生化室作业指导书3.29.doc

目目 录录 序号序号主主 题题 内内 容容文件编号文件编号 1 血清总胆红素 T BIL 测定 JMYY JYK SOP SH 01 2 血清直接胆红素 D BIL 测定 JMYY JYK SOP SH 02 3 血清丙氨酸氨基转移酶测定 JMYY JYK SOP SH 03 4 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 JMYY JYK SOP SH 04 5 血清总蛋白 TP 测定 JMYY JYK SOP SH 05 6 血清白蛋白 ALB 测定 JMYY JYK SOP SH 06 7 血清碱性磷酸酶 ALP 测定 JMYY JYK SOP SH 07 8 谷氨酰转移酶测定JMYY JYK SOP SH 08 9 血清葡萄糖 GLU 测定 JMYY JYK SOP SH 09 10 血清总胆汁酸 TBA 测定 JMYY JYK SOP SH 10 11 血清总胆固醇 CHO 测定 JMYY JYK SOP SH 11 12 血清甘油三酯 TG 测定 JMYY JYK SOP SH 12 13 血清载脂蛋白 A1 APOA1 测定 JMYY JYK SOP SH 13 14 血清载脂蛋白 B APOB 测定 JMYY JYK SOP SH 14 15 血清脂蛋白 a 比浊法测定 JMYY JYK SOP SH 15 16 血清高密度脂蛋白 HDL 测定 JMYY JYK SOP SH 16 17 血清低密度脂蛋白 LDL 测定 JMYY JYK SOP SH 17 18 血清尿素 UREA 测定 JMYY JYK SOP SH 18 19 血清肌酐 CREA 测定 JMYY JYK SOP SH 19 20 血清尿酸 UA 测定 JMYY JYK SOP SH 20 21 血清钙 Ca 比色法测定 JMYY JYK SOP SH 21 22 血清镁 Mg 测定 JMYY JYK SOP SH 22 23 血清无机磷 Pi 测定 JMYY JYK SOP SH 23 24 血清肌酸激酶 CK 测定 JMYY JYK SOP SH 24 25 血清肌酸激酶 MB 同工酶测定 JMYY JYK SOP SH 25 26 血清乳酸脱氢酶 LDH 测定 JMYY JYK SOP SH 26 27 C 反应蛋白 CRP 测定 JMYY JYK SOP SH 27 28 血清 淀粉酶测定 JMYY JYK SOP SH 28 29 胆碱酯酶 CHE 测定 JMYY JYK SOP SH 29 30 免疫球蛋白 IgG 测定 JMYY JYK SOP SH 30 31 免疫球蛋白 IgM 测定 JMYY JYK SOP SH 31 32 免疫球蛋白 IgA 测定 JMYY JYK SOP SH 32 33 血清补体 C3 测定 JMYY JYK SOP SH 33 34 血清补体 C4 测定 JMYY JYK SOP SH 34 35 抗链球菌溶血素 O ASO 测定 JMYY JYK SOP SH 35 36 类风湿因子 RF 测定 JMYY JYK SOP SH 36 37 腺苷脱氨酶 ADA 测定 JMYY JYK SOP SH 37 38 血氨 Amm 测定 JMYY JYK SOP SH 38 39尿液或脑脊液总蛋白测定 JMYY JYK SOP SH 39 40 尿微量白蛋白 MALB 检测 JMYY JYK SOP SH 40 41 恶性肿瘤特异性生长因子测定 JMYY JYK SOP SH 41 42 同型半胱氨酸 HCY 检测 JMYY JYK SOP SH 42 43 钠 钾 氯离子测定 JMYY JYK SOP SH 43 44 动脉血气电极法测定 JMYY JYK SOP SH 44 45 正常值 病理值复合控制品 JMYY JYK SOP SH 45 46 长征混合生化校准品 JMYY JYK SOP SH 46 47 朗道混合生化校准品 JMYY JYK SOP SH 47 48 载脂蛋白 A1 B 复合控制品 JMYY JYK SOP SH 48 49 高 低密度脂蛋白校准品 JMYY JYK SOP SH 49 50 NOVA 血气分析仪操作规程 JMYY JYK SOP SH 50 51 低温冰箱操作维护规程 JMYY JYK SOP SH 51 52 纯水机操作维护规程 JMYY JYK SOP SH 52 53 Modular P800 分析仪操作规程 JMYY JYK SOP SH 53 54 AU2700 操作规程 JMYY JYK SOP SH 54 55 离心机操作维护规程 JMYY JYK SOP SH 55 56 ADVIA 2400 操作规程 JMYY JYK SOP SH 56 57 GEM Premier 3500 操作维护规程 JMYY JYK SOP SH 57 58 TOSOH G 糖化血红蛋白仪操作规程 JMYY JYK SOP SH 58 59 TBA 120FR 生化分析仪操作规程 JMYY JYK SOP SH 59 60 生化室内质量控制操作规程 JMYY JYK SOP SH 60 61 生化室间质量评价操作规程 JMYY JYK SOP SH 61 62 生化室不同仪器间比对操作规程 JMYY JYK SOP SH 62 63 临床生化检验复检规则 JMYY JYK SOP SH 63 修修 订订 页页 