26-第五章-中药质量标准和鉴定二

第五章-中药质量标准和鉴定（二）第二节 中药鉴定的内容和方法（三）显微鉴定（了解即可）显微鉴别是利用显微技术对中药进行特征分析，以确定其品种和质量的一种鉴定方法。显微鉴定主要包括组织鉴定和粉末鉴定。组织鉴定是通过观察药材的切片或磨片鉴别其组织构造特征，适合于完整的药材或粉末特征相似的同属药材的鉴别；粉末鉴定是通过观察药材的粉末制片或解离片鉴别其细胞分子及内含物的特征，适合于破碎、粉末状药材或中成药的鉴别（1）细胞内含物鉴定 （2）细胞壁性质鉴定（四）理化鉴定理化鉴别是利用某些物理的、化学的或仪器分析方法，鉴定中药的真实性、纯度和品质优劣程度的一种鉴定方法。通过理化鉴定，分析中药中所含的主要化学成分或有效成分的有无和含量的多少，以及有害物质的有无等。1.物理常数的测定包括相对密度、旋光度、折光率、硬度、黏稠度、沸点、凝固点、熔点等的测定。如中国药典规定蜂蜜的相对密度在1.349以上，蜂蜜中掺水就会影响黏稠度，使相对密度降低。药典还对有些药材的物理常数作了规定，薄荷油相对密度为0.8880.908;冰片（合成龙脑）的熔点为205210度；肉桂油的折光率为1.6021.614等。天竺黄规定检查体积比，即取天竺黄粉末（过4号筛）10g，轻轻装人量筒内，其体积不得少于35ml。2.一般理化鉴别（1）膨胀度测定：主要用于含黏液质、胶质和半纤维素类的天然药品。中国药典规定，车前子膨胀度不低于4.0；哈蟆油膨胀度不低于55；葶苈子膨胀度南葶苈子不低于3，北葶苈子不低于12。（2）显色反应：利用药材的某些化学成分能与某些试剂产生特殊的颜色反应来鉴别。一般在试管中进行，亦有直接在药材饮片或粉末上滴加各种试液，观察呈现的颜色以了解某成分所存在的部位。例如马钱子胚乳薄片置白瓷板上，加1%钒酸铵的硫酸溶液1滴，迅速显紫色（示番木鳖碱），另取切片加发烟硝酸1滴，显橙红色（示马钱子碱）。甘草粉末置白瓷板上，加80%硫酸12滴，显橙黄色（示甘草甜素反应）。（3）沉淀反应：利用药材的某些化学成分能与某些试剂产生特殊的沉淀反应来鉴别。如山豆根的70%乙醇提取液，蒸干，残渣用1%盐酸溶解，滤液加碘化汞钾，生成明显的淡黄色沉淀。赤芍用水提取，滤液加三氯化铁，生成蓝黑色沉淀。芦荟水提液，加等量饱和溴水，生成黄色沉淀。（4）泡沫反应和溶血指数的测定：利用皂苷的水溶液振摇后能产生持久性的泡沫和溶解红细胞的性质，可测定含皂苷成分药材的泡沫指数或溶血指数作为质量指标。如中国药典用泡沫反应鉴别猪牙皂。（5）微量升华：是利用中药中所含的某些化学成分，在一定温度下能升华的性质，获得升华物，在显微镜下观察其结晶形状、颜色及化学反应作为鉴别特征。（6）显微化学反应：黄连滴加30%硝酸，可见针状小檗碱硝酸盐结晶析出。紫苏叶的某些表皮细胞中含有紫色素，表面制片观察时，滴加10%盐酸溶液立即显红色；或滴加5%氢氧化钾溶液，即显鲜绿色，然后变为黄绿色。丁香切片滴加3%氢氧化钠的氯化钠饱和溶液，油室内有针状丁香酚钠结晶析出。肉桂粉末加三氯甲烷23滴，略浸渍，速加2%盐酸苯肼1滴，可见黄色针状或杆状结晶（桂皮醛反应）。