子宫内膜癌中CD105的表达及意义.doc

子宫内膜癌中CD105的表达及意义作者：张英辉,陈素琴,高立亚单位：河北省石家庄市第四医院妇科(张英辉)；河北医科大学第二医院妇产科(陈素琴)；北京市垂杨柳医院妇产科(高立亚)【摘要】 目的 通过与CD34比较，研究CD105与子宫内膜癌发生、发展及预后的关系。方法 采用免疫组化法检测子宫内膜癌25例(子宫内膜癌组)、非典型增生13例(非典型增生组)、正常内膜8例(对照组)中CD105、CD34、VEGF、ki67的表达，CD105MVD与临床参数进行分析。结果 子宫内膜癌组和非典型增生组的表达显著高于对照组(P0.05)，非典型增生组与子宫内膜癌组间差异无统计学意义(P0.05)；CD105MVD与FIGO手术病理分期、浸润肌层深度及局部淋巴结转移呈显著正相关(P0.01)。结论 CD105优于CD34，可用来预测非典型增生的恶变倾向，反映子宫内膜癌增殖生长状态，并可提供更多的预后信息。 【关键词】 CD105 微血管密度 子宫内膜癌 CD34 VEGF ki67The expression and significance of CD105 in endometrial carcinoma ZHANG Yinghui, CHEN Suqin, GAO Liya.Department of Obstetrics and Gynecology, The Fourth Hospital of Shijiazhuang, Shijiazhuang 050011, China【Abstract】 Objective To investigate the relationship between CD105 and the pathogenesis, development and prognosis of endometrial tumor, as compared with CD34.Methods The expression of CD105, CD34, VEGF and ki67 was detected by immunohistochemistry in 25 cases of endometrial carcinoma(EC), 13 cases of atypical hyperplasia (AH) and 8 cases of normal endometria. The relationship between MVDCD105 and clinical parameters was analyzed.Results CD105MVD of the EC group and AH group was significantly higher than that of control group(P0.05),however, there was no significant difference between EC group and AH group(P0.05). CD105MVD was closely correlated with the FIGO stage, depth of infiltrating muscular layer and regional nodal metastasis(P0.05).Conclusion CD105 is superior to CD34 in predicting the cancerous tendency of AH, reflecting the proliferating status of endometrial cancer and providing more prognostic information.【Key words】 CD105; microvessel density; endometrial cancer; CD34; VEGF; ki67新生的血管为肿瘤组织增殖提供了营养及氧分。CD105是表达于新生血管内皮的一种特异性糖蛋白。主要标记具有增殖活性的内皮细胞，其他一些肿瘤的研究中已证明CD105标记的微血管密度(MVD)，优于其他标记物，更能反映肿瘤的增殖状态和预后1。因此本研究通过与全内皮细胞标记物CD34比较，同时检测重要的促血管生长因子血管内皮生长因子(VEGF)及反映肿瘤增殖状态的ki67的表达，研究CD105与子宫内膜癌发生、发展及预后的关系，为目前以CD105为靶点的靶向治疗提供理论基础。1 资料与方法1.1 一般资料 收集河北医科大学第二医院妇产科2005年1月至2007年8月收治的子宫内膜癌患者手术切除标本25例(子宫内膜癌组)，年龄4477岁，平均年龄59岁；子宫内膜非典型增生标本13例(非典型增生组)，取自同期行手术切除子宫的患者，年龄3962岁，平均年龄49岁；正常子宫内膜8例(对照组)，取自因子宫肌瘤行手术切除的患者，年龄3556岁，平均年龄41岁。