序号序号文件编号文件编号需更改的内容需更改的内容更改内容更改内容批准人批准人批准日期批准日期 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 01JMYY JYK SOP SH 01 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清总胆红素 血清总胆红素 T BIL 测定 测定 页页 码 第码 第 5 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 血清总胆红素血清总胆红素 T BIL T BIL 测定测定 1 1 检验目的检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目 确保检测结果的准确 2 2 实验原理实验原理 在酸性溶液中 样本中的总胆红素被钒酸盐氧化生成胆绿素的同时 在 450nm 波长处可引起吸光度的下降 其在 450nm 波长处引起吸光度的变化值与 样本中总胆红素的浓度成正比 通过在 450nm 波长处测定吸光度的变化值即可 测得样本中总胆红素的浓度 3 3 标本标本 3 13 1 病人准备 病人准备 无特殊要求 最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰 3 23 2 类型 类型 血清 3 33 3 标本存放 标本存放 15 25 保存可稳定 2 天 2 8 保存可稳定 7 天 20 保存可稳定 3 个月 如冰冻保存 不可反复冻融 3 43 4 标本运输 标本运输 常温条件下避光保存运输 3 53 5 标本拒收标准 标本拒收标准 标本溶血 细菌污染 脂血 非避光保存运输的标本 4 4 实验材料实验材料 4 14 1 试剂 试剂 上海复星长征医学科学有限公司总胆红素试剂盒 沪食药监械 准 字 2014 第 2400166 号 YZB 沪 1546 40 2014 4 1 14 1 1 试剂组成试剂组成 试剂 1 R1 柠檬酸缓冲液 100mmol L 表面活性剂 1 0 试剂 2 R2 磷酸盐缓冲液 200mmol L 偏钒酸钠 3 8mmol L 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 01JMYY JYK SOP SH 01 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清总胆红素 血清总胆红素 T BIL 测定 测定 页页 码 第码 第 6 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 4 1 24 1 2 试剂准备 试剂准备 试剂为即用式 4 1 34 1 3 试剂稳定性与贮存试剂稳定性与贮存 4 1 3 1 储存条件 2 8 避光 密封保存 4 1 3 2 有效期 在 2 8 避光 密封的储存条件下 试剂盒自检定合格之日 起有效期为 18 个月 4 1 44 1 4 变质指示 变质指示 当试剂有浊度时 表明有细菌污染 不能继续使用 4 1 54 1 5 注意事项 注意事项 此试剂为体外诊断用 不要入口 毒性还末确定 避免和眼 睛 皮肤或衣服接触 如果接触到 立即用大量的水冲洗受损害的部位 15 分钟 接触到眼睛或吞服 立即寻找医疗保护 4 24 2 校准品 校准品 使用上海复星长征医学科学有限公司提供的 TBIL 校准品对自动 分析仪进行校准 4 34 3 质控品 质控品 使用正常值 病理值复合控制品 5 5 仪器仪器 AU2700 生化分析仪 罗氏 P800 生化分析仪 西门子 ADVIA 2400 生化分析 仪 东芝 TBA 120 生化分析仪 6 6 操作步骤操作步骤 6 16 1 样品的准备 样品的准备 将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置 6 26 2 试剂的检测 试剂的检测 仪器开机后 检查各种试剂的位置 体积等确认无误后方 可进行测定 6 36 3 项目基本参数 项目基本参数 参见生化检验 AU2700 生化分析仪 罗氏 P800 生化分析 仪 西门子 ADVIA 2400 生化分析仪 东芝 TBA 120 生化分析仪项目测定参数 6 46 4 仪器操作步骤 仪器操作步骤 参见生化检验 AU2700 生化分析仪 罗氏 P800 生化分析 仪 西门子 ADVIA 2400 生化分析仪 东芝 TBA 120 生化分析仪操作规程 7 7 质量控制质量控制 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 01JMYY JYK SOP SH 01 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清总胆红素 血清总胆红素 T BIL 测定 测定 页页 码 第码 第 7 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 在每一批标本中都应把非定值血清水平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析 以 2S 为质控警告限 3S 为失控限 绘制质控图 判断是否在控 8 8 计算方法计算方法 以 TBIL 复合校准品校准仪器后 在病人结果可报告范围内 仪器直接报告 可靠的检测结果无需手工计算 以 mol L 报告 