高中生物 专题5 课题1 DNA的粗提取与鉴定课件 新人教版选修1.ppt

专题5 课题1 课前预习 巧设计 名师课堂 一点通 重点突破 创新演练 大冲关 知识清单 案例师说 课堂强化 每课一练 了解dna的理化性质理解dna粗提取的原理及鉴定的原理和方法 dna的粗提取和鉴定方法 一 提取dna的方法1 提取生物大分子的基本思路 1 选用一定的方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子 2 dna粗提取方法 利用dna与等在物理和化学性质方面的差异 提取dna 去除其他成分 物理或化学 rna 蛋白质和脂质 2 dna粗提取与鉴定的原理 1 分离原理 dna和蛋白质等其他成分在不同浓度的溶液中不同 利用这一特点 选择适当的盐浓度就能使dna充分 而使杂质沉淀 或者相反 以达到分离目的 nacl 溶解度 溶解 2 提纯原理 dna不溶于溶液 但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精 蛋白酶能水解蛋白质 但是对没有影响 大多数蛋白质不能忍受 的高温 而dna在80 以上才会 洗涤剂能够瓦解 但对dna没有影响 3 鉴定原理 在沸水浴的条件下 dna遇会被染成蓝色 酒精 dna 60 80 变性 细胞膜 二苯胺 二 实验设计1 实验材料的选取选用含量相对较高的生物组织 2 破碎细胞 1 动物细胞的破碎 以鸡血为例 在鸡血细胞中加入一定的 同时用后 收集滤液即可 2 植物细胞的破碎 以洋葱为例 先将洋葱切碎 然后加入一定的和进行充分搅拌和研磨 过滤后收集研磨液 dna 蒸馏水 玻璃棒搅拌过滤 洗涤剂 食盐 3 去除滤液中杂质 1 方案一 通过控制溶液的浓度去除杂质 2 方案二 直接向滤液中加入 反应10 15min 嫩肉粉中的酶能够分解蛋白质 3 方案三 将滤液放在的恒温水浴箱中保温10 15min 注意严格控制温度范围 使沉淀而分子还未变性 可以将dna与蛋白质分离 nacl 嫩肉粉 木瓜蛋白 60 75 蛋白质 dna 4 dna的进一步提纯利用dna不溶于这一原理 可从体积分数为中析出较纯净的dna 此时dna的状态为 5 dna的鉴定将丝状dna溶解于5ml的物质的量浓度为溶液中 再加入4ml的试剂 进行沸水加热5min 待试管冷却后 观察试管中颜色变化 二苯胺要 冷却的酒精 95 的冷却酒精 白色丝状物 2mol lnacl 二苯胺 现配现用 三 操作提示 1 以血液为实验材料时 每100ml血液中需要加入3g 防止 2 加入洗涤剂后 动作要 否则容易产生大量的 不利于后续步骤的操作 加入酒精和用玻璃棒搅拌时 动作要轻缓 以免 导致dna分子不能形成 3 试剂要现配现用 否则会影响鉴定的效果 柠檬酸钠 血液凝固 轻缓 柔和 泡沫 加剧dna分子的断裂 絮状沉淀 二苯胺 1 仔细阅读教材p54 基础知识 的相关内容 分析图5 1曲线 归纳并回答下列问题 1 讨论并交流dna在nacl溶液中的溶解度具有怎样的变化规律 提示 dna在0 14mol l的nacl溶液中溶解度最小 当nacl溶液浓度低于此值时 随nacl浓度的升高 dna溶解度减小 当nacl浓度高于此值时 随nacl浓度的升高 dna溶解度增大 2 根据 1 讨论得到的结果 尝试在下列坐标内构建dna在nacl溶液中溶解度曲线模型 提示 如下图所示 3 想一想 鉴定dna除了用二苯胺试剂外 还有什么方法 提示 利用甲基绿染色 呈现绿色 2 读教材p55 实验设计 相关内容 归纳并回答下列问题 1 本实验选取鸡血细胞作实验材料的原因是什么 提示 鸡血细胞核dna含量丰富 取材容易 鸡血细胞极易吸水涨破 2 选用植物细胞做实验材料 能否通过吸水涨破的方法使其释放出核物质 提示 不能 因为植物细胞含有细胞壁 对细胞膜有支撑作用 不容易吸水涨破 3 利用鸡血细胞提取dna实验过程中 两次用到蒸馏水 其目的相同吗 提示 不相同 第一次用蒸馏水涨破细胞 提取核物质 第二次用蒸馏水稀释nacl溶液析出dna 4 利用鸡血细胞提取dna实验过程中 需进行三次过滤 其目的分别是什么 提示 第一次滤掉核外物质 第二次滤掉核蛋白 第三次滤取dna 5 试分析在提取dna的实验中 用玻璃棒搅拌时需要沿同一个方向缓慢搅拌的原因 提示 防止dna断裂 3 根据你的实验体会 分析讨论下列问题 1 若实验中提取到的丝状物不是白色 且利用二苯胺试剂鉴定后不出现蓝色 分析其原因 提示 dna中杂质太多 dna的含量极低 2 若出现实验结果不明显现象 可能的原因有哪些 提示 材料中核物质没有充分释放出 如研磨不充分或蒸馏水的量不够 加入酒精后摇动或搅拌时过猛 dna被破坏 二苯胺配制时间过长 最好现配现用 否则二苯胺变成浅蓝色 影响鉴定效果 析出含dna的黏稠物时 蒸馏水要沿烧杯内壁慢慢地加入 不能一次性快速加入 否则会影响实验结果 实验中有多次搅拌 但是其目的及操作方法是不同的 要注意区分 否则会影响结果 下列关于 dna粗提取与鉴定实验 的叙述 正确的是 a 洗涤剂能瓦解细胞膜并增加dna在nacl溶液中的溶解度b 将dna丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝c 常温下菜花匀浆中有些酶类会影响dna的提取d 用玻棒缓慢搅拌滤液会导致dna获得量减少 解析 提取植物细胞中dna时加入洗涤剂可瓦解植物细胞膜 利于dna的释放 但不能增加dna在nacl溶液中的溶解度 含dna的丝状物应先溶解在物质的量浓度为2mol l的nacl溶液中 再加入二苯胺试剂在沸水浴条件下检测 菜花匀浆中含有dna水解酶 常温下其活性较高 可催化dna水解 从而影响dna的提取 用玻棒缓慢搅拌滤液不会使dna分子断裂 则不会导致dna的获得量减少 答案 c dna的粗提取与鉴定实验中有三次过滤 1 过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液 2 过滤含黏稠物的0 14mol l的nacl溶液 3 过滤溶解有dna的2mol l的nacl溶液 以上三次过滤分别为了获得 a 含核物质的滤液 纱布上的黏稠物 含dna的滤液b 含核物质的滤液 滤液中dna黏稠物 含dna的滤液c 含核物质的滤液 滤液中dna黏稠物 纱布上的dnad 含较纯的dna滤液 纱布上的黏稠物 含dna的滤液 解析 用蒸馏水稀释鸡血细胞液 使血细胞的细胞膜 核膜破裂 释放出核物质 此时过滤可得到含核物质的滤液 第二次过滤是因dna在0 14mol l的nacl溶液中溶解度最小 dna析出成丝状黏稠物 经过滤留在纱布上 第三次过滤 是将第二次获得的黏稠物溶解在2mol l的nacl溶液中 过滤除去杂质获得含dna的滤液 答案 a 实验中2次加蒸馏水 3次加nacl溶液 1 2次加蒸馏水 第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出dna