湖北省红安三中高中生物 1.4 蛋白质工程的崛起课件 新人教版选修3.ppt

蛋白质工程的崛起 蛋白质工程就是为了生产出符合人类生产和生活需要的蛋白质 甚至是自然界不存在的蛋白质 思考 如果想让某一个生物的性状在另外一个生物的身上表达 常用的方法有哪些 1 在种内可以用什么方法 杂交育种 2 在种间可以用什么方法 基因工程育种 一 蛋白质工程崛起的缘由 基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质 这些天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的 它们的结构和功能符合特定物种生存的需要 却不一定完全符合人类生产和生活的需要 一 蛋白质工程崛起的缘由 基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质 这些蛋白质的结构和功能符合特定物种生存的需要 却不一定完全符合人类生产和生活的需要 基因工程的局限性 二 蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础 通过基因修饰或基因合成 对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质 以满足人类对生产和生活的需求 前提 原理 目的 了解蛋白质的结构和功能 改造基因 基因修饰或基因合成 定向改造或制造蛋白质 蛋白质的功能是dna决定的 那么要制造出新的蛋白质 就要改造dna 所以蛋白质工程的原理应该是中心法则的逆推 2 蛋白质工程的目标 根据人们对蛋白质功能的特定需求 对蛋白质的分子结构进行分子设计 对天然蛋白质进行改造 你认为应该直接对蛋白质分子进行操作 还是通过对基因的操作来实现 为什么 需要通过对基因的操作来实现 三 蛋白质工程的基本原理 基因dna 氨基酸序列多肽链 蛋白质三维结构 预期功能 生物功能 mrna 转录 翻译 折叠 dna合成 分子设计 3 蛋白质工程流程 从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相应的脱氧核苷酸序列 基因 蛋白质工程的主要步骤通常包括 1 从生物体中分离纯化目的蛋白 2 测定其氨基酸序列 3 借助核磁共振和x射线晶体衍射等手段 尽可能地了解蛋白质的二维重组和三维晶体结构 4 设计各种处理条件 了解蛋白质的结构变化 包括折叠与去折叠等对其活性与功能的影响 5 设计编码该蛋白的基因改造方案 如定点突变 6 分离 纯化新蛋白 功能检测后投入实际使用 讨论 1 怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列 请把相应的碱基序列写出来 某多肽链的一段氨基酸序列是 丙氨酸 色氨酸 赖氨酸 甲硫氨酸 苯丙氨酸 丙氨酸 gcu gcc gca gcg色氨酸 ugg赖氨酸 aaa aag甲硫氨酸 aug苯丙氨酸 uuu uuc 每种氨基酸都有对应的三联密码子 只要查一下遗传密码子表 就可以将上述氨基酸序列的编码序列查出来 但是由于上述氨基酸序列中有几个氨基酸是由多个三联密码子编码 因此其碱基排列组合起来就比较复杂 至少可以排列出16种 同学们可以根据学过的排列组合知识自己排列一下 首先应该根据三联密码子推出mrna序列为gcu 或c或a或g uggaaa 或g auguuu 或c 再根据碱基互补配对规律推出脱氧核苷酸序列 cga 或g或t或c accttt 或c tacaaa 或g 基因定点诱变技术的常用方法是pcr法 突变点 人工合成的引物上 手段 pcr技术 定点突变试剂盒 目的 获得定点突变的基因 2 确定目的基因的碱基序列后 怎样才能合成或改造目的基因 dna 可以通过人工合成的方法获取或基因的定点诱变技术来改变 基因会发生突变 突变可以自发 也可以诱发 这是每个稍有生物学知识的人都知道的常识 但在加拿大生物化学家m 史密斯 1932 2000 发明定点突变法之前 突变株的产生必须经由自然界或用化学等方法诱使基因体突变 这类方法属于随机突变 突变株必须在生物性状上有所改变 才能确定有突变发生 但除非用分子生物方法或遗传方法找到此突变处 否则无法确定突变位置 也就是说 这种突变是盲目的 而史密斯发明的定点突变法却是有目的的 该法可经由设计好的寡核苷酸 在任何一个基因片段上进行随意或设计好的突变 也就是说 这种突变是预先设定好的 所以也有人将该法称为 反遗传法 有意思的是这一给生命科学研究及应用领域带来革命性突破的方法竟然是史密斯和其同事在喝咖啡时闲聊出来的 现在 几乎每个生物实验室都会用定点突变法来研究基因或蛋白质的功能 蛋白质工程的实质 对编码蛋白质的基因进行改造 总结 蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指以蛋白质分子的 及其与 的关系作为基础 通过 或 对现有蛋白质进行 或制造一种 以满足生产和生活的需求 结构规律 生物功能 基因修饰 基因合成 改造 新的蛋白质 二 蛋白质改造工程举例1 水蛭素改造水蛭素是水蛭唾液腺分泌的凝血酶特异抑制剂 它有多种变异体 由65或66个氨基酸残基组成 水蛭素在临床上可作为抗栓药物用于治疗血栓疾病 为提高水蛭素活性 在综合各变异体结构特点的基础上提出改造水蛭素主要变异体hv2的设计方案 将47位的asn 天冬酰胺 变成lys 赖氨酸 使其与分子内第4或第5位thr 苏氨酸 间形成氢键来帮助水蛭素n端肽段的正确取向 从而提高抗凝血效率 试管试验活性提高了4倍 在动物模型上检验抗血栓形成的效果 提高20倍 蛋白质工程的发展很快 研究工作很多 以上仅介绍了几个例子 蛋白质工程除了用于改造天然蛋白质或设计制造新的蛋白质外 其本身还是研究蛋白质结构功能的一种强有力的工具 它在解决生物理论方面所起的作用 可以和任何重大的生物研究方法相提并论 三 蛋白质工程的进展和前景 蛋白质工程汇集了当代分子生物学等学科的一些前沿领域的最新成就 它把核酸与蛋白质结合 蛋白质空间结构与生物功能结合起来研究 蛋白质工程将蛋白质与酶的研究推进到崭新的时代 为蛋白质和酶在工业 农业和医药方面的应用开拓了诱人的前景 蛋白质工程开创了按照人类意愿改造 创造符合人类需要的蛋白质的新时期 1 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是 氨基酸结构b 蛋白质空间结构c 肽链结构d 基因结构 练习 2 下列关于蛋白质工程的说法错误的是 a 蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构 使之更加符合人类的需要b 蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作 定向改变分子的结构c 蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子d 蛋白质工程与基因工程密不可分 又被称为第二代基因工程 3以下关于蛋白质工程的说法正确的是 a 蛋白质工程以基因工程为基础b 蛋白质工程就是酶工程的延伸c 蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造d 蛋白质工程只能生产天然的蛋白质 4蛋白质工程的基本流程正确的是 蛋白质分子结构设计 dna合成 预期蛋白质功能 根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列a b c d 5蛋白质工程是在基因工程基础上 延伸出来的第二代基因工程 其结果产生的蛋白质是 a 氨基酸种类增多b 氨基酸种类减少c 仍为天然存在蛋白质d 可合成天然不存在蛋白质 1 你知道人类蛋白质组计划吗 它与蛋白质工程有什么关系 我国科学家承担了什么任务 旁栏思考题 人类蛋白质组计划是继人类基因组计划之后 生命科学乃至自然领域一项重大的科学命题 2001年 国际人类蛋白质组组织宣告成立 2003年 该组织正式提出启动了两项重大国际合作行动 一项是由中国科学家牵头执行的 人类肝脏蛋白质组计划 另一项是以美国科学家牵头的 人类血将蛋白质组计划 由此拉开了人类蛋白质组计划的帷幕 人类肝脏蛋白质组计划 是国际上第一个人类组织器官的蛋白质组计划 由我国贺福初院士牵头 这是中国科学家第一次领衔重大国际科研协作计划 总部设在北京 它的科学目标是揭示并确认肝脏的蛋白质 为重大肝病预防 诊断 治疗和新药研发的突破提供重要的科学基础 随后 相继启动了由德国 瑞士 英国 加拿大和日本等国牵头的各类蛋白质组计划 人类蛋白质组计划的深入研究将是对蛋白质工程的有力推动和理论支持 2 对天然蛋白质进行改造 你认为应该直接对蛋白质分子进行操作 还是通过对基因的操作来实现 答 毫无疑问应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改造 主要原因如下 1 任何一种天然蛋白质都是由基因编码的 改造了基因即对蛋白质进行了改造 而且改造过的蛋白质可以遗传下去 如果对蛋白质直接改造 即使改造成功 被改造过的蛋白质分子还是无法遗传的 2 对基因进行改造比对蛋白质直接进行改造要容易操作 难度要小得多 异想天开 能不能根据人类需要的蛋白质的结构 设计相应的基因 导入合适的细菌中 让细菌生产人类所需要的蛋白质食品呢 理论讲可以 但目前还没有真正成功的例子 一些报道利用细菌生产人类需要的蛋白质往往都是自然界已经存在的蛋白质 并非完全是人工设计出来而自然不存在的蛋白质 主要原因是蛋白质的高级结构非常复杂