全部病例经病理诊断证实。对照组均为增生期内膜。子宫内膜癌组均为内膜样腺癌，按FIGO临床分期标准及病理分级标准：期6例，10例，期9例；高分化癌(G1)15例，中分化癌(G2)4例，低分化癌(G3)6例。浸润肌层深度：1/2肌层11例，≥1/2肌层14例。局部淋巴结转移12例，无淋巴结转移13例。1.2 试剂与方法 鼠抗人CD105单克隆抗体购自美国ADI公司，鼠抗人CD34、VEGF、ki67单克隆抗体及SP免疫组化试剂盒购自北京中山生物技术公司。标本经中性甲醛固定，梯度乙醇脱水，石蜡包埋，切片厚4 μm，SP免疫组化具体步骤按说明书操作，采用煮沸法修复抗原，DAB显色，用已知阳性片作阳性对照，用磷酸缓冲液代替一抗作为阴性对照。1.3 结果判定1.3.1 CD105、CD34MVD判定方法：按照Weidner2报道的方法，先用100倍光镜扫视整个切片，选出3个MVD最高区(热区)，然后在400倍光镜下记数热区中被染成棕黄色的血管数目，凡单个孤立的或多个紧密排列的内皮细胞团，只要与周围组织分界清楚，无论有无管腔，即可记数为1个微血管数，取3个视野的微血管数平均值，作为该标本的MVD值。1.3.2 VEGF的判定方法：胞浆或胞膜呈黄色或棕黄色颗粒状的为VEGF阳性细胞，综合染色强度和染色细胞的百分数评估VEGF的表达。按染色强弱分：0分：阴性；1分：弱，淡黄色；2分：中等，黄色；3分：强，棕黄色。按着色细胞占视野的百分数分：0分：无阳性细胞；1分：阳性细胞25%；2分：阳性细胞26%50%；3分：阳性细胞50%。将数值相加判定结果，02分为(-)；34分为(+)；56分为(+)。1.3.3 ki67的判定方法：以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性细胞，随机选10个高倍视野，每个视野记数100个细胞，记录阳性细胞数，取其平均值记作该标本的增殖指数(PI)。1.4 统计学分析 应用SPSS 11.5统计软件，计量资料以±s表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，P0.05为差异有统计学意义。2 结果2.1 3组CD105和CD34表达比较 CD105主要表达于肿瘤边缘组织的小血管，大血管着色不明显；而CD34在肿瘤组织小血管及大血管上均有很强的表达。子宫内膜癌组和非典型增生组的表达明显高于对照组(P0.01)，非典型增生组与子宫内膜癌组比较差异无统计学意义(P0.05)；CD34标记的MVD明显多于CD105所标记的MVD，非典型增生组显著高于对照组(P0.01)，子宫内膜癌组显著高于对照组(P0.01)和非典型增生组(P0.05)。相关分析表明，CD34MVD与CD105MVD间呈显著正相关(r=0.495，P=0.001)。见表1。表1 3组CD105和CD34表达比较（略）注：与对照组比较，*P0.01；与非典型增生组比较，P0.05表2 CD105MVD与子宫内膜癌临床病理参数的关系（略）2.2 CD105MVD与子宫内膜癌临床病理参数的关系 CD105MVD与绝经与否、FIGO病理分级无关(P0.05)，与FIGO手术病理分期、浸润肌层深度及局部淋巴结浸润显著相关(P0.05)。而CD34MVD值只与FIGO手术病理分期显著相关(P=0.004)，与其他病理参数无关。见表2。2.3 CD105MVD与ki67表达的关系 PI值在子宫内膜癌组、非典型增生组、对照组分别为32±8、26±9、8±10；CD105MVD值与ki67增殖指数呈显著正相关性(r=0.641，P0.001)。2.4 CD105MVD与VEGF表达的关系 VEGF主要表达于腺上皮细胞及间质血管，在子宫内膜癌组、非典型增生组、对照组阳性表达率分别为80%(20/25)、30%(3/10)、25%(2/8)。在子宫内膜癌组中，VEGF与各临床病理参数无显著相关性。相关分析表明，CD105MVD值与VEGF间呈显著正相关(r=0.389，P=0.01)。3 讨论3.1 CD105与子宫内膜癌的发生 子宫内膜从癌前病变发展至子宫内膜癌要经过很长时间，因此对癌前病变特征的认识及早期诊断，有助于阻止病情的进一步恶化3。一系列研究表明，癌前病变可以诱发血管生成。Akagi等4研究发现，在结直肠腺瘤由轻度到重度不典型增生至腺癌的发展过程中，CD105标记的MVD值逐渐升高，提示CD105有助于早期诊断疾病，及时治疗。Minhajat等5通过与其它8个血管内皮细胞标记物对比研究结肠癌的发生，发现只有CD105表达于新生血管。我们的研究结果表明，CD105MVD值在子宫内膜癌组和非典型增生组明显高于对照组(P0.01)，而内膜癌组和非典型增生组的CD105MVD值很接近，并且与CD34MVD比较，主要表达于肿瘤边缘组织的小血管，大血管着色不明显；这提示血管生成活跃在癌前病变就存在，这个结果支持癌前病变和子宫内膜癌都具有很强的血管生成能力。