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文档简介
图中代表这些序列与引物匹配的得分值小于40分图中代表这些序列与引物匹配的得分值位于4050分图中代表这些序列与引物匹配的得分值位于80120分,分值越高,特异性越好。线段代表上或下游引物,其颜色和上面对照后就可得出该条引物的分值。图中两线段间有连线的代表这些序列与上游引物匹配(Strand=Plus/Plus)、并与下游引物互补(Strand=Plus/Minus),理论上可以扩增出基因片断。没有连线的,表示单条引物与该基因一致。 点击线段,就能跳转到该基因的结果信息概要。(2)结果信息概要:Accession、数据库系列的身份证:点击之后可以获得该序列的信息Desscription、系列的简单描述 Total score高的就是有两线段间有连线的,如图划线的。E value:代表被比对的两个序列不相关的可能性。【The E value decreases exponentially as the Score (S) that is assigned to a match between two sequences increases】。E值最低的最有意义,也就是说序列的相似性最大。设定的E值是我们限定的上限,E值太高的就不显示了E、最后一栏有的有UEG的字样,其中: U代表:Unigene数据库 E代表:GEO profiles数据库G代表:Gene数据库(3)结果详细信息: 划线上代表上游引物与该序列的正链【Plus/Plus】的匹配情况:划线下代表下游引物与该序列的负链【Plus/Minus】的匹配情况:共有20个碱基匹配,得分40.1分【2020.140.1】,E值为0.077。为什么与上下游引物匹配的ABCG2序列有多种?A、 为同一个基因来源的不同的mRNA片段B、 为该基因的DNA系列C、 为同一个基因来源的不同的cDNA克隆片段。结果判断:验证文献报道的引物是否正确:如果你可以在所显示的结果中找出你的目的基因,一般说明你的引物正确性没问题。如果你blast后没有发现你的目的基因,或者分值很低,该引物就可能不适合用检测该对引物是否可与其它序列匹配,引起PCR的非特异性扩增。如果找到了你的目的基因名称,而且找到了一大批同物种的不同基因,(上下游引物分别搜索到相同的基因),而且分数也较高。这时表明你的引物设计的特异性不高,极有可能在你的扩增产物中出现非特异性产物。更多信息请参见1、/bbs/actions/archive/post/2168427_1.html2、/index.php/BLAST3、/Education/BLASTinfo/tut1.html4、/bbs/post/view?bid=73&id=288677&sty=3&keywords=blast5、/bbs/actions/archive/post/6441600_1.html6、/topic/004/netgui
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