兽医内科学教学实习指导.doc

家畜内科学实习指导书胡志华 编写动物科学与技术学院实验一 山羊前胃弛缓的诱发与治疗 前胃弛缓俗称“宿草不转”，是由各种病因导致前胃神经兴奋性降低，肌肉收缩力减弱，瘤胃内容物运转缓慢，微生物区系失调，产生大量发酵和腐败的物质，引起消化障碍，食欲、反刍减退，乃全身机能紊乱的一种疾病。此病是反刍兽常发病之一，尤其老龄和使役过重的反刍动物最易发生。 【实验内容】 观察前胃弛缓患畜的主要症状，分析病因，进行实验室检查，确定初步诊断，同时进行治疗实验。 【实验目的要求】 通过对病畜的临床检查，作出初步诊断，同时进行治疗。了解前胃弛缓的发病原因，掌握其主要症状，诊断及防治措施，掌握前胃弛缓辨证诊断方法要点，同时掌握家畜瘤胃实验室检查的要点、冲洗瘤胃方法及注意事项。 【实验动物】 山羊 【实验器材与药品】 体温计，听诊器，PH试纸，导管，套管针，阿托品，新斯的明【实验步骤】 1. 人工复制病例 在实验的前 2 天给羊连续注射阿托品。 2. 观察症状 首先进行一般临床检查，测定体温、呼吸数；听诊呼吸音、肠音、胃蠕动音、心音及心率；观察动物的精神状态，饮食欲，营养状况，粪便及尿液的状况。 3. 实验室检查1）瘤胃液pH 值的测定： 瘤胃液pH下降至 5.5 以下（正常的变动范围为 67）。 2）瘤胃内的纤毛虫数量及活力的测定：纤毛虫活力降低，数量减少至7.0万/ml左右（正常黄牛为13.9114.6万/ml、水牛为22.3万78.5万/ml）。3）葡萄糖发酵实验：葡萄糖发酵实验，糖发酵能力降低，60min时，产气低于 1ml甚至产生的气体仅有0.5ml（正常牛、羊，60min 时，产气 12ml）。 4）瘤胃沉淀物活性实验：瘤胃沉淀物活性实验，其中微粒物质漂浮的时间延长（正常为39min） 4. 诊断 前胃弛缓的主要临床症状为食欲减少，前胃蠕动减弱或停止，反刍和嗳气缺乏，病初便秘而后腹泻，排棕黑色粘稠粪便或水样粪便，并有恶臭气味。病畜精神沉郁，全身无力，走路摇摆。同时结合实验室检查即可确诊。5. 治疗 治疗原则:除去病因，加强护理，增强前胃机能，改善瘤胃内环境，恢复正常微生物区系，防止脱水和自体中毒。对本病的治疗，应在弄清病因（特别是原发和继发）的基础上，以调整瘤胃液pH值为主，并兼以综合疗法。当pH值呈酸性时，应在基础处方的基础上加碱性药物碳酸氢钠，以增加体内碱储，中和酸性胃液，防止酸中毒；当pH值呈碱性时，应加醋酸或食醋，以调整酸碱平衡，防止碱中毒。所以，确定本病的治疗方案，应注意检查瘤胃液pH值。【注意事项】 注意人畜安全，在进行投入胃管时应该注意避免动物骚动不安，避免将胃管投入气管。进行瘤胃穿刺时，注意消毒避免感染。在进行治疗性给药时，注意动作轻柔，避免对动物的过度刺激。附注：胃管插入食道时的判断 胃管投药时，必须正确判断是否插入食道，否则，可将药误灌入气管和肺内，引起误咽性肺炎，甚至造成死亡。表一 胃管插入食道或气管的鉴别要点鉴别方法插入食道内插入气管内 手感和观察反应 胃管前端到咽部时稍有抵抗感，易引起吞咽动作，随吞咽胃管进入食道，推送胃管稍有阻力感，发滞 无吞咽动作，无阻力，有时引起咳嗽，插入胃管不受阻 观察食道变化 胃管端在食道沟呈明显的波浪式蠕动下移 无 向胃管内充气反应 随气流进入，颈沟部可见有明显波动。同时压挤橡胶球将气排空后，不再鼓起。进气停止而有一种回声 无波动，压橡胶球后立即鼓起。无回声 将胃管另端放耳边听诊 听不到规则的“咕噜”声或水泡音，无气流冲击耳边 随呼吸动作听到有节奏的呼出气流音，冲击耳边 将胃管另端侵入水盆内 水内无气泡 随呼吸动作水内出现气泡 触摸颈沟部 手摸颈沟区感到有一坚硬的索状物 无 鼻嗅胃管另端气味 有胃内酸臭味 无 【注意】 1. 