9 9 参考值范围参考值范围 成人 2 20 mol L 0 1 1 2 mg dL 新生儿 20 200 mol L 1 2 12 mg dL 参考值因性别 年龄 饮食和地域的不同而 有所差别 根据好的实验室经验 每个实验室应建立自己的参考值 我室的参考值 0 21 mol L 1010 临床意义临床意义 胆红素是血红蛋白的降解产物 游离胆红素非极性很强 几乎不溶解于水 在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输 在肝脏中 胆红素与葡萄糖 醛酸结合 生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道 溶血 肝前黄疸 实质的肝损伤 肝性黄疸 和胆管堵塞 肝后黄疸 都 会导致血液胆红素增高 形成高胆红素血症 人群中常见先天性慢性高胆红素 血症 称为 Gilbert 综合症 由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞 破碎增多 使 60 70 的婴儿血液出现总胆红素增高 常用的胆红素检测方法 能检测总胆红素和直接胆红素 直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红 素 因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量 TBIL 增高常见于肝细胞性黄胆 阻塞性黄疸及溶血性黄疸 1111 操作性能操作性能 11 111 1 线性范围 线性范围 684 mol L 10 线性相关系数 r 0 990 11 211 2 精密度 精密度 1 重复性 变异系数 CV 5 2 批间差 相对极差 7 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 01JMYY JYK SOP SH 01 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清总胆红素 血清总胆红素 T BIL 测定 测定 页页 码 第码 第 8 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 11 311 3 准确度 准确度 用相对偏差 B 表示测定结果的不准确度 相对偏差 B 10 11 411 4 灵敏度 灵敏度 测定浓度为 100 mol L 的总胆红素样本 样本的吸光度差值 应不小于 0 080 1212 超出范围结果处理 超出范围结果处理 本法线性上限为 684 mol L 如样品测定值超 过上限时 应将样品用 0 9 氯化钠溶液作 1 4 稀释 重新测定 结果乘以 5 1313 病危报警值的处理病危报警值的处理 无警告 危急值 1414 方法局限性方法局限性 14 114 1测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准 测定温度和测定时间 的控制 14 214 2请勿将试剂 1 与试剂 2 配制成工作试剂使用 14 314 3甘油三酯浓度 5mmol L 抗坏血酸浓度 0 5g L 时对测定无明显干扰 血红蛋白浓度 8 0g L 对测定有轻微的负干扰 14 414 4试剂 1 与试剂 2 启用后 在 2 10 避光的条件下可稳定 14 天 1515 补救措施补救措施 当仪器发生故障时 迅速联系仪器厂家进行维修 1616 参考文献参考文献 16 116 1叶应妩 王毓山 申子瑜主编 全国临床检验操作规程 中华人民共和 国卫生部医政司编 第四版 16 216 2 钱士匀主编 临床生物化学及生物化学检验实验指导 人民卫生出版社 2012 年第 5 版 16 316 3府伟灵 徐克前主编 临床生物化学检验 北京 人民卫生出版社 2012 年第 5 版 16 416 4试剂说明书 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 01JMYY JYK SOP SH 01 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清总胆红素 血清总胆红素 T BIL 测定 测定 页页 码 第码 第 9 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 02JMYY JYK SOP SH 02 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清直接胆红素 血清直接胆红素 D BILD BIL 测 测 定定 页页 码 第码 第 10 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 血清直接胆红素 血清直接胆红素 D BILD BIL 测定 测定 1 1 检验目的检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目 确保检测结果的准确 2 2 实验原理实验原理 在酸性溶液中 样本中的直接胆红素被钒酸盐氧化生成胆绿素的同时 在 450nm 波长处可引起吸光度的下降 其在 450nm 波长处引起吸光度的变化值与 样本中直接胆红素的浓度成正比 通过在 450nm 波长处测定吸光度的变化值即 可测得样本中直接胆红素的浓度 3 3 标本 标本 3 13 1 病人准备 病人准备 