槟榔粉末0.5g，加水34ml及稀硫酸1滴，微热数分钟，取滤液于载玻片上，加碘化铋钾试液1滴，即发生混浊，放置后可见石榴红色球形或方形结晶（槟榔碱）。（7）荧光分析：利用中药中所含的某些化学成分，在紫外光或自然光下能产生一定颜色的荧光性质进行鉴别。直接取中药饮片、粉末或浸出物在紫外光灯下进行观察。例如国产沉香与进口沉香的显微特征比较近似，但在荧光显微镜下观察，国产沉香粉末中部分颗粒显海蓝色，部分显灰绿色荧光；进口沉香粉末的部分颗粒显竹篁绿色，部分显枯绿色荧光。含有伞形花内酯成分的药材，新鲜切片显亮绿色荧光，如常山等。浙贝母粉末在紫外光灯下显亮淡绿色荧光。秦皮的水浸出液在自然光下显碧蓝色荧光。有些中药本身不产生荧光，但用酸、碱或其他化学方法处理后，可使某些成分在紫外光灯下产生可见荧光。例如芦荟水溶液与硼砂共热，所含芦荟素即起反应，显黄绿色荧光。枳壳乙醇浸出液滴在滤纸上，干后喷0.5%醋酸镁甲醇溶液，烘干显淡蓝色荧光。矿物药所含锌、硼、铅等元素和某些有机试剂作用能产生荧光现象。有些中药表面附有地衣或真菌，也可能有荧光出现。因此荧光分析还可用于检查某些中药的变质情况。利用荧光显微镜观察中药化学成分存在的部位。如黄连含小檗碱成分，折断面在紫外光灯下，显金黄色荧光，木质部尤为显著，说明在木质部小檗碱含量较高。（五）其他鉴定方法和技术随着现代自然科学技术的发展，许多高新实验技术和新学科理论不断渗透到中药鉴定领域，使中药鉴定学成为多学科的汇集点，并向高速化、信息化、标准化方向迈进。除上述鉴定方法外，目前中药鉴定的新技术和新方法简介如下。1.DNA分子遗传标记技术中国药典将聚合酶链反应-限制性内切酶长度多态性方法，用于川贝母、乌梢蛇、蕲蛇的鉴别。2.中药指纹图谱鉴定技术中国药典将高效液相特征指纹图谱用于羌活、沉香的鉴别。二、中药的安全性检测（一）内源性有毒、有害物质及检测中药中主要的内源性有毒、有害特质是指中药本身所含的具有毒副作用的化学成分。如：肾毒性成分马兜铃酸，主要存在于马兜铃科马兜铃属的关木通、广防己、青木香、马兜铃、天仙藤、朱砂莲等药材中。肝毒性成分吡咯里西啶生物碱，主要存在于千里光、佩兰等药材中。二、中药的安全性检测（二）外源性有害物质及检测1.重金属及有害元素测定重金属总量用硫代乙酰胺或硫化钠显色反应比色法，测定铅、镉、汞、铜重金属元素采用原子吸收光谱法和电感耦合等离子体质谱法。中国药典规定，甘草、黄芪、丹参、白芍、西洋参、金银花、枸杞子、山楂、阿胶、牡蛎等含铅不得过5mg/kg，镉不得过0.3mg/kg，汞不得过0.2mg/kg，铜不得过20mg/kg。砷盐检查：中国药典采用古蔡氏法或二乙基硫代氨基甲酸银法两种方法检查砷盐。中国药典规定玄明粉含砷盐不得过20mg/kg；芒硝含砷盐不得过10mg/kg；石膏含砷盐不得过2mg/kg；阿胶含砷盐不得过2mg/kg。中国药典规定用原子吸收分光光度法和电感耦合等离子体质谱法测定砷元素，并规定甘草、黄芪、丹参、西洋参、白芍、金银花、枸杞子、山楂、阿胶、牡蛎等含砷不得过2mg/kg。2.农药残留量农药的种类很多，主要有有机氯、有机磷和拟除虫菊酯类等。其中有机氯类农药中滴滴涕（DDT）和六六六（BHC）是使用最久、数量最多的农药。