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基础知识:电泳1 关于电泳的说法不正确的是()A电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程B带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动C蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少D用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小2 蛋白质分子中,氨基酸的-氨基和-羧基虽然大部分结合成为肽键,但是蛋白质分子内仍含有各种酸性基团和碱性基团,如肽链末端的-氨基和-羧基、天冬氨酸和谷氨酸残基中的羟基、赖氨酸和组氨酸残基中的各种碱性基团,所以蛋白质是两性电解质。在酸性溶液中,碱性基团的解离增大,使蛋白质带正电荷;在碱性溶液中,酸性基团的解离加强,使蛋白质带负电荷。当溶液到达某一pH时,蛋白质可因内部酸性和碱性基团的解离相等而呈等电状态,这时的溶液pH叫做蛋白质的等电点。不处于等电点状态的蛋白质分子的正、负电荷量是不相同的。试回答下列问题。(1)多数蛋白质的等电点近于5,一般含碱性基团较多的蛋白质的等电点_(填“偏高”或“偏低”)。(2)根据等电点的不同,你能用_方法将不同种类的蛋白质分子分开。(3)简述根据等电点分离不同种类的蛋白质分子的原理。_。3 下列有关提取和分离血红蛋白的实验叙述错误的是()A该实验的材料必需选用鸡血B通过透析法可以去除样品中分子质量较小的杂质,此为样品的粗提取C凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质D电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小和形状不同进行分离4 下列关于蛋白质性质的叙述中,不会影响到蛋白质的泳动速度的是()A蛋白质分子的大小 B蛋白质分子的密度C蛋白质分子的形状 D蛋白质分子的等电点5 有一混合蛋白质溶液,其中蛋白质的pI(等电点)分别为4.6、5.0,电泳时欲使它们泳向正极,缓冲液的pH应该是()A6.0 B5.0 C4.0 D3.06 下列带电颗粒中泳动速度最快的是()A直径大、球形、净电荷多B直径小、球形、净电荷多C直径大、方形、净电荷少D直径小、方形、净电荷多7 下列有关电泳现象的叙述,不正确的是()A相同蛋白质的溶液,经过同一个电场电泳后,会在支持物凝胶上形成相同的带纹B不同蛋白质的混合溶液,经过同一个电场电泳后,在支持物凝胶上形成不同的带纹C每一种带纹可能就是一种蛋白质D每一种带纹一定不是一种蛋白质8 下列与蛋白质有关的说法中,不正确的是( )A SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法中,蛋白质的迁移速率只取决于分子质量大小B 血浆渗透压的大小主要与无机盐、蛋白质的含量有关C 功能越复杂的细胞膜,蛋白质的种类和数量越多D 为了后续的分离纯化蛋白质,可以利用蒸馏水洗涤红细胞去除杂质蛋白9 下列有关电泳的叙述,不正确的是()A电泳的支持介质可用醋酸纤维薄膜,滤纸、琼脂凝胶等B带电粒子的电荷量、粒子大小和形状都可以影响泳动速度C点样时,应将有记号的一面向上平铺在玻璃板上进行点样D电泳时,电流强度越大,电泳效果越好10 使用SDS聚丙烯酰胺电泳的过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于( )A电荷的多少 B.分子的大小C肽链的多少 D.分子形状的差异参考答案:1 答案: C解析: 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素,SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物,SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差异,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。2 答案: (1)偏高(2)电泳(3)调节电泳槽中缓冲液的pH,使某种蛋白质处于等电点状态,而其他蛋白质带有电荷,在电场作用下,带有正、负电荷的蛋白质分别移向两极,而不带电荷的蛋白质留在原处。解析: 本题深入到蛋白质内部,从蛋白质分子带电性质及数量的角度,引导学生理解电泳法分离蛋白质的原理。含碱性基团较多的蛋白质溶液,在pH近于5时解离程度较大,蛋白质带正电荷。要使蛋白质内部酸性和碱性基团解离相等呈等电状态,必须提高溶液的pH,使酸性基团解离增加,故蛋白质的等电点提高。根据等电点不同,可以利用电泳法将特定的蛋白质分离出来。3 答案: A解析: 因为鸡血细胞中含有细胞核以及各种复杂的细胞器,会给提取血红蛋白带来一定的难度,故提取血红蛋白一般选用哺乳动物的成熟红细胞。4 答案: B解析: 电泳是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。5 答案: A解析: 当缓冲液的pH值大于蛋白质等电点时,会诱导羧基基团的电离,这样蛋白质本身就呈电负性,在电场的作用下,向正极移动。6 答案: B解析: 一般来说,带电颗粒直径越小,越接近于球形,所带净电荷越多,则在电场中的泳动速度越快;反之,则越慢。7 答案: D解析: 不同蛋白质的混合溶液,在经过同一个电场电泳后,会在凝胶上形成不同的带纹。不同的蛋白质可以在同一带纹中,但同一种蛋白质一定存在于同一带纹中。8 答案: D9 答案: D解析: 电泳时,每厘米膜宽电流强度为0.40.8
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