Ziche等6认为正常细胞在获得血管生成能力后，恶变危险性明显增加。进一步说明了子宫内膜癌的发生过程对血管生成的依赖关系，这提示利用微血管密度可预测良性组织的恶变倾向以及提示临床上对癌前病变治疗的重要性。3.2 CD105与子宫内膜癌组织的增殖 CD105是血管内皮细胞增殖的标志，ki67作为反映细胞增殖活性的一个指标，由于其半衰期短，细胞脱离增殖周期后迅速下降，其检测结果优于其他增殖指标，能较可靠地反映细胞的增殖状态7。在多种肿瘤及癌前病变中，均有ki67的异常表达，与肿瘤的种植、浸润及转移潜能等密切相关。本研究结果显示，子宫内膜腺癌组的ki67指数，显著高于非典型增生组及对照组，非典型增生组又显著高于对照组，表明细胞增殖活性在不典型增生阶段就已发生改变，这也与CD105的变化相一致。Miller等8通过免疫组化双标技术进一步证实CD105主要表达于肿瘤组织边缘的内皮细胞，与增殖指标ki67的表达部位相一致。表明新生血管的数量影响着肿瘤细胞的增殖状态，本研究进一步证实了上述观点，本研究结果表明，CD105标记的新生血管数量与子宫内膜癌ki67的增殖指数存在着明显的正相关性，CD105MVD反映了子宫内膜癌细胞的增殖活性。3.3 CD105与子宫内膜癌的临床病理参数 肿瘤的临床分期、组织学分级、浸润肌层深度及是否存在局部淋巴结转移等临床病理因素明显的与转移、生存有关。在其他一些肿瘤的研究中已证实，CD105与患者的生存期相关，可作为独立的预后指标9，10。我们的研究结果表明CD105MVD与绝经与否、FIGO病理分级无关，与FIGO临床分期、浸润肌层深度及局部淋巴结转移有关。临床分期越高，浸润肌层越深，CD105MVD值越大，有局部淋巴结转移的CD105MVD值高于无局部淋巴结转移的，这表明CD105是肿瘤生物学行为重要的影响因素，推测与患者的预后有关。这与Salvesen等11的研究结论基本一致，认为CD105是低生存率更有效的预测因子。本研究结果表明，CD105表达于小的血管，CD34在大小血管均有表达。CD34标记的微血管数量明显多于CD105，它在正常子宫内膜、非典型增生、子宫内膜癌的表达也呈逐渐上升趋势，且3组间CD34MVD值比较差异有统计学意义，表明CD34在子宫内膜癌癌变过程中具有同样重要意义。另外本研究结果显示，CD34标记的MVD值只与手术病理分期有关，与其他病理指标无显著相关，而CD105MVD与分期、肌层浸润深度及局部淋巴结转移均有关，这说明在子宫内膜癌中新生血管标志物CD105优于总内皮细胞标志CD34，更能反映患者的预后。3.4 CD105与VEGF VEGF是很强的促血管生长因子，CD105MVD应是VEGF活性的量化体现，许多学者研究了VEGF与临床病理参数的关系，但把VEGF作为一个预后指标的看法不一致。本研究结果表明，VEGF在子宫内膜癌组的表达显著高于其他2组，而在肿瘤组织中VEGF与临床病理参数间无关，即可能与预后无关。推测缺乏关联可能是因为VEGF在肿瘤开始生长的初期需要，但当肿瘤增大到一个临界大小时，VEGF在维持肿瘤生长中变得不那么重要。本研究显示CD105MVD与VEGF具有相关性，表明VEGF确有促进新生血管形成的作用。 综上所述，CD105参与了子宫内膜癌的发生、发展并可能与预后有关。目前，抑制肿瘤血管生成的靶向治疗已成为人们研究的热点，提示CD105今后可能在子宫内膜癌的治疗方面发挥重要作用12。【参考文献】 1 Dales JP,Garcia S,Andrac L,et al.Prognostic significance of angiogenesis evaluated by CD105 expression compared to CD31 in 905 breast carcinomas: correlation with longterm patient outcome.Int J Oncol,2004,24:11971204.2 Weidner N.Current pathologic methods for measuring intratumoral microvessel density within breast carcinoma and other solid tumor.Breast Cancer Res Treat,1995,36:168180.3 于海中.年轻妇女子宫内膜的诊治体会.河北医药，2008，30：179180.4 Akagi K,Ikeda Y,Sumiyoshi Y,et al.Estimation of angiogenesis with antiCD105 immunostaining in the process of colorectal cancer development. 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