药物分析讲稿-第十六章 药品质量标准的制订.doc

第十六章 药品质量标准的制订 桂林医学院药学-唐岩松第十六章 药品质量标准的制订第一节 概述一、制订药品标准的目的和意义： 制订药品标准的目的就是为了控制药品的质量，维持药品质量的稳定性、均匀性和一致性。 制订药品标准的意义体现在能保证人们用药的安全性与有效性，并且有利于药品经济贸易的发展。二、制订药品质量标准的原则 制订药品质量标准，应遵循以下原则：坚持质量第一，充分体现“安全有效、技术先进、经济合理、不断完善”的原则。1、安全有效 药品质量的优劣，主要表现为安全(即不良反应少)、有效(即疗效肯定)。药物的不良反应，一方面是由药物本身造成的；另一方面可能是由引入的杂质所造成。因此，对那些毒性较大的杂质应严格控制。药物的晶型及异构体可能对生物利用度及临床疗效有较大影响，故应着重研究。2、先进性 在制订药品质量标准的过程中，所采用的方法和技术在我国国情允许的情况下，应尽可能采用较先进的方法和技术，如果研制的新药国外已有标准，则国内的标准应尽可能达到或超过国外的标准。3、针对性 要从生产、流通、使用的各个环节去考察影响药品质量的因素。有针对性地规定检测项目，切实加强对药物内在质量的控制。同时还要充分考虑使用的要求，针对不同剂型规定检测项目及确定合理的限量。一般情况，对内服药品质量要求严些，注射用药和麻醉用药更严，而外用药品要求可以稍宽些。4、完善性随着科学技术和生产水平不断发展与提高，药品的质量标准也将相应地提高，原有的质量标准不足以控制药品质量时，可以进行修订、增删某些项目、修订某些指标、改进一些检验技术。对于一些由于医疗水平和生产技术的发展而显得陈旧落后的品种，则可以删除。5、规范性 制订药品质量标准，尤其是新药的质量标准时，要按照国家食品药品监督管理局制订的基本原则，基本要求，一般格式进行。第二节 药品质量标准的主要内容及要点根据中国药典的要求，药品标准的主要内容包括：名称、性状、物理常数、鉴别、检查和含量测定等方面。一、名称在制订药品质量标准时，首先给与该药品一个法定名称。统一使用法定名称可以避免混淆，有利于文献资料的检索。我国药品的命名应该依据卫生部于1992年颁布的药品命名原则命名。二、性状 药品的性状是药品质量的重要表征之一，中国药典在性状下记载药品的外观、臭味、溶解度及物理常数等，现分别讨论如下。 (一)外观与臭味 “性状”项下记述药物的色泽和外表，是一种感官规定，由于药典对此项目没有严格的检测方法和判断标准，因此，不构成法定标准的组成部分，不作为质量的法定要求，仅用文字对正常的外观性状做一般性的描述。性状可因生产条件的不同而有差异，只要这些差异不影响质量和药效，一般是允许的。因此，在制订标准时，既要体现药品的性质和特点，又应考虑生产实际水平。在遇到有对药品的晶型，细度或溶液的颜色需做严格控制时，应在检查项下另作具体规定。另外凡药品有引湿性，风化性、遇光变质等与贮存条件有关的性质，也要择要记述并与“贮存”项相呼应。如亚硫酸氢钠甲萘醌为白色结晶性粉末，无臭或微有特臭；有引湿性；遇光易分解。 “臭”是指药品本身所固有的，如硫喷妥钠有类似蒜的臭气，但不包括因混有不应有的残留有机溶剂而带入的异臭。具有特殊味觉的药品，必须加以记述，但毒、剧、麻醉药不作“味”的描述。如盐酸哌替啶为白色结晶性粉末，无臭或几乎无臭。此处对“味”不作记述。 利用某些药物或杂质具有的特殊气味，通过判定气味的有无来判定药品的质量。(二)溶解度药品在不同溶剂中的溶解性能，可供精制或制备时参考。对在特定溶剂中的溶解性能需作质量控制时，应在该品种检查项下另作具体规定。药品的溶解度在出现异常时，应进一步研究，药品的晶型不同及所含结晶水的不同均会影响其溶解度。药典中的溶解度一项不作药品质量标准的法定指标，仅供试验时参考。 药品的溶解度从质量控制的方面，它可以在一定程度上反映出药品的纯度。药品溶解后的澄明度的大小，可以大概地说明药品的纯度。从药品的制剂和实验方面，药品的溶解度提供一个药品溶解的状况。(三)物理常数 包括熔点、比旋度、晶型、吸收系数、馏程、折光率、黏度、相对密度、酸值、碘值、羟值、皂化值等。测定结果不仅对药品具有鉴别意义，亦反映药品的纯度，是评价药品质量的主要指标之一。