中国药典对人参、西洋参、甘草和黄芪有机氯农药的残留量进行了规定，六六六（BHC）不得超过0.2mg/kg；滴滴涕（DDT）不得超过0.2mg/kg；五氯硝基苯（PCNB）不得超过0.1mg/kg；人参、西洋参还规定，六氯苯不得过0.1mg/kg；七氯不得过0.05mg/kg；艾氏剂不得过0.05mg/kg；氯丹不得过0.1mg/kg。有机磷农药常见的有敌敌畏、对硫磷、乐果等。中国药典采用气相色谱法测定药材及制剂中部分有机氯、有机磷和拟除虫菊酯类的农药残留量。3.黄曲霉毒素中国药典规定用高效液相色谱法测定药材、饮片及制剂中的黄曲霉毒素（以黄曲霉毒素B1、B2、G1、和G2总量计）的限量。4.二氧化硫残留量中国药典用酸碱滴定法、气相色谱法、离子色谱法分别作为第一法、第二法、第三法测定经硫黄熏蒸处理过的药材或饮片中二氧化硫的残留量。规定二氧化硫残留量不得过400mg/kg的药材有：山药、天冬、天花粉、天麻、牛膝、白及、白术、白芍、党参、粉葛等。续表 续表X型题（多项选择题）25.中国药典规定，应检查SO2残留量的药材（ ）。A.山药B.天冬C.牛膝D.天麻E.天花粉网校答案：ABCDE三、中药的质量评价目前对中药质量优劣的评价，除临床疗效的评价外，常可通过中药传统的经验鉴别、中药纯度检查及与药效相关的化学成分的定性、定量分析来评价。此外，中药生物活性测定法是以药物的生物效应为基础，以生物统计为工具，运用特定的实验设计，测定药物有效性的一种方法，也能起到控制药物质量的作用。（一）传统经验鉴别自古认为东北的“关防风”以其“蚯蚓头，质松泡”为道地；茅苍术以“断面朱砂点多，香气浓者为佳”，其朱砂点正是其油室中含有橙黄色或红棕色分泌物而形成；红花以色红而鲜艳者为佳；黄连、黄柏以其色黄、味极苦为佳；玄参、生地黄均以断面乌黑者为佳，这是与其有效成分环烯醚萜苷有关。很多以香气浓者为佳的中药材如伞形科的川芎、当归、白芷，唇形科的薄荷、荆芥，樟科的肉桂，桃金娘科的丁香，姜科的豆蔻、砂仁，菊科的木香、川木香，芸香科的陈皮、枳壳、香橼以及树脂类药材苏合香、安息香等，无不与其所含的药效物质为挥发油或游离芳香酸有关。甘草味甜而特殊是因其含药效成分甘草甜素；以味极酸者为佳的乌梅与其含大量有机酸有关；以味苦为佳的穿心莲是因为其含苦味的二萜内酯类成分如穿心莲内酯等；以味涩为佳的五倍子、儿茶是因其含大量的鞣质；而以辛辣味浓为佳的干姜、生姜则因其所含姜酚类成分而呈特殊的姜辣味。（二）纯度检査中国药典中与纯度相关的检查主要包括杂质检查、水分测定、干燥失重、灰分测定、色度检查、酸败度测定等，并已成为中药质量评价中的常规检查项。1.杂质检查杂质是指药材中混存的来源与规定相同，但其性状或部位与规定不符；或来源与规定不同的有机质或无机杂质，如砂石、泥土、尘土等。中国药典规定广藿香杂质不得过2%，金钱草杂质不得过8%等。2.水分测定中国药典对大多数药材和饮片规定了水分的限量，如人参不得过12.0%，红花不得过13.0%，阿胶不得过15.0%等。水分测定法：中国药典规定水分测定法有五种：3.灰分测定测定灰分的目的是限制中药中无机杂质如泥土、沙石的含量，以保证中药的纯度。灰分测定法：中国药典规定的灰分测定法有两种：总灰分测定法和酸不溶性灰分测定法。