无特殊要求 最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰 3 23 2 类型 类型 血清 3 33 3 标本存放 标本存放 15 25 保存可稳定 2 天 2 8 保存可稳定 7 天 20 保存可稳定 3 个月 如冰冻保存 不可反复冻融 3 43 4 标本运输 标本运输 常温条件下避光保存运输 3 53 5 标本拒收标准 标本拒收标准 标本溶血 细菌污染 脂血 非避光保存运输的标本 4 4 实验材料实验材料 4 14 1 试剂 试剂 上海复星长征医学科学有限公司直接胆红素试剂盒 沪食药监械 准 字 2014 第 2400166 号 YZB 沪 1546 40 2014 4 1 14 1 1 试剂组成试剂组成 试剂 1 R1 柠檬酸缓冲液 100mmol L 试剂 2 R2 磷酸盐缓冲液 200mmol L 偏钒酸钠 3 8mmol L 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 02JMYY JYK SOP SH 02 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清直接胆红素 血清直接胆红素 D BILD BIL 测 测 定定 页页 码 第码 第 11 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 4 1 24 1 2 试剂准备试剂准备 试剂为即用式 4 1 34 1 3 试剂稳定性与贮存 试剂稳定性与贮存 4 1 3 1 储存条件 2 8 避光 密封保存 4 1 3 2 有效期 在 2 8 避光 密封的储存条件下 试剂盒自生产之日起有 效期为 18 个月 4 1 44 1 4 变质指示 变质指示 当试剂有浊度时 表明有细菌污染 不能继续使用 4 1 54 1 5 注意事项 注意事项 此试剂为体外诊断用 警告 腐蚀剂 不要入口 避免和眼 睛 皮肤或衣服接触 如果接触到 立即用大量的水冲洗受损害的部位 15 分钟 接触到眼睛或吞服 立即寻找医疗保护 4 24 2 校准品 校准品 使用上海复星长征医学科学有限公司提供的 DBIL 校准品对自动 分析仪进行校准 4 34 3 质控品 质控品 使用正常值 病理值复合控制品 5 5 仪器仪器 AU2700 生化分析仪 罗氏 P800 生化分析仪 西门子 ADVIA 2400 生化分析 仪 东芝 TBA 120 生化分析仪 6 6 操作步骤操作步骤 6 16 1 样品的准备 样品的准备 将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置 6 26 2 试剂的检测 试剂的检测 仪器开机后 检查各种试剂的位置 体积等确认无误后方 可进行测定 6 36 3 项目基本参数 项目基本参数 参见生化检验 AU2700 生化分析仪 罗氏 P800 生化分析 仪 西门子 ADVIA 2400 生化分析仪 东芝 TBA 120 生化分析仪项目测定参数 6 46 4 仪器操作步骤 仪器操作步骤 参见生化检验 AU2700 生化分析仪 罗氏 P800 生化分析 仪 西门子 ADVIA 2400 生化分析仪 东芝 TBA 120 生化分析仪操作规程 7 7 质量控制质量控制 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 02JMYY JYK SOP SH 02 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清直接胆红素 血清直接胆红素 D BILD BIL 测 测 定定 页页 码 第码 第 12 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 在每一批标本中都应把非定值血清水平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析 以 2S 为质控警告限 3S 为失控限 绘制质控图 判断是否在控 8 8 计算方法计算方法 以 DBIL 复合校准品校准仪器后 在病人结果可报告范围内 仪器直接报告 可靠的检测结果无需手工计算 以 mol L 报告 9 9 参考值范围参考值范围 6 8 mol L 参考值因性别 年龄 饮食和地域的不同而有所差别 根据好的实验室经 验 每个实验室应建立自己的参考值 我室的正常值 0 7 mol L 1010 临床意义临床意义 胆红素是血红蛋白的降解产物 游离胆红素非极性很强 几乎不溶解于水 在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输 在肝脏中 胆红素与葡萄糖 醛酸结合 生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道 溶血 肝前黄疸 实质的肝损伤 肝性黄疸 和胆管堵塞 肝后黄疸 都 会导致血液胆红素增高 形成高胆红素血症 人群中常见先天性慢性高胆红素 血症 称为 Gilbert 综合症 由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞 破碎增多 使 60 70 的婴儿血液出现总胆红素增高 常用的胆红素检测方法 能检测总胆红素和直接胆红素 直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红 