫描法测定党参中甾类和三萜类成分的方法；有关于党参苷的含量测定5；目前用HPLC法测定党参炔苷的含量6及测定苍术内酯的含量78。目前党参指纹图谱方面的研究有党参中药配方颗粒的红外指纹图谱9，党参苷的HPLC/MS指纹图谱分析10；HPLC法研究甘肃产白条党参指纹图谱11，传统质量衡量标准多集中在单一有效成分的分析,但实际上中药有效成分是一个多元的复杂体系,因此传统的评价方法受到质疑。而指纹图谱则能够标示中药特性的共有峰,解决了传统的单一量化问题。目前,中药指纹图谱研究技术越来越广泛地运用于中药的质量研究中1213,且研究分析方法越来越先进,目前运用较多的是薄层色谱、高效液相色谱、高效毛细管电泳等方法。宋丹14利用HPLC法以党参炔苷为参照物对来自不同栽培区的19批川党参样品进行了指纹图谱研究,结果发现,19批川党参样品HPLC指纹图谱的相似度都在80%以上,精密度、稳定性、重现性试验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3%,与3批党参样品2批素花党参对比有明显区别。封士兰15则采用HPLC法以苍术内酯为参照物对甘肃产白条党参进行了指纹图谱研究,共分析了25个共有峰,平均相似度为98.12%。参考文献1王 宝，周 富 荣.中 药 标 准 化 回 顾 . 中 成 药，2000,22,1:22322周玉新主编.中药指纹图谱研究技术.第一版.北京，化学工业出版社，2003:1311443Qin Hu,Tianshou Zhou,YuzhiFang,GuangHu:Determination of Chinese traditional drugs by CE with amperometric detection ,Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysisi30(2002)10471053. 4陆蕴茹等； 五种党参中果糖的含量测定。中国中药杂志。1989,14,8:36385韩桂茹等：薄层层析紫外分光光度测定党参苷的含量.中国中药杂志，4143。6贺庆等；党参中党参炔苷HPLC分析，中国药学杂志，2005,40,1:56587郝桂明，李欢欣，赵春杰等；反相高效液相色谱法测定党参中苍术内酯的含量。沈阳药科大学学报，2002,19,5：3373398王峥涛等；党参中苍术内酯的HPLC分析，中国药科大学学报，2002,23,1:48509田进国等；茯苓、党参、重楼等13钟中药配方颗粒红外指纹图谱的研究，中成药，2004,26,7：517521.10Zhu Enyuan,Wang Zhengtao,Xu Guojin;HPLC/MS Fingerprint Analysis of Tangshenosides.中药材，2001,24,7: 48849011胡芳弟，刘欣，赵健雄等；HPLC研究甘肃白条党参指纹图谱，中成药，2005,27，7：74574812邵建强.中药指纹图谱的研究进展J.中草药,2009,40(6):994-998.13易延逵,杨永华.中药指纹图谱数字化问题探讨J.中草药,2008,39(10):1578-1580.14宋丹,程雪梅,李隆云,等.川党参的高效液相色谱指纹图谱研究J.中国药学杂志,2008,43(15):1136-1139.15封士兰,胡芳弟,刘欣,等.HPLC研究甘肃产白条党参指纹图谱J.中成药,2005,27(7):745-748.2研究目标（包括阶段目标、最终目标、预期成果形式及成果水平，社会、经济效益及其推广应用）：阶段目标: 查阅大量相关文献，整理出近几年国内外对甘肃白条党参的研究进展，确立研究方向；针对甘肃白条党参的质量及成分进行定量和定性分析，分别从性状、显微、水分、灰分等进行测定；对白条党参中的炔苷、苍术内酯等方面通过高效液相和薄层色谱进行比较；统计实验数据并进行分析，撰写论文。最终目标：通过对白条党参的性状、显微、水分、灰分、炔苷、苍术内酯等方面进行比较，进行白条党参的质量标准体系的初步研究。预期成果形式： （1）初步研究甘肃党参的质量标准体系；（2）撰写研究论文12篇。效益及推广及应用：党参产量是甘肃省与黄芪相仲伯的大品种，因品质优良而畅销不衰，也是传统地道的出口产品。纹党近年产量不大，加之一直有港商大户运作，价格始终居高不下，又受天旱的影响，已出现减产因素。白条党参是渭源产的党参，同时又在陇西集散。白条党参主产甘肃中部，西北黄土高原生态环境特殊，雨水少、温差大、土质疏松，加上成熟的栽培技术，使其色白、肉细、条直、味甘而甲于潞党，自成一品，成为药食两用的主导品种，但目前党参质量不高，有效成分含量也较低，通过对水分、灰分、苍术内酯、党参炔苷的测定，并建立 HPLC 指纹图谱初步确立甘肃党参的质量标准体系。3研究内容（理论基础、研究实验方法、主要技术路线及工艺流程）：理论基础: 党参(学名;Codonopsis pilosula) 桔梗科党参属植物，主产于山西、甘肃、河南、四川、云南等地。有特殊香气，味微甜。生党参片益气生津力胜.可以补中益气、止渴、健脾益肺，养血生津。用于脾肺气虚，津伤口渴，内热消渴、气虚、气津两虚、气血双亏以及血虚萎黄等症。秋季采挖，洗净，晒干。渭源白条党参：渭源县是古老渭河的发源地，地处西秦岭山脉的南部地槽与黄土高原台地的交汇地带。北部干旱山区黄土层深厚，适合种植党参，皮肉坚实，清香甘甜，质量优良，被誉为“党参故里”。