因而数值范围的规定必须明确，并切合实际，不要用“约”字；具体测定时要严格按照中国药典或国外药典中有关规定的方法和要求进行试验研究。三、鉴别 药物的鉴别试验是指用可靠的理化方法或生物学方法来证明已知药物的真伪，而不是对未知物进行定性分析。要求方法专属性强、重现性好、灵敏度高、简便可行、快速等，由于性状项下的物理常数也能协助鉴别真伪，所以选用的条目不要太多，能证明其真实性即可。(一)常用鉴别方法的特点1、化学法 操作简便、快速、实验成本低、应用少，但专属性比仪器分析差。2、紫外-可见分光光度法 紫外吸收光谱主要是有机药物的共轭体系产生的光谱，可作为鉴别的依据。用此法鉴别药物专属性较差。3、红外分光光度法 红外吸收光谱是分子的振动-转动光谱，分子中每个基团一般都有相应的吸收峰，且特征性强，用于鉴别组分单一、结构明确的原料药，是一种较为合适的方法，尤其适应于其他方法不易区分的同类药物，如半合成抗生素类、甾体激素类和磺胺类药物。所以红外分光光度法比紫外分光光度法的专属性强、可靠性高，应用更广。由于中国药典中采用与对照图谱进行比较的方法，如头孢曲松钠的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集124图)一致。因此，必须是已收载于药品红外光谱集(第三卷)中的品种。如在光谱集中尚未收载，起草药品标准的单位应按要求及时增补。4、色谱法 色谱法是采用对照品(或已确证的已知药品)在相同条件下进行色谱分离并进行比较，要求其保留行为和检测结果相互一致，作为鉴别药品真伪的验证，在没有其他较简易的方法进行验证时，是一个较好的方法。在鉴别试验中，薄层色谱法是色谱法中应用最广泛的一种方法，其次是纸色谱法；个别品种，由于在含量测定项下已采用了高效液相色谱法或气相色谱法，因而以其主峰的保留时间与对照品的保留时间进行比较，作为鉴别。选用色谱法进行鉴别试验时，必须要求该色谱条件能保证其与同类药品有良好的分离，即要有系统适应性试验的内容。(二)鉴别方法选择的基本原则 在药品(尤其是新药)的质量标准的制订中，可供鉴别试验的方法很多，究竟选用什么方法，选哪几种方法，这是值得研究的问题。基本原则如下：1、选用的方法要有一定的专属性、灵敏性，且便于推广。2、化学法与仪器法相结合，每种药品一般选用24种方法进行鉴别试验，相互取长补短。3、尽可能采用药典中收载的方法。4、药物制剂，通常需要把主药提取后再选用适当的方法进行鉴别。四、检查 中国药典凡例中规定：“检查项下包括有效性、均一性、纯度要求与安全性四个方面”。药品的有效性，是以动物试验为基础，最终以临床疗效来评定的。药品的均一性，主要是指制剂含量的均匀性、溶出度和释放度的均一性。安全性主要包括热原检查、毒性试验、刺激性试验、过敏性试验、升压或降压物质检查等内容。药物的纯度要求主要指对各类杂质的检查及主药的含量测定。、检查项目选择的原则： 检查项目的选择要突出重点，对危害人体健康，影响药物疗效，产生不良反应的项目，要制订出有效而灵敏的检查方法。2、影响药品有效性的检查项目： 这些项目一般有晶型、结晶细度、制剂均匀度和释放度。 对于水溶性差的药物，微粒结晶越细，越能增加药物在体内的吸收。如灰黄霉素。这就表现出结晶细度对药品有效性的影响。 对于生理活性强的小剂量制剂，通过控制药品制剂的均匀度，保证了每一单位给药剂量中，有效成分的含量一致性，这也就保证了用药的有效性和安全性。 口服药品固体制剂的疗效与药品从固体中溶出或释放有关，通过规定口服药品固体制剂的释放度，可以保证药品正常发挥疗效。3、药品安全性检查： 对于生物技术制得的抗生素、生化药品和注射剂中一些结构不清楚的杂质，由于没有适当的理化方法来进行检验，只好根据药品的药理作用或它的生理活性，采用适当的生物方法作为监控指标，以保证用药的安全。这些生物方法有：安全试验、热原检查、无菌或细菌检查、过敏试验、异常毒性及卫生学检查。五、含量测定： 测定药品中有效成分的含量是保证药品安全有效的重要手段。凡用理化方法测定药品含量，按有效物质的质量计算的称为“含量测定”，凡以生物学方法或生化方法测定生理活性物质，并按效价单位计算的称为“效价测定”。含量测定必须建立在鉴别无误、杂质检查合格的基础上，否则是没有意义的。