素 因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量 各种肝炎 肝硬化 阻塞性黄疸均可见增高而且比较转氨酸敏感 尤其适 合于慢性肝炎预后评价及早期肝硬化的诊断 1111 操作性能操作性能 11 111 1 线性范围 线性范围 342 mol L 10 线性相关系数 r 0 990 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 02JMYY JYK SOP SH 02 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清直接胆红素 血清直接胆红素 D BILD BIL 测 测 定定 页页 码 第码 第 13 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 11 211 2 精密度 精密度 1 重复性 变异系数 CV 5 2 批间差 相对极差 10 11 311 3 准确度 准确度 用相对偏差 B 表示测定结果的不准确度 相对偏差 B 10 11 411 4 灵敏度 灵敏度 测定浓度为 10 mol L 的总胆红素样本 样本的吸光度差值应 不小于 0 011 1212 超出范围结果处理超出范围结果处理 本法线性上限为 342mol L 样品测定值超过上限时 应将样品用 0 9 氯 化钠溶液作 1 4 稀释 重新测定 结果乘以 5 1313 病危报警值的处理病危报警值的处理 无警告 危急值 1414 方法局限性方法局限性 14 114 1 测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准 测定温度和测定时间 的控制 14 214 2 请勿将试剂 1 与试剂 2 配制成工作试剂使用 14 314 3 甘油三酯浓度 5mmol L 抗坏血酸浓度 0 5g L 时对测定无明显干扰 血红蛋白浓度 8 0g L 对测定有轻微的负干扰 14 414 4 试剂启用后 在 2 10 避光的条件下可稳定 14 天 1515 补救措施补救措施 当仪器发生故障时 迅速联系仪器厂家进行维修 1616 参考文献参考文献 16 116 1 叶应妩 王毓山 申子瑜主编 全国临床检验操作规程 中华人民共和 国卫生部医政司编 第四版 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 02JMYY JYK SOP SH 02 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清直接胆红素 血清直接胆红素 D BILD BIL 测 测 定定 页页 码 第码 第 14 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 16 216 2 钱士匀主编 临床生物化学及生物化学检验实验指导 人民卫生出版社 2012 年第 5 版 16 316 3 府伟灵 徐克前主编 临床生物化学检验 北京 人民卫生出版社 2012 年 第 5 版 16 416 4 试剂说明书 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 03JMYY JYK SOP SH 03 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血血清清 丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 测测定定页页 码 第码 第 15 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 血清丙氨酸氨基转移酶测定血清丙氨酸氨基转移酶测定 1 1 检验目的检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目 确保检测结果的准确 2 2 实验原理实验原理 本试剂以国际临床化学会 IFCC 推荐方法为基础 所采用的反应原理与反应 式如下 样本中的丙氨酸氨基转移酶 ALT 催化丙氨酸的氨基转换至 氧代戊 二酸 生成丙酮酸和 L 谷氨酸 丙酮酸被试剂中的乳酸脱氢酶 LDH 还原为 L 乳酸的同时还原型辅酶 I NADH H 被氧化为辅酶 I NAD 而使波长 340nm 处的吸光度值下降 通过对波长 340nm 处吸光度值的下降速率进行监测 即可测得样本中丙氨酸氨 基转移酶 ALT 的活性 3 样本中内源性丙酮酸的干扰 可由试剂中的乳酸脱氢酶 LDH 在测定的 延迟时间内快速 完全地消除 不会对测定产生干扰 ALT L 丙氨酸 酮戊二酸 丙酮酸 L 谷氨酸 丙酮酸 NADH H L 乳酸 NAD H2O 3 3 标本标本 3 13 1 病人准备 病人准备 12 小时禁食 3 23 2 类型 类型 血清 3 3 3 3 标本存放 标本存放 3 天内的活性损失 2 8 保存 10 15 25 保存 17 标本稳定性 20 保存至少可稳定 4 周 3 43 4 标本运输 标本运输 常温条件下保存运输 3 53 5 标本拒收标准 标本拒收标准 标本溶血 细菌污染的标本 LDH 乳酸脱氢酶 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 03JMYY JYK SOP SH 03 