酸不溶性灰分是指总灰分中不溶于稀盐酸的灰分。有些中药如大黄，其组织中含有较多的草酸钙结晶，仅测定总灰分不能反映无机杂质存在的客观情况，若在总灰分中加入稀盐酸，使其中来源于中药本身的钙盐等溶解，而外来的泥土、沙石等主要是硅酸盐，因不溶于稀盐酸而作为酸不溶性灰分残留下来，故测定酸不溶性灰分能准确地反映其外来无机杂质的情况。中国药典已将灰分测定作为一种常规检查，对大多数药材和饮片规定了限量检查指标。如规定当归总灰分不得过7.0%，酸不溶性灰分不得过2.0%；秦艽总灰分不得过8.0%，酸不溶性灰分不得过3.0%等。4.色度检査含挥发油或油脂类成分的中药，在贮藏过程中常发生氧化、聚合、缩合而致变色或“走油”。许多中药目前仅靠感官评判变色与“走油”程度，缺乏良好指标。中国药典规定检查白术的色度，就是利用白术的酸性乙醇提取液与黄色9号标准比色液比较，不得更深，用以检查有色杂质的限量，从量化的角度评价和控制其药材变色、走油变质的程度。5.酸败度测定酸败度是指油脂或含油脂的种子类药材和饮片，在贮藏过程中发生复杂的化学变化，产生游离脂肪酸、过氧化物和低分子醛类、酮类等分解产物，因而出现异臭味，这种现象称“酸败”。酸败度测定通过酸值、羰基值或过氧化值的测定，以检查药材的酸败程度。如中国药典规定苦杏仁的过氧化值不得过0.11；郁李仁的酸值不得过10.0、羰基值不得过3.0、过氧化值不得过0.05。（三）与有效性有关的定量分析1.全草类中药含叶量的检査中国药典规定穿心莲药材叶不得少于30%，薄荷药材叶不得少于30%，广藿香药材叶不得少于20%等，从而保证这些中药的总体质量。2.浸出物测定浸出物测定法：中国药典规定，浸出物测定法有3种：水溶性浸出物测定法，分为冷浸法和热浸法。醇溶性浸出物测定法，亦分为冷浸法和热浸法。挥发性醚溶性浸出物测定法。3.含量测定目前采用最多的方法是高效液相色谱法。有效成分或指标性成分清楚的可进行针对性定量；有效成分尚不清楚而化学上大类成分清楚的，可对总成分如总生物碱、总蒽醌、总黄酮、总皂苷等进行含量测定；含挥发油成分的，可测定挥发油含量。（四）中药生物活性测定法其测定方法包括生物效价测定法和生物活性限制测定法等。中国药典中水蛭就采用了生物效价检测方法控制其质量。 【例-单选题】取用量为“约”若干时，系指取用量不得超过规定量的（ ）。A.15%B.10%C.5%D.3%E.1%网校答案：BA.星点B.云锦状花纹C.朱砂点D.车轮纹E.菊花心6.甘草药材横切面显（ ）。7.防己药材横切面显（ ）。8.何首乌药材横切面显（ ）。网校答案：EDB【例-单选题】具有“蚯蚓头”,横切面是“菊花心”的药材是（ ）。A.川芎B.人参C.升麻D.防风E.三棱网校答案： DA.西红花 B.秦皮 C.小通草 D.熊胆粉 E.苏木11.投热水中，水显鲜艳的桃红色的是（ ）。12.加水浸泡后，水液染成金黄色，药材不变色的是（ ）。13.遇水表面显赫性的是（ ）。14.投入清水杯中，即在水面旋转并呈黄色线状下沉而短时间内不扩散的是（ ）。网校答案： EACDA.车轮纹B.罗盘纹C.菊花心D.星点E.云锦状花纹15.试卷附图中，图1的横切面特征匀称（