含量测定的方法要求准确、灵敏、专属、简便。(一)药品含量测定常用分析方法及其特点1、重量法重量法是化学分析的经典分析方法之一，精密度和准确度都很好，但操作比较繁杂、专属性较差、需时间较长、样品用量较多，故目前药典较少采用。但有些药品如磺溴酞钠中硫的含量测定仍选用此法。仅在不能用容量法进行化学原料药的含量测定时，方可考虑选用。2、容量分析法中国药典中采用的容量分析方法有酸碱滴定法、非水溶液酸碱滴定法、沉淀滴定法、配位滴定法、碘量法、高锰酸钾法、亚硝酸钠滴定法、溴酸钾法、碘酸钾法及高锰酸钾法等。尽管这类方法的专属性不高，但由于其准确度较高、精密度好、仪器设备简单、试验成本低及操作简便、快速等优点，故仍广泛用于原料药的含量测定。是化学原料药含量测定的首选。缺点是专属性较差。3、紫外-可见分光光度法这类方法是药物分析中常用的方法。本法灵敏度较高、准确度也能达到一定的要求、操作简便、快速等。故主要用于原料药、单方制剂的含量测定以及含量均匀度与溶出度的检查。在定量测定上，准确度不如重量法和容量法。4、荧光分光光度法 本法用于具有荧光药物的含量测定，但不如紫外-可见分光光度法应用广泛，由于本法的专属性比紫外-可见分光光度法高，故有些药物如洋地黄毒苷片、利血平片等含量测定仍选用荧光分光光度法。5、原子吸收分光光度法 本法主要用于测定溶液中某些金属离子的浓度。本法的专属性、灵敏度均较高。如口服补液盐中总钠及钾的含量测定、乳酸钠林格注射液中氯化钾的含量测定等均用此法。6、色谱法(1)气相色谱法(GC)这种方法分离度高、灵敏度好。主要用于原料药中残留溶剂和挥发性杂质的检查。(2)高效液相色谱法(HPLC)具有高分离度、检测灵敏度高、样品用量小、易重复等优点。这个方法主要用于制剂、复方制剂，尤其对于杂质或赋形剂干扰含量测定、或需先经繁杂的分离才能测定、或各成份间相互干扰的制剂及复方制剂，测定结果更佳。(3)薄层色谱法(TLC)在含量测定方面远不如HPLC法应用广泛。主要原因是其分离能力、准确度、精密度、灵敏度均比HPLC法低。(二)选择含量测定法的基本原则含量测定法应该是准确、灵敏、专属、简便、快速、节约等，既要注意国内的实际生产水平，又要注意反映我国新技术的发展和应用，并适当地考虑国际的先进性，对具体药物进行具体的分析，然后加以确定。对于原料药的含量测定方法要着眼于方法的准确性，对于药品制剂则应特别重视方法专属性。因为原料药纯度较高，含量限度范围要求严格，如果方法本身误差较大，就会因方法误差无法评价质量上的优劣；另一方面由于原料药的质量标准中，多有物理常数和纯度检查的项目作为辅助控制手段，即使方法的专属性稍逊亦可采用。药品的制剂由于对其测定受到较多因素的影响，应考虑到贮存后可能存在的分解产物的干扰，也要考虑一些共存成分的干扰；同时由于制剂含量限度范围一般偏宽，即使方法准确度稍差，也可以符合要求。1、原料药(西药)的含量测定应首选容量分析法。滴定终点的确定，应当用适宜的电化学方法确定计量点的变色域。例如酸碱滴定可用电位滴定法来确定滴定终点。如果无合适的滴定方法可选用时，则可考虑用重量法。如果这两种方法均不合适时，可考虑用紫外-可见分光光度法。测定波长的选择应合理，并且吸光度应足够大(100或在其附近)，并用对照品法测定。其次再可考虑用色谱法或其他方法。2、制剂的含量测定应首选色谱法。在色谱法中应首先考虑采用HPLC法，而GC法、TLC法则应用较少。当辅料不干扰测定时，也可选用紫外-可见分光光度法。对复方制剂常选用HPLC法或GC法。3、对于酶类药品应首选酶分析法，抗生素药品应首选HPLC法及微生物检定法。4、放射性药品应首选放射性药品检定法。5、在上述方法均不适合时，可考虑使用计算分光光度法。如维生素A的含量测定即采用了三点校正法。使用该法时，对样品的预处理及允许使用该法的条件都作了规定。在严格控制诸项条件的情况下，方可保证测定的准确度及精密度。6、对于一类新药的研制，其含量测定应选用原理不同的两种方法进行对照性测定。(三)含量测定中分析方法的认证 对于一类新药的含量测定方法需要研究建立并评价。对于其他类别的新药，虽有资料可查，但建立起来的分析方法不可能完全和文献上的一样，仍然需要对分析方法进行评价。