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血血清清 丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 测测定定页页 码 第码 第 16 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 4 4 实验材料实验材料 4 14 1 试剂 试剂 上海复星长征医学科学有限公司 ALT 试剂盒 沪食药监械 准 字 2014 第 2400166 号 YZB 沪 1546 40 2014 4 1 14 1 1 试剂组成试剂组成 试剂 1 R1 L 丙氨酸 600mmol L 乳酸脱氢酶 1820U L NADH0 26mmol L Tris 缓冲液 80mmol L 试剂 2 R2 Tris 缓冲液 80mmol L 氧代戊二酸 36mmol L EDTA 5 0mmol 4 1 24 1 2 试剂准备 试剂准备 试剂为即用式 4 1 34 1 3 试剂稳定性与贮存 试剂稳定性与贮存 在 2 8 避光 密封的储存条件下 试剂盒自生产 之日起有效期为 12 个月 4 1 44 1 4 变质指示 变质指示 当试剂有看得见的微生物生长 有浊度 或者未开盖的液体 有沉淀时 表明试剂已变质 不能继续使用 4 1 54 1 5 注意事项 注意事项 试剂中含有稳定剂 可能存在一定的刺激作用和毒性 请勿 直接接触皮肤及眼睛 一旦接触 即用大量清水冲洗 请勿吞服 4 24 2 校准品 校准品 使用上海复星长征医学科学有限公司提供的 ALT 校准品对自动 分析仪进行校准 4 34 3 质控品 质控品 使用正常值 病理值复合控制品 5 5 仪器仪器 AU2700 生化分析仪 罗氏 P800 生化分析仪 西门子 ADVIA 2400 生化分析 仪 东芝 TBA 120 生化分析仪 6 6 操作步骤操作步骤 6 16 1 样品的准备 样品的准备 将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 03JMYY JYK SOP SH 03 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血血清清 丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 测测定定页页 码 第码 第 17 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 6 26 2 试剂的检测 试剂的检测 仪器开机后 检查各种试剂的位置 体积等确认无误后方 可进行测定 6 36 3 项目基本参数 项目基本参数 参见生化检验 AU2700 生化分析仪 罗氏 P800 生化分析 仪 西门子 ADVIA 2400 生化分析仪 东芝 TBA 120 生化分析仪项目测定参数 6 46 4 仪器操作步骤 仪器操作步骤 参见生化检验 AU2700 生化分析仪 罗氏 P800 生化分析 仪 西门子 ADVIA 2400 生化分析仪 东芝 TBA 120 生化分析仪操作规程 7 7 质量控制质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析 以 2S 为质控警告限 3S 为失控限 绘制质控图 判断是否在控 8 8 计算方法计算方法 以 ALT 复合校准品校准仪器后 在病人结果可报告范围内 仪器直接报告 可靠的检测结果 以 U L 报告 9 9 参考值范围参考值范围 男性 40U L 0 67 kat L 女性 31U L 0 52 kat L 我室的参考值 7 50U L 1010 临床意义临床意义 丙氨酸氨基转移酶 ALT 旧称谷丙转氨酶 GPT 天门冬氨酸氨基转移酶 AST 旧称谷草转氨酶 GOT 它们是氨基转移酶类的典型代表 氨基转移酶 催化氨基从氨基酸转移给 酮酸的反应 ALT 是肝脏的特异性酶 仅在肝胆疾 病时显著升高 而 AST 水平的升高和心肌或骨骼肌损伤 以及肝组织损害等都 有关 因此同时进行 ALT 和 AST 的检测 可用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损 伤 AST ALT 比率用于肝病的鉴别诊断 比率1 和 严重肝病有关 常见慢性肝病 ALT 活性在下列疾病可见增多 1 肝胆疾病 传染性肝炎 肝硬化活动 期 中毒性肝炎 脂肪肝 胆管炎和胆囊水等 2 心血管疾病 心肌梗塞 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 03JMYY JYK SOP SH 03 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血血清清 丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 测测定定页页 码 第码 第 18 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 心肌炎 心力衰竭时的肝脏瘀血 脑血出等 3 骨骼肌疾病 多发性肌炎 肌营养不良等 一些药物和毒物可引起 ALT 活性升高 如氯丙嗪 异菸奎宁 水扬酸制剂 及酒精 铅泵 四氯化碳或有机磷等 1111 操作性能操作性能 11 111 1 线性范围 线性范围 试剂 盒 线性范围应覆盖 5 500 