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柱层析法的原理和方法 一 原理 柱层析是化合物在液相和固相之间的分配 属于固 液吸附层析 利用固定相对液体相中的各组分吸附能力不同 从而以不同速度向下迁移 形成若干色带 分别收集 二 操作 1 装柱 干法1 管上端放一漏斗2 将硅胶装入3 轻敲管壁使之填装均匀 湿法1 将溶剂装入管内 2 将吸附剂和溶剂调成浆状 倒入管中 3 使溶剂流出 吸附剂下沉 吸附剂 种类 氧化铝 硅胶 氧化镁 碳酸钙和活性炭等 氧化铝有酸 碱 中性 适用于不同类型化合物的分离 硅胶没有酸碱性之分 可适用于各类有机物的分离 吸附剂的选择 a 与被吸附物及展开剂均无化学作用 首要 b 吸附能力的大小 颗粒大小 c 吸附剂的活性 含水量 d 分子极性 上样 2 3 淋洗 洗脱剂的选择 根据点板的比移值 简称Rf值 洗脱剂极性比较 己烷 石油醚 环己烷 四氯化碳 三氟乙烯 二硫化碳 甲苯 苯 二氯甲烷 三氯甲烷 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 丙醇 乙醇 甲醇 水 吡啶 乙酸 4 分类 5 收集 根据样品中各组分的吸附能力判断流出的各组分若为有色物质 观看色带 若无色 点板观察 收集含目标物
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