在党参化学成分不断研究的基础上，人们都试图找到有效部位并进行检测，以提供鉴定其质量的参考。目前党参指纹图谱方面的研究有党参中药配方颗粒的红外指纹图谱，党参苷的HPLC/MS指纹图谱分析；HPLC法研究甘肃产白条党参指纹图谱，传统质量衡量标准多集中在单一有效成分的分析,但实际上中药有效成分是一个多元的复杂体系,因此传统的评价方法受到质疑。因此，建全其质量标准体系是很有必要的。研究实验方法: 对白条党参进行一下几个方面的检测：性状及显微鉴别；水分及总灰分的测定；酸不溶灰分、醇溶性浸出物进行测定；采用高效液相色谱、薄层色谱进行测定炔苷、苍术内酯的含量；通过以上方法测定，统计数据分析，建立 HPLC 指纹图谱及白条党参质量标准体系。前期调研主要技术路线：确立研究目标查阅文献资料租借器材样品、试剂购买性状及显微鉴别 正式试验数据分析论文撰写，项目验收查阅文献工艺流程：项目确立租借器材样品购买样品整理分类不同评价体系性状及显微鉴别薄层色谱高效液相色谱水分测定总灰分测定苍术内酯的含量测定酸不溶性灰分测定醇溶性浸出物测定炔苷的含量测定数据处理与分析撰写论文4计划进度及考核指标（以季度为单位）：本研究预计需时1年，具体为：2015年第四季度：查阅文献，查阅相关资料。购买样品试剂并整理，租借仪器；2016年第一季度： 白条党参的性状及显微鉴别、水分测定及总灰分测定；2016年第二季度：白条党参炔苷和苍术内酯的高效液相色谱测定；2016年第三季度：白条党参的薄层色谱分析；2016年第四季度：统计分析实验数据，撰写研究论文研究论文；实验结果达到预期水平、及时结题。5现有技术基础（预实验及技术力量等）：申请者所在单位已具备开展本研究项目的试验条件，文献资料充足，实验设备和场所完备。可供使用的研究室面积总共约为650m2,仪器设备共约800台件，万元以上设备共20台，仪器设备值约140万元。一批大型现代精密仪器，为本课题的研究提供了良好的实验条件。本项目尚缺少标准品及特殊试剂等，科研实验经费，预通过本课题的申请而解决。 本课题组成员为药学院2013级中草药栽培与鉴定及2013级中药学的学生，所学专业以研究中药为目的，运用专业理论知识包括中药学、药用植物学、方剂学、分析化学、有机化学、无机化学、统计学、生物化学、仪器分析等。通过基础知识的学习，掌握了一定的理论知识，同时也掌握了一定的实验技能，理论与实践结合，加深了对理论知识的理解，通过理论指导实践，解决实践中遇到的问题，并通过对理论和实验技能的融会贯通，对已有的实验方法进行创新，改进实验。最重要的是理解了在科研试验中要以实事求是的态度记录试验数据，科学严谨的处理试验中遇到的问题，并应用先进仪器和统计学方法对实验结果进行科学分析。理论联系实际，在实践中进一步改进理论，理论指导实际，学以致用，才能使我们更好的掌握所学的知识。指导老师是邵晶，女，硕士，副教授。邵晶老师能够较全面的了解学科的基础知识与专业技能，能够很好的指导本课题。简介如下：1.主要科研成果有：当归平喘滴丸的研制，兰科验字【2014】第29号，（5-10）；甘肃产藏药绿绒蒿有效成分组的抗肝损伤作用及机理研究，甘中医药验字【2014】第25号，（4-10）。藏药绿绒蒿消炎止痛活性物质及作用机理研究，2012年甘肃省皇莆谧中医药科技二等奖，（4-8）等；2.发表的相关论文：邵晶，郭玫，余晓晖，甘肃牛蒡不同部位总木脂素及牛蒡苷的含量测定，中国现代应用药学，2012,29(6):506-508 邵晶，郭玫，樊秦，甘肃产不同品种藏药绿绒蒿的质量评价方法研究，中药材，2011,34(11):1678-1681 邵晶，樊秦，郭玫，牛蒡甘草汤的提取工艺优选，中国实验方剂学杂志，2011,17(14):46-48 等。3.出版的主要论著及教材：甘肃道地药材当归研究，甘肃科学技术出版社，编委，2012 全国中医药行业 “十二五”规划教材中药制剂分析、中药化学（英文版）、中药分析学、中药化学实验指导。4.主持在研项目主持甘肃省高校基本科研业务费项目一项：项目编号2013-1，起止时间2014年1月2016年12月主持甘肃省教育厅基金计划项目一项：项目编号1107RJYA019，起止时间2013年6月2016年6月6研究工作条件（包括所需主要仪器设备）：仪器设备名称、规格已有/租借/协作需购置（经费）恒温干燥箱已有恒温水浴箱已有回流冷凝装置已有分析天平已有高效液相仪已有超声仪已有粉碎机已有微孔过滤器已有锥形瓶已有表面皿已有坩埚已有分液漏斗已有筛子已有显微镜已有备注：7经费概算：项目预算（单位：元）白条党参800基本试剂甲醇、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、乙腈水、氯仿、硫酸、盐酸1200显微及性状鉴别、水分、灰分测定300薄层色谱200高效液相800其他700合计4000总经费数：4000 元申请经费数：4000 元8项目申请人员、参加人员及分工：王 璐：课题负责人、实验方法构思、正式实验、撰写论文李其虎：样品试剂采购、仪器租借与整理、正式实验、协同撰写论文项目负责人及主要研究人员情况：姓 名性别年龄专业年级承担主要任务课题负责人，数据分析，论文撰写样品采购，仪器租借正式试验9指导教师基本情况姓名性别女职称副教授所从事专业中药所在部门药学院联系方式指导教师推荐意见本课题选题较实际，与申报学生的专业方向相符，立项依据较充分，前期资料