所以，为了获得可靠的含量测定结果，进行分析方法认证是必要的，这也是新药报批所要求的。分析方法认证通常包括对实验室、仪器内容有所要求和对分析方法验证的考察两大部分。现分别概述如下。1、对实验室等内容的要求 从事质量标准研究的实验室应符合GLP要求，所用仪器均应按法定标准校对过，所用试剂应符合有关规定，试验操作者应有良好的专业素质。如果选用色谱法，应进行“色谱系统适用性试验”。2、分析方法的验证 对药品进行含量测定时，采用不同的分析方法及分析不同类别的样品，对分析方法验证的种类及标准的要求不同。下面分别对容量分析法、紫外-可见分光光度法及色谱法的验证考察做一简要的讨论。(1)对容量分析法验证的考察精密度：用原料药的精制品考察方法的精密度，平行试验5个样本试验数据的相对标准差一般应不大于0.2；准确度：以回收率(测定值除以理论值)表示。常用原料精制品(含量99.5)或对照品进行回收率试验。回收率一般在99.7100.3之间(n=5)。(2)对紫外分光光度法验证的考察精密度：用适当浓度的精制品进行测定，其RSD不大于1(n=35)；如果UV法测定制剂的含量，则要考察辅料对测定的干扰，即将一定量药物(标示量的80120)加到按处方比例配制的辅料中，混合均匀后，称取适量，按分析方法测定其回收率。回收率一般应在98102之间；线性关系：用精制品配制一系列对照品溶液，吸光度A一般在0.20.7，浓度点n=5，用浓度A对C作线性回归处理，得一直线方程，r应达到0.999(n=5)，方程截距应近于零；灵敏度：以本法实际的最低检测浓度表示。(3)对HPLC法验证的考察精密度：要求RSD小于2；准确度：要求回收率在98102之间。精密度及准确度的做法同UV法。要考察辅料是否对回收率有影响。一般要求做高、中、低三个浓度，每一浓度平行做三份，结果统计处理；线性范围：用精制品配制一系列对照溶液，浓度点n应为57，用浓度C对峰高h或峰面积A或被测物的响应值之比进行回归处理，建立回归方程，r应大于0.999，截距应趋于零；专属性：要考察辅料、有关物质或降解产物对主药的色谱峰是否有干扰。如有干扰应设法排除；灵敏度：即检测限，以S/N=3时的最低检测浓度表示。(四)含量限度的确定 一般来说，在不影响药物的疗效及稳定性的情况下，允许一定量的杂质存在。但杂质的限度要根据药品的性质、实际生产水平及测定方法的准确度，并本着提高药品质量的原则来确定。含量限度的确定一般可根据下列三种情况来综合考虑。1、根据不同的剂型考虑 例如维生素B1，原料药的含量不得少于99.0，片剂的含量应为标示量的90.0110.0，注射液的含量应为标示量的93.0107.0。不同品种的相同剂型的药物，其含量限度也是不同的。2、根据生产的实际水平考虑 由植物中提取得到的原料药，因原料中含有多种成分，药品的纯度要由提取分离的水平而定，故含量限度也应根据生产的实际水平而定。如硫酸长春新碱因开始生产时不易提纯，故原料药规定含量为不得低于92，中国药典根据近年的实际生产水平，改为95.0105.0；其注射液用的本品订为标示量的90.0110.0；而盐酸罂粟碱因从原料中提取的方法已经成熟和稳定，故含量标准订为不得少于99.0，片剂订为标示量的93.0107.0，其注射液订为标示量的95.0105.0；基因工程药物生白能(粉针)订为标示量的85.0110.0。3、根据主药含量考虑 以片剂为例，中国药典中收载的片剂，其主药含量最小的为5ug(炔雌醇片)，最大的为0.5g(阿司匹林片)，两者相差达10万倍。由于主药含量高的片剂中所含辅料很少，主药重量和片剂重量的比值接近于1，因此主药分布均匀，并因每片平均片重较大，药典规定的片重差异较小，故含量限度的规定较严；对于含主药量低的片剂，因含有大量辅料，主药含量的比值可低至10-4，主药较难完全均匀分布，且因片剂重量小，片重差异较大，含量限度的规定应该较宽。经统计，中国药典中收载的约200种单一成分的片剂，主药含量较大的，多数含量限度订为标示量的95.0105.0；主药含量居中(含130mg)的片剂，一般订为标示量的93.0107.0；含主药量小的片剂(含5750ug)含量限度订为标示量的90.0110.0，或者80.0120.0。