高中生物 专题5 DNA和蛋白质技术 课题1 DNA的粗提取与鉴定教案 新人教版选修1.doc

专题5课题1dna的粗提取与鉴定一、课题目标1.知识目标a.了解dna的物理化学性质。b.理解dna粗提取与鉴定的原理。2.能力目标a.掌握dna粗提取及鉴定方法。b.利用dna的性质进行实验设计和操作。3.情感目标通过对dna的粗提取的实验过程的设计及操作，锻炼科学的思维方法，培养实事求是的科学态度。二、课题重点dna的粗提取和鉴定方法。三、课题难点dna的粗提取和鉴定方法。四 教学流程教学流程教师活动学生活动设计意图环节二：讲授新课一、基础知识1.提取dna的方法通过介绍dna的溶解性和 dna对酶、高温和洗涤剂的耐受性，让学生体会提取dna的方法。（1）dna的溶解性不同浓度的nacl溶液中溶解度 让学生分析教材图5-1“dna在nacl溶液中溶解度曲线，回答问题，理解dna溶解度随nacl溶液浓度的变化情况。问题1.dna在nacl溶液中的溶解度如何变化？在nacl溶液浓度低于0.14 mol/l时，dna的溶解度随nacl溶液浓度的增加而逐渐降低；在0.14 mol/l时，dna溶解度最小；当nacl溶液浓度继续增加时，dna的溶解度又逐渐增大。问题2.如何通过控制nacl溶液的浓度使dna在盐溶液中溶解或析出？当氯化钠的物质的量浓度为 2moll时，dna的溶解度最大，浓度为 0.14 moll时，dna的溶解度最低。利用这一原理，可以使dna在盐溶液中溶解或析出。 讲述：dna不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将dna与蛋白质进一步分离。（2）dna对酶、高温和洗涤剂的耐受性讲述dna对蛋白酶、高温和洗涤剂的耐受性。蛋白酶能水解蛋白质，但是对dna没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080的高温，而dna在80 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对dna没有影响。2.dna的鉴定介绍 dna的鉴定方法。二苯胺染色法 dna与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色甲基绿染色法甲基绿与dna结合，呈绿色 【典型例题】 下列有关“dna粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（ ）（多选） a新鲜猪血、菜花等动植物材料均可用于dna的粗提取b植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水胀破cdna不溶于95%的冷酒精而溶于2mol/l的nacl溶液d溶有dna的nacl溶液中加人二苯胺试剂，需沸水浴加热后冷却，再观察颜色【答案】 cd 【方法点拨】 1.新鲜猪血中大量成熟红细胞内无dna 2.植物材料需先用纤维素酶和果胶酶破坏细胞壁再吸水胀破 3.dna不溶于95%的冷酒精而溶于2mol/l的nacl溶液 二、实验设计讲述实验设计几个方面内容，再以动画形式展现以鸡血细胞为材料进行dna的提取和鉴定。1.实验材料的选取（1）选取原则dna含量丰富 材料易得 提取简便（2）选材鸡血细胞2.破碎细胞，获取含dna的滤液（1)动物细胞加入蒸馏水，搅拌过滤后收集滤液 （2）植物细胞加入洗涤剂和食盐，搅拌研磨后过滤收集滤液3.去除滤液中的杂质问题1：滤液中的杂质可能有哪些细胞成分？核蛋白、多糖和rna等杂质展示三种方案，让学生分析回答问题。方案一：30ml含dna的滤液2mol/l nacl同方向搅拌，dna溶解加入蒸馏水dna析出过滤得到过滤物放到2mol/lnacl溶液中溶解dna-nacl溶解液问题2：为什么反复地溶解与析出dna，能够除去杂质？用高浓度的盐溶液能除去高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使dna析出，能除去在低盐溶液中的杂质。方案二：30ml滤液嫩肉粉（木瓜蛋白酶）静置1015分钟dna滤液方案三：30ml滤液6075恒温保温1015分钟过滤获得dna滤液问题3：方案二与方案三的原理有什么不同？方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白质，使提取的dna与蛋白质分开；方案三是利用dna和蛋白质对高温耐受性的不同，使蛋白质变性，与dna分离。4.dna的析出与鉴定（1）析出：滤液+同体积冷却95%酒精白色丝状物（2）溶解：将白色丝状物溶于2mol/l的nacl溶液中（3）鉴定： dna二苯胺 蓝色物（沸水浴5分钟）【典型例题】 下表有关“dna粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂， 错误的是（ ）相关操作选取的试剂a 破碎鸡血细胞蒸馏水b 溶解核内dna 2mol/lnacl溶液c 提取杂质较少的dna 冷却的95%的酒精d dna的鉴定双缩脲试剂【答案】d【方法点拨】1.可以利用dna在氯化钠溶液中的溶解度不同，将dna分子溶解或析出 2.dna不容易酒精，因此可以用95%的冷酒精提取杂质较少的dna 三、操作提示讲解操作步骤注意事项。1.以鸡血为实验材料时，每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠，防止血液凝固。2.加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧dna分子的断裂，导致dna分子不能形成絮状沉淀。3.二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。阅读、思考、回答。演练、回答。阅读、倾听、思考、回答。进行实验设计。演练、回答。了解dna的物理化学性质；理解dna粗提取与鉴定的原理。掌握dna粗提取及鉴定方法；利用dna的性质进行实验设计和操作。环节三：课堂小结共同回顾本节要点：呼应、回答。突出本节重点。环节四：课堂练习（2015江苏卷.25） 图1、2 分别为“dna 的粗提取与鉴定”的实验中部分操作步骤示意图,下列叙述正确的是（ ）（多选）a. 图1、2 中加入蒸馏水稀释的目的相同b. 图1 中完成过滤之后保留滤液 c. 图2 中完成过滤之后弃