肉毒梭菌精讲.ppt

主讲 张静静图片 徐双梅冯桂梅资料收集 杨雪崔学怡姚淑慧幻灯片制作 冯路笛陈希卢雨婷毛海波 肉毒梭菌 形态特征 肉毒梭菌 一 肉毒梭菌的生物学特性1 形态与染色肉毒梭菌属于厌氧性梭状芽胞杆菌属 革兰氏染色阳性 老龄菌是阴性 约为4 1 m的大杆菌 多单在 偶见成双或短链 两侧平行 两端钝园 直杆状或稍弯曲 芽胞为卵圆形 大于菌体宽度 位于次极端 使菌体呈匙形或网球拍状 偶有位于中央 常见很多游离芽胞 有4 8根周生鞭毛 运动迟缓 无荚膜 病毒因子 2 培养特性 最严格的厌氧菌生长最适温度 28 37 pH为6 8 7 6 产毒的最适pH为7 8 8 2 产毒培养温度 不同菌型产毒的最适培养温度不完全相同 C D型温度高些为宜 35 培养3d即可 而E型菌低温度长时间培养效果较好 对营养要求不高 在普通培养基上都能生长 肉毒梭状芽孢杆菌菌落 在固体培养基表面上 形成类圆形 边缘不整齐 约3毫米左右的菌落 菌落半透明 表面一般比较光滑也有的呈颗粒状 界线不明显 向外扩散 呈绒毛网状 常常扩散成菌苔 2 培养特性 在含有肉渣的液体或者半流动培养基中 肉毒梭菌生长旺盛且产生大量气体 A B F三型表面浑浊 底部有粉状和颗粒状沉淀 并能消化肉块 变黑有臭味 而C D E三型表明清亮 絮片状生长 粘贴于管壁 肉毒梭状芽孢杆菌菌落 在葡萄糖鲜血琼脂平板上 菌落较小 扁平 颗粒状 中央低落 边缘不规则 有的菌落还有大的溶血环 在卵黄琼脂平板上生长 菌落及其培养基周围表面覆盖着特有的彩虹样薄层 但G型没有 3 抵抗力 本菌芽胞抵抗力强 在湿热100 可生存5小时 干热180 2小时 高压蒸汽121 30分钟才能将本菌芽胞杀死 肉毒毒素不耐热 100 20分钟即可破坏 二 肉毒梭菌的致病性 肉毒梭菌能产生外毒素即肉毒毒素 大分子蛋白 根据毒素的抗原特异性将其分为A B C 1 2 D E F G七个型别 与毒素型别相对应 肉毒梭菌也分为同样的七个型别 其中A B E F四型毒素对人有不同程度的致病性 A型毒素经60 2分钟加热 差不多能被完全破坏 而B E二型毒素要经70 2分钟才能被破坏 C D二型毒素对热的抵抗更大些 C型毒素要经过90 2分钟加热才能完全破坏 不论如何 只要煮沸1分钟或75 加热5 10分钟 毒素都能被完全破坏 肉毒毒素对酸性反应比较稳定 对碱性反应比较敏感 某些型的肉毒毒素在适宜条件下 毒性能被胰酶激活和加强 致病物质 主要依靠神经外毒素 其作用机制 肉毒杆菌毒素作用于胆碱能运动神经末梢 以某种方式拮抗钙离子的作用 干扰乙酰胆碱从运动神经末梢的释放 使肌纤维不能收缩 肉毒杆菌毒素不阻断神经兴奋的传播 神经和肌肉都没有兴奋性和传导性的损害 这种作用也称为化学去神经作用 致病机理肉毒毒素是一种神经麻痹毒素 主要抑制神经末梢释放乙酰胆碱 引起肌肉松弛麻痹 特别是呼吸肌麻痹导致死亡 肉毒毒素的毒性极强 是目前已知在天然毒素和合成毒剂中毒性最强的生物毒素 据称 精制毒素1克能杀死400万吨小白鼠 一个人的致死量大概1微克左右 肉毒中毒一年四季均可发生 美国以罐头发生中毒较多 日本以水产品较多 我国以发酵食品 如 臭豆腐 豆瓣酱 豆豉等 发生中毒较多 所致疾病 成人肉毒中毒该病是单纯性毒素中毒 而非细菌感染引起 多见于食入肉毒毒素食品后 数小时或数十小时可出现以神经末梢麻痹为主的症状 患者出现斜视 复视 眼睑下垂 严重的出现吞咽 咀嚼困难 口齿不清 进而因膈肌麻痹而死亡 患者神志清醒 不发热 很少有胃肠道症状 婴儿肉毒中毒多见于2周 8个月的婴儿 由于婴儿肠道的特殊环境及缺乏拮抗肉毒梭菌的正常菌群 又食入被梭菌污染的食品 该菌在肠道内生长繁殖并产生毒素 毒素被吸收而致命 最早出现的症状是便秘 吸乳 啼哭无力 其他症状与成人肉毒中毒类似 三微生物学检验 1 取 粪便检查在显微镜检查可见革兰阳性芽胞杆菌 2 细菌培养 将可疑食物 呕吐物或排泄物加热煮沸20分钟后 接种于血琼脂培养基作厌氧培养 可分离出肉毒梭菌 3 毒素试验 1 动物试验将检查标本浸出液饲喂动物 或作豚鼠 小白鼠腹腔内注射 可引起动物四肢瘫痪而迅速死亡 婴儿型者则可用婴儿粪便浸出液作动物试验 2 中和试验将各型抗毒素血清0 5ml注射小白鼠腹腔内 随后接种标本0 5ml同时设对照组 从而判断毒素和定型 3 禽眼睑接种试验将含有毒素的浸出液0 1 0 3ml 注入家禽眼内角下方眼睑皮下 出现眼睑闭合 或出现麻痹性瘫痪和呼吸困难 经数十分钟至数小时死亡 可作为快速诊断 4 毒素检测应用抗肉毒毒素抗体进行中和试验 检查病人血清中肉毒毒素 可对毒素分型 5 肌电图检查 有肌纤维颤动 单次刺激反应降低 多次刺激电势反而增高 有短持续期小波幅多相运动 电势增加等表现 可作为辅助诊断 四防治原则 预防本病的主要方法 1 加强食品卫生管理和监督2 对可疑食品可煮沸半小时以上 破坏肉毒毒素 3 对患者早期注射足量的多价肉毒抗毒素 同时加强护理和对症治疗 尤其是维持呼吸功能 降低死亡率 临床应用 在了解了毒素的结构与功能以及作用机制后 人类开始用毒素来作为有效药物 肉毒毒素被助恶治疗眼睑痉挛 痉挛性斜颈 痉挛性发音困难等疾病美容除皱 去除动态皱纹的原理 将收缩造成皱纹的肌肉麻痹掉 使肌肉不收缩 连带的也去除了皱纹 一般在注射后三 四天就可以看到效果 一周后效果就很明显 效用期约三至六个月 平均四个月 若皱纹再出现 视个人需要 可重复施打 肉毒杆菌毒素除皱还是有一定的并发症和副作用 如注射局部有头痛 抬头纹处注射不当时会发生睑下垂 鱼尾纹处注射不当时会发生复视及闭眼不全 因注射剂量不准确 一侧多 一侧少会发生不对称的结果 进针刺破血管偶而发生出血或血肿 大剂量 反复注射可能会引起免疫复合物疾病 肌肉麻痹的结果是不能做各种表情 副作用 尽管如此 肉毒杆菌毒素除皱还是有一定的并发症和副作用 如注射局部有头痛 抬头纹处注射不当时会发