制剂仿制药HPLC含量方法验证方案.doc

1. 验证目的 根据法规的要求，采用非药典或其它法规未收载的分析方法应进行验证，证明采用的方法适合于相应的检测要求。 这个验证方案的目的是为验证提供具体方法参数、可接受标准和研究步骤。2.方法简介与确认范围 *制剂含量检测方法为自行开发（或参考*标准建立）的高效液相色谱方法。为确保方法的准确性和可行性，为日常检测方法提供依据，现对该方法进行验证。方法验证必须按照验证方案进行，此次验证方案提供*制剂含量分析方法验证验证，包括：专属性、精密度、线性和范围、准确度、耐用性。3. 仪器设备、标准品和试剂、供试品3.1 仪器设备仪器名称型号编号验证有效期高效液相色谱仪高效液相色谱仪电子分析天平.3.2标准品和试剂名称批号来源级别3.3供试品名称批号来源4. 验证的方法4.1 溶液配制4.1.1 溶剂配制：4.1.2 杂质储备液配制：4.1.3 系统适用性溶液配制：4.1.4 对照品溶液配制：4.1.5 供试品溶液配制：.4.2 色谱条件色谱柱：波长： 柱温： 流速： 进样量：流动相：梯度/运行时间5. 验证内容及可接受标准5.1 含量色谱条件摸索名称试验内容备注检测波长选择（1）取各主药加甲醇（或乙腈）溶解并稀释制成各约含XXug/ml（一般10ug/ml）的溶液，进行UV扫描（200nm400nm），取最大吸收波长或平滑区间的波长作为检测波长；（2）参考文献或各国药典进行波长选择溶剂：能溶解供试品的常用溶剂。浓度：吸光度读数以在0.30.7之间为宜色谱条件摸索（流动相、色谱柱的摸索）先查文献或各国药典，用系统适用性溶液和主药初步选择条件，再在此基础上进行参数优化。主要考察主成分峰的理论板数、拖尾因子、空白辅料干扰情况等。主峰的保留时间一般在515min，主峰峰型好，理论板数5000以上，拖尾因子在1.5以下。主药的配制浓度：根据检测结果，峰高适中。专属性分别取空白辅料、各杂质及供试品配成一定浓度，分别进样。分离度溶液：配制成含主药的浓度及各杂质浓度为1%（主药的含量测定浓度）空白辅料应不干扰主峰；杂质与主峰的分离度应大于2.0；如果主成分含量测定浓度在有关物质测定浓度的10%以下，杂质峰与主峰分离不开也可以接受。滤膜吸附试验取对照品或供试品试验，用空白溶剂配制样品，分别滤出第1、2、3.ml，检测结果与离心样品结果比较（用对照品时不必离心），用峰面积评价吸附强度与离心样品结果比较（用对照品时不必离心），偏差1%时认为无吸附5.2 含量方法学验证具体内容及可接受标准试验内容溶液配制方法进样针数可接受标准备注系统适用性按标准配制系统适用性溶液（如有），配制1份；按标准配制对照品溶液1份。空白溶剂1针；系统适用性溶液1针；对照品溶液6针系统适用性溶液分离度、主峰理论板数、拖尾因子应符合标准要求；6针对照品主峰面积RSD1.0%；保留时间RSD1.0%。-方法专属性空白辅料溶液：取空白辅料适量，用溶剂配制成相当于供试品溶液中含辅料量；主药定位溶液：用溶剂配制成含主药XXmg/ml；各杂质定位溶液：先配制成各杂质贮备液，再用溶剂配制成分别含各杂质1%浓度；混合溶液：取空白辅料、主药及各杂质贮备液适量，用溶剂配制成含主药XXmg/ml和含各杂质1%浓度；各溶液分别配制1份空白溶剂1针；溶液分别1针空白溶剂、空白辅料应不干扰主峰；除另有规定外，各杂质峰与主峰分离度应不小于2.0。如果主成分含量测定浓度在有关物质测定浓度的10%以下且有关物质中杂质控制限度在1.0%以下，杂质峰与主峰分离不开也可以接受。-重复性按照标准配制系统适用性溶液1份、供试品溶液6份、对照品溶液2份。空白溶剂1针；对照品溶液1进样5针，其它各溶液分别2针6份样品含量测定结果的RSD1.5%；12份样品含量测定结果的RSD2.0%。-中间精密度不同人员，在不同日期，用不同仪器实验。按照标准配制系统适用性溶液1份、供试品溶液6份、对照品溶液2份空白溶剂1针；对照品溶液1进样5针，其它各溶液分别2针线性范围用主药对照品用适合溶剂配制成贮备液，再用溶剂配制至少5个浓度（50150%）的线性溶液各1份。空白溶剂1针；各溶液1针相关系数（R）不得小于0.9990，Y轴截距应在100%响应值的2%以内，响应因子的RSD2.0%。-准确性对照品溶液：按照标准配制2份加样溶液：向一定量的空白辅料中加入对照品，配制至少3个浓度（80120%）的溶液。每个浓度配制3份。空白溶剂1针；对照品溶液1进样5针，其它溶液每份2针一般按限度80%、100%及120%浓度水平：每个样品回收率在98102%，9个回收率RSD2.0%。统计95%的置信区间。-溶液稳定性取按标准配制对照品溶液、供试品溶液各1份空白溶剂1针；0、1、2、4、6、8、24小时各进对照品、供试品溶液1针按峰面积变化量来衡量溶液稳定性，如果各时间点峰面积RSD2.0%，可判断样品稳定；如果某时间点峰面积与0h相比较变化量大于2.0%，即判断该时间段内溶液不稳定。-耐用性按照标准配制系统适用性溶液、对照品溶液2份、供试品溶液1份变化条件：流动相pH0.2；流动相配比5%柱温2（如有柱温）不同（批号）色谱柱流速相对值变化10供试品溶液提取方法：如果供试品溶液不能溶清，需要对提取溶剂用量、超声（振摇）时间进行验证每个条件下空白溶剂、系统适用性溶液各1针，对照品溶液1进5针，其它溶液每份2针各条件下空白溶剂均不干扰主峰检测；系统适用性符