插入或抽动胃管时要小心、缓慢，不要粗暴。2. 当病畜呼吸极度困难或有鼻炎、咽炎、喉炎、高温时，忌用胃管给药。3. 牛插入胃管后，遇有气体排出，应鉴别是来自胃内或是呼吸道。来自胃内气体有酸臭味，气味的发出与呼吸动作不一致。4. 牛经鼻给药，胃管进入咽部或上部食道时，有时发生呕吐，此时应放低牛头，以防呕吐物误咽入气管，如呕吐物很多，则应抽出胃管，待吐完后再投。牛的食道较马短而宽，故胃管通过食道的阻力甚小。5. 当证实胃管插入食道深部后进行灌药。如灌药后引起咳嗽，气喘，应立即停灌。如灌药中因动物骚动使胃管移动脱出时，亦应停止灌药，待重新插入判断无误后再继续灌药。6. 经鼻插入胃管，常因操作粗暴或反复投送、强烈抽动或管壁干燥等，刺激鼻咽粘膜肿胀发炎，有时血管破裂引起鼻出血。 在少量出血时，可将动物头部适当高抬或吊起，冷敷额部，并不断淋浇冷水。如出血过多冷敷无效时，可用 1 鞣酸棉球塞于鼻腔中，或皮下注射 0.1 盐酸肾上腺素 5ml，或 1 盐酸阿托品 1 2m1 。必要时可注射止血药。 【药物误投入肺的表现及其抢救措施】 药物误投入呼吸道后，动物立即表现不安，频繁咳嗽，呼吸急促，鼻翼开张或张口呼吸；继则可见肌肉震颤，出汗，粘膜发绀，心跳加快，心音增强，音界扩大，数小时后体温升高，肺部出现明显广范围的啰音，并进一步呈现异物性肺炎的症状。 如灌入大量药液时，可造成动物的窒息或迅速死亡。 抢救措施：在灌药过程中，应密切注意病畜表现，一旦发现异常，应立即停止并使动物低头，促进咳嗽，呛出药物，其次应用强心剂或给以少量阿托品兴奋呼吸系统，同时应大量注射抗生素制剂，直至恢复。严重者，可按异物性肺炎的疗法进行抢救。实验二 瘤胃酸中毒的诊断与治疗 瘤胃酸中毒是因采食大量的谷类或其他富含碳水化合物的饲料后，导致瘤胃内产生大量乳酸而引起的一种急性代谢性酸中毒。其特征为消化障碍、瘤胃运动停滞、脱水、酸血症、运动失调、衰弱，常导致死亡。本病又称乳酸中毒，反刍动物过食谷物、谷物性积食、乳酸性消化不良、中毒性消化不良、中毒性积食等。多发生于产乳高峰期的青年奶牛及产犊前后（尤其是产犊后半月以内）的奶牛。 【实验内容】 分析瘤胃酸中毒发生的病因，观察患畜的主要症状，进行鉴别诊断，同时进行治疗实验。 【实验目的要求】 通过对病畜的临床检查，作出初步诊断，同时确定治疗原则并进行治疗。了解瘤胃酸中毒发病原因，掌握其主要症状，诊断及防治措施，同时掌握家畜瘤胃检查及实验室检查的要点。 【实验动物】 牛或羊 【实验器材与药品】 体温计，听诊器， pH 试纸，显微镜，血沉管， 5 碳酸氢钠，复方氯化钠，生理盐水， 10 安钠咖， 0.5% 强尔心 20ml 等。【实验步骤】 1. 人工复制病例 动物医院临床病例。 2. 观察症状 首先进行一般临床检查，测定体温、呼吸数、听诊呼吸音，肠音，胃蠕动音，心音及心率；观察动物的精神状态，饮食欲，营养状况，粪便及尿液的状况。 3. 实验室检查 1）瘤胃液 pH 值的测定及瘤胃内的纤毛虫数量及活力的测定：瘤胃 pH 5 6，纤毛虫明显减少或消失，有大量的革兰氏阳性细菌。2）血液中 pH 值的测定：血液 pH 降至 6.9 以下。3）红细胞压积的测定： 红细胞压积容量上升至 50 60 %。4）血液中 CO 2 结合力的测定： 血液 CO 2 结合力显著降低。5）血液中乳酸含量的测定。6）血液中无机磷酸盐含量的测定：血液乳酸和无机磷酸盐升高。7）尿液 pH 值的测定：尿液 pH 降至 5 左右。 4. 