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文档简介

第47课时微生物的分离和培养一、选择题1.下列物质中,不能用作酵母菌碳源的是() a.含碳有机物b.蛋白胨c.含碳无机物d.花生粉饼等天然物质2.下列关于微生物实验室培养的说法正确的是()a.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质b.同一种物质不可能既作碳源又作氮源c.除水以外的无机物只能提供无机盐d.无机氮源不可能提供能量3.微生物培养过程中,要十分重视无菌操作,现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作,防止杂菌污染,请分析下列操作中错误的是()煮沸消毒可以杀死微生物的细胞和部分芽孢接种操作要在酒精灯火焰附近进行无菌繁殖脱毒苗时,植物的外植体要进行消毒家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌培养基要进行高压蒸汽灭菌加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌a. b.c. d.4.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是()a.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌b.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯c.等培养基冷却至50 左右时进行倒平板d.待平板冷却凝固510 min后将平板倒过来放置5.(2016江苏南京六校调研测试,21,3分)下列有关微生物实验室培养的叙述,正确的是(多选)()a.在熔化琼脂时,需要控制火力并不断搅拌,以免发生焦糊b.灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等都属于无菌技术c.样品中活菌数量统计时,接种方法应采用划线法d.用平板培养基培养微生物时,应将平板倒过来放置6.用来判断选择培养基是否起到了选择作用,需要设置的对照是()a.未接种的选择培养基b.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基c.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基d.接种了的选择培养基7.(2015江苏扬州中学开学检测,20,2分)科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解石油成分“多环芳烃菲”的菌株q,步骤如下图所示,下列相关的叙述中,错误的是()a.步骤中,培养液中需加入多环芳烃菲作为唯一碳源b.步骤中,将锥形瓶放在摇床上充分振荡,使菌株与培养液充分接触c.步骤是利用平板划线法纯化菌株q,图中所示接种环最少灼烧2次d.步骤中每一区域可重复划几次,但1区和5区不能出现交叉8.下列关于微生物分离和培养的叙述,不正确的是()a.分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度b.测定土壤样品中的活菌数目,常用显微镜直接计数法c.提纯和分离严格厌氧型微生物,一般不用稀释涂布平板法d.分离固氮细菌,培养基中不加氮源9.(2015江苏盐城中学开学检测,19,2分)微生物培养是微生物工程中的基础技术。下列相关叙述正确的是()a.培养基中并不都必须添加碳源或氮源b.平板划线法常用于微生物的分离与计数c.病毒和细菌的培养基成分基本相同d.配制牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后还需调ph10.(2015江苏如皋期中测试,19,2分)某课题小组欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量,并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作正确的是()a.用牛肉膏蛋白胨培养基进行培养b.利用平板划线法对细菌进行计数c.采用稀释涂布平板法分离菌种d.接种后须放在光照培养箱中培养11.(2015江苏南京第三次调研)下图表示培养和纯化x细菌的部分操作步骤,下列有关叙述正确的是()a.步骤操作时,倒好平板后应立即将其倒置,防止水蒸气落在培养基上造成污染b.步骤接种环和试管口应先在火焰上灼烧,接种环冷却后再放入试管中蘸取菌液c.步骤沿多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后可根据出现的单个菌落计数d.步骤是将培养皿放在恒温培养箱中培养,一段时间后所得到的都是x细菌的菌落12.mrsa菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”,对青霉素等多种抗生素有抗性。为研究人母乳中新发现的蛋白质h与青霉素组合使用对mrsa菌生长的影响,某兴趣小组的实验设计及结果如下表。下列说法正确的是()组别培养基中的添加物mrsa菌1100 g/ml蛋白质h生长正常220 g/ml青霉素生长正常32 g/ml青霉素+100 g/ml蛋白质h死亡a.细菌死亡与否是通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定的b.第2组和第3组对比表明,使用低浓度的青霉素即可杀死mrsa菌c.实验还需设计用2 g/ml青霉素做处理的对照组d.蛋白质h有很强的杀菌作用,是一种新型抗生素二、非选择题13.从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是:采集菌样富集培养纯种分离性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。如培养噬盐菌的菌样应从环境中采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其群落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基,并在条件下培养。(3)接种前要对培养基进行处理。在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在条件下进行。(4)如图是微生物纯化培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请分析接种的具体方法。获得图a效果的接种方法是,图b效果的接种方法是。某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是。应当怎样操作才可避免此种现象?。(5)如果探究温度对纤维素酶活性的影响,自变量是,应该保持等不变(至少答两项)。14.炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。(1)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。(2)细菌鉴定:实验流程如图所示对配制的液体培养基等需采取方法灭菌;实验所用液体培养基的碳源为(填“无机碳”或“有机碳”)。挑选可疑菌落制片后,用观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。接种可疑菌后,35 培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是。对照组试管中应加入,与实验组同时培养6小时后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体,与产生抗体相关的细胞除t细胞、b细胞外,还有。答案全解全析一、选择题1.c酵母菌是异养型微生物,不能直接利用无机碳。2.a培养基的基本成分有水、无机盐、碳源、氮源和生长因子等,是为微生物的生长繁殖提供营养的基质,a项正确;一般来说,含c、h、o、n的化合物既是碳源,又是氮源,如牛肉膏,b项错误;一些无机物如co2、n2,也可以作为某些微生物的碳源、氮源,c项错误;自然界中的一些微生物,如硝化细菌,可以通过氧化外界环境中的nh3等无机氮源获得生长所需的能量,进行化能合成作用,d项错误。3.d100 煮沸56 min可以杀死微生物的细胞和一部分芽孢,正确;酒精灯火焰附近存在一个无菌区,为了无菌操作,接种操作要在酒精灯火焰附近进行,正确;无菌繁殖脱毒苗时,植物的外植体要进行消毒,正确;家庭制作葡萄酒时,是利用附着于葡萄皮表面的野生酵母菌进行酒精发酵,所以制作葡萄酒时不需要将容器和葡萄进行灭菌,以免杀死酵母菌,错误;微生物培养过程中,培养基要进行高压蒸汽灭菌,正确;指示剂和染料中可能混有微生物,故加入培养基前需灭菌,错误。4.a制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,a错误;将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯,加入少量的水,加热,b正确;高压蒸汽灭菌后,等培养基冷却至50 左右时,在酒精灯火焰附近进行倒平板,c正确;待平板冷却凝固510 min后将平板倒过来放置,使皿盖在下、皿底在上,d正确。5.abd琼脂属于多糖,在熔化琼脂时,需要控制火力并不断搅拌,以免发生焦糊,a正确;灭菌和消毒都属于无菌技术,灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌和紫外线照射等都属于无菌技术,b正确;样品中活菌数量统计时,接种方法应采用稀释涂布平板法,c错误;用平板培养基培养微生物时,为防止水蒸气凝集滴入培养基造成干扰或污染,应将平板倒过来放置培养,d正确。6.c将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上生长的菌落数目,因此,用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照遵循的原则是单一变量原则,所以与选择培养基一样,应进行接种培养。7.c要想分离出能降解石油成分“多环芳烃菲”的菌株q,所用培养液中需加入多环芳烃菲作为唯一碳源,故a正确;培养过程中,将锥形瓶充分振荡,目的是使菌株与培养液充分接触,故b正确;接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌,所以完成步骤中5次划线操作前都要灼烧灭菌,接种结束后还需灼烧灭菌1次,防止造成污染,由此可见,完成步骤共需灼烧接种环6次,故c错误;纯化菌株q过程中,由于线条末端细菌的数目比线条起始处要少, 所以在做第二次以及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,1区和5区不能交叉,故d正确。8.b分离土壤中不同的微生物,由于其种类和数量不同,要采用不同的稀释度,a正确;测定土壤样品中的活菌数目,常用稀释涂布平板法进行计数,b错误;提纯和分离严格厌氧型微生物,一般不用稀释涂布平板法,c正确;分离固氮细菌,培养基中不加氮源,d正确。9.a自养型微生物不需要添加碳源,固氮菌不需要添加氮源,故a正确;平板划线法常用于微生物的分离,计数常用稀释涂布平板法,故b错误;病毒不能在一般的培养基上繁殖,必须在活细胞内才能生存,故c错误;配制牛肉膏蛋白胨培养基要先调ph后灭菌,故d错误。10.c牛肉膏蛋白胨培养基为天然培养基,成分不明确,欲筛选出能分解石油的细菌,应用以石油为唯一碳源的培养基进行筛选,故a错误;平板划线法能对细菌进行分离纯化,但不能对细菌进行计数,故b错误;稀释涂布平板法既可以分离菌种,还可对菌种进行计数,故c正确;接种后须放在恒温培养箱中培养,光照不是其必要条件,故d错误。11.b步骤操作时,倒好平板后应待其冷却凝固后,将其倒置,防止水蒸气落在培养基上造成污染,a错误;步骤接种环和试管口应先在火焰上灼烧,接种环冷却后再放入试管中蘸取菌液,b正确;步骤沿多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后可出现单个菌落,但不能用于计数,c错误;步骤是将培养皿放在恒温培养箱中培养,一段时间后所得到的不一定都是x细菌的菌落,d错误。12.c细菌属于原核生物,无细胞核,a错误;第2组与第3组对比,由于存在青霉素浓度和蛋白质h两个实验变量,所以无法确定低浓度的青霉素是否可杀死mrsa菌,b错误;要想证明低浓度的青霉素对mrsa菌的影响,还需设计一组用 2 g/ml 青霉素做处理的对照组,c正确;由组1可知蛋白质h无杀菌作用,d错误。二、非选择题13.答案(1)海滩等高盐(2)以淀粉为唯一碳源高温(3)高压蒸汽灭菌无菌(4)稀释涂布平板法平板划线法菌液浓度过高增大稀释倍数(或培养过程被杂菌污染严格无菌操作;或用接种环划下一区域前没有灭菌每划一个新区域前都要对接种环进行灭菌处理)(原因与操作要对应)(5)温度纤维素的量与浓度、反应时间、ph解析(1)培养噬盐菌的菌样应从高盐环境中采集。(2)富集培养时培养基及培养条件应能促进目的菌的生长、繁殖。(3)微生物的分离及培养中必须保证无菌,包括培养基的灭菌和操作过程的无菌等。(4)纯化培养中接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法,前一种方法形成的菌落分布较均匀,后一种方法形成的菌落分布不均匀,先划线的部分菌落密集甚至相连,后划线的部分菌落分布稀疏。(5)探究温度对酶活性的影响时,温度为自变量,酶活性为因变量,其他变量如底物和酶的用量、ph、反应时间等均为无关变量。14.答案(2)高压蒸汽(98 kpa蒸汽)有机碳显微镜细菌大量繁殖等量生理盐水低吞噬细胞、浆细胞解析(2)微生物的液体培养

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