诊断 本病根据病畜表现脱水，瘤胃胀满，卧地不起，具有蹄叶炎和神经症状，结合过食豆类、谷类或含丰富碳水化合物饲料的病史，以及实验室检查的结果瘤胃液 pH 下降至 4.5 5.0，血液 pH 降至 6.9 以下，血液乳酸升高等，进行综合分析与论证，可做出诊断。但必须注意，病程一旦超过 24h ，由于唾液的缓冲作用和血浆的稀释，瘤胃内 pH 通常可回升至 6.5 7.0 ，但是其他实验室检验：酸 / 碱和电解质水平仍显示代谢性酸中毒。此外，在兽医临床上，应注意与瘤胃积食、皱胃阻塞、皱胃变位、急性弥漫性腹膜炎、生产瘫痪、牛原发性酮血症、脑炎和霉玉米中毒等疾病进行鉴别，以免误诊。 5. 治疗 瘤胃酸中毒的治疗原则是制止瘤胃继续产酸；纠正血液酸度，扩充血管容量，促进前胃蠕动，增强消化能力。 【注意事项】 注意人畜安全，在进行投入胃管时应该注意避免动物骚动不安，避免将胃管投入气管，直肠检查是切勿用力过猛，损伤肠道。在进行治疗性给药时，注意动作轻柔，避免对动物的过度刺激实验三 亚硝酸盐中毒与解救 亚硝酸盐中毒是畜禽由于采食富含硝酸盐或亚硝酸盐的饲料，使血红蛋白变性，失去携氧功能，导致组织缺氧的一种急性、亚急性中毒。临床上以黏膜发绀、血液褐变、呼吸困难、胃肠道炎症为特征。本病常为急性经过，多发于猪，禽，其次是牛、羊，马和其他动物很少发生。【实验内容】观察家兔亚硝酸盐中毒的主要症状，同时进行治疗实验。【实验目的要求】通过对家兔亚硝酸盐中毒的临床观察和治疗，掌握亚硝酸盐中毒的发病原因，掌握其主要症状，诊断及救治措施。【实验对象】家兔【实验药品与器材】亚硝酸钠、1%亚甲蓝、针头、注射器【实验步骤】1.取兔一只，称重，记录呼吸、体温，观察精神状态，眼结膜及耳血管的颜色。2.临床观察按每千克体重0.3g（配成10%溶液）给兔口服亚硝酸钠，记录时间并观察动物的呼吸、眼结膜及耳血管颜色的变化。当开始出现发绀现象时，检查体温。3.救治出现典型亚硝酸盐中毒症状后，即用1%亚甲蓝按每千克体重0.2ml静脉注射，观察并记录解救效果【讨论】1.亚硝酸盐中毒的原因？亚硝酸盐中毒的临床症状？2.亚甲蓝解救亚硝酸盐中毒的机理？实验四 家兔有机磷中毒与解救【目的与原理】掌握家兔有机磷酸酯类的中毒症状及阿托品和解磷定的解救作用;掌握胆碱酯酶活力的测定方法;了解胆碱酯酶活力测定时的基本反应过程。有机磷酸酯类通过抑制胆碱酯酶活性，使乙酰胆碱在体内堆积，产生中毒症状。抗胆碱药阿托品能解除有机磷酸酯类中毒的M样症状，而解磷定可复活胆碱酯酶，恢复其水解乙酰胆碱的能力，以对骨骼肌震颤的效果产生最快，两药合用可提高解毒效果。【实验对象】家兔，2.53.0 kg【实验药品】0.1%硫酸阿托品（atropine sulfate）、5%敌百虫(dipterex)、1%肝素(heparin)、2.5%解磷定（pyraloxime methoiodode, PAM）。【实验器材】注射器（5 ml、10 ml、20 ml）、测瞳孔尺、刀片、采血杯、动脉夹、棉球。恒温水浴、分光光度计、试管架、试管、吸管（0.2 ml、1 ml、2 ml、5 ml）、加样器、滤纸、漏斗。一、中毒症状的观察【实验方法】1.取家兔2只，称重，观察并记录活动情况、呼吸（频率，有无呼吸困难，呼吸道有无分泌等）、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌张力及有无震颤等。2.为采血方便，向家兔耳缘静脉注射1% 肝素0.5 ml/kg。3.用酒精棉球擦拭兔耳外缘静脉或沿静脉走行拔毛，使其充血明显，用刀横向切开中段耳缘静脉，使血液(0.51 ml)自然流入采血杯中，并轻轻振荡采血杯，防止凝血。依上述方法取甲乙两兔耳静脉血各一份，供测正常胆碱酯酶活性用。4.分别给甲乙两兔耳缘静脉注射5%敌百虫1.5 ml/kg。按前述指标观察并记录中毒症状，待中毒症状明显时，依上法再次采血供测中毒后胆碱酯酶活性用，然后，甲兔立即静脉注射硫酸阿托品1 ml/kg，乙兔立即静脉注射解磷定4 ml/kg，观察并记录甲乙两兔的中毒症状有何变化，在症状改善明显时采血，供测解救后胆碱酯酶活性用。【实验结果】根据本实验的观察项目，列表记录甲乙两只家兔中毒前后和用不同药物解救后的症状及血液胆碱酯酶活性的改变。二、胆碱酯酶活性的测定方法(Hestrin法)【实验原理】乙酰胆碱在血液中被胆碱酯酶水解，产生醋酸和胆碱。在一定条件下，水解乙酰胆碱的量与胆碱酯酶的活性成正比，故在反应体系中，加入过量的乙酰胆碱使之参加反应，通过测定剩余的乙酰胆碱量即可计算出被水解的量，从而推出胆碱酯酶的活性。乙酰胆碱呈色反应：乙酰胆碱可与羟胺作用生成乙酰羟肟酸，后者在酸性条件下与三价铁离子形成褐色的羟肟酸铁络合物，其颜色的深浅可反映乙酰胆碱含量的多少，反应过程如下：1. 盐酸羟胺与氢氧化钠作用释放出游离羟胺NH2HCl+NaOH NH2OH+NaCl+H2O2. 剩余乙酰胆碱与游离羟胺作用，生成羟肟酸化合物。(CH3)3N(CH2)2OCOCH3+NHOH CH3CONHOH+(CH2)3N(CH2)2OH3. 羟肟酸化合物在酸性环境中与三氯化铁生成褐色的复合物（羟肟酸铁络合物）。pH:11.5，FeCl3+CH3CONHOH CH3CONHO+HCl【实验试剂】710-3mol/L氯化乙酰胆碱（acetylcholine chloride, Ach）：取适量Ach，用蒸馏水配成2.54% 溶液，冰箱保存，用以前蒸馏水20倍稀释成710-3mol/L溶液。1 mol/L盐酸羟胺（NH2HCl）：取25 g盐酸羟胺，加蒸馏水359 ml配成1 mol/L溶液备用，冰箱保存。3.5 N NaOH.4 N HCl.3.710-1 mol/L FeCl36H2O：取10 g FeCl36H2O，加蒸馏水20 ml左右，浓HCl 0.34 ml，加温溶解，最后加蒸馏水到100 ml制成3.710-2 mol/L FeCl3 0.1 N HCl溶液。pH7.2的磷酸盐缓冲液：取Na2HPO412 H2O 16.72 g和K2PO42.72 g，加蒸馏水到100 ml，冰箱保存。【方法与步骤】1.取中试管加磷酸缓冲液0.85 ml，血样0.15 ml，置于371的水浴中预热35分钟。2.加入710-3mol/L Ach溶液1.0 ml，于371的水浴中反应40分钟（若反应不充分，可继续反应20分钟），每隔10分钟振摇一次。3.反应40分钟后立即加入碱性羟胺（1 mol/L NH2HCl与3.5 N NaOH溶液在用前20分钟等容混合，并不时振荡）4.0 ml。4.依次加入4 N HCl和3.710-2mol/L FeCl3各2 ml，每加一种试剂都要充分振摇。5.上述反应液用滤纸过滤，将滤液倒入1.0 ml的比色杯中，以530 nm的波长比色。6.对照管设置:对照管1：为无血、无Ach的其他试剂空白对照；对照管2：为全血及试剂的空白对照，无Ach；对照管3（标准Ach值）：为反应系中全量Ach的对照：对照管的操作步骤与样品管相同。【计算】碱酯酶活性值以0.15 ml全血在40 分钟内水解Ach的mol来表示（mol Ach/0.15 ml/40分钟）1.酶活性值的计算A1,A2,A3和A样本 分别为对照管1、2、3和样品管的光密度值。A3-A1为单纯Ach全量的光密度值，A2-A1为血液的光密