U L a 线性相关系数 r 应不小于 0 990 b 5 50 U L 范围内 线性偏差应不超过 3 0U L 51 500 U L 范围内 线性偏差应不超过 10 11 211 2 精密度 精密度 1 重复性 变异系数 CV 5 2 批间差 相对极差 5 11 311 3 准确度 准确度 相对偏差 B 应不大于 10 11 411 4 灵敏度 灵敏度 10 0U L 样本的吸光度变化率 A min 应不小于 0 003 1212 超出范围结果处理超出范围结果处理 本试剂的线性范围为 5 450U L 当测定样本中丙氨酸氨基转移酶活性高于 450U L 时 应对样本进行稀释后再进行测 应将样品用 9g L 氯化钠溶液作 1 9 稀释 重新测定 结果乘以 10 1313 病危报警值的处理病危报警值的处理 无警告 危急值 1414 方法局限性方法局限性 14 114 1 测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准 测定温度和测定时间 的控制 14 214 2 试剂中含有的乳酸脱氢酶 LDH 可以在测定延迟孵育时间内消除样本中 内源性丙酮酸的干扰达 1mmol L 血清丙酮酸的正常水平为 0 034 0 102mmol L 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH 03JMYY JYK SOP SH 03 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血血清清 丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 测测定定页页 码 第码 第 19 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 14 314 3 高脂血或黄疸样本在波长 340nm 处有较高的吸光度 这类样本如含有高 活性的丙氨酸氨基转移酶 在测定过程中可能导致底物耗尽但在 340nm 仍维持 有较高吸光度的现象 此时应对样进行稀释后再进行测定 14 414 4 试剂启用后 在 2 10 避光的条件下可稳定 30 天 若试剂混浊 或以 水为空白在波长 340nm 处的吸光度值低于 1 0A 则不能使用 1515 补救措施补救措施 当仪器发生故障时 迅速联系仪器厂家进行维修 1616 参考文献参考文献 16 116 1 叶应妩 王毓山 申子瑜主编 全国临床检验操作规程 中华人民共和 国卫生部医政司编 第四版 16 216 2 钱士匀主编 临床生物化学及生物化学检验实验指导 人民卫生出版社 2012 年第 5 版 16 316 3 府伟灵 徐克前主编 临床生物化学检验 北京 人民卫生出版社 2012 年 第 5 版 16 416 4 试剂说明书 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH JMYY JYK SOP SH 0404 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 页页 码 第码 第 20 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 1 1 检验目的检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目 确保检测结果的准确 2 2 实验原理实验原理 本试剂以国际临床化学联合会 IFCC 推荐方法为基础 所采用的反应原理 与反应式如下 样本中的天门冬氨酸氨基转移酶催化 L 天冬氨酸和 氧代戊二酸氨基转 移 生成草酰乙酸和 L 谷氨酸 在还原型辅酶 I NADH H 和苹果酸脱氢酶 MDH 的存在下 草酰乙酸 被还原为 L 苹果酸 还原型辅酶 I NADH H 被氧化为辅酶 I NAD 从而使 波长 340 nm 处的吸光度值下降 通过对波长 340 nm 处吸光度值的下降速率进 行监测 即可测得样本中天门冬氨酸氨基转移酶 AST 的活性 L 天门冬氨酸 酮戊二酸 AST 草酰乙酸 L 谷氨酸 草酰乙酸 NADH H MDH 苹果酸脱氢酶 L 苹果酸 NAD 3 3 标本标本 3 13 1 病人准备 病人准备 12 小时禁食 3 23 2 类型 类型 血清 3 33 3 标本存放 标本存放 3 天内的活性损失 2 8 保存 8 15 25 保存 10 标本稳定性 20 保存至少可稳定 3 个月 3 43 4 标本运输 标本运输 常温条件下保存运输 3 53 5 标本拒收标准 标本拒收标准 标本溶血 细菌污染的标本 4 4 实验材料实验材料 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH JMYY JYK SOP SH 0404 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 页页 码 第码 第 21 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 4 14 1 试剂 试剂 上海复星长征医学科学有限公司 AST 试剂盒 沪食药监械 准 字 2014 第 2400166 号 YZB 沪 1546 40 2014 4 1 14 1 1 试剂组成试剂组成 试剂 1 R1 乳酸脱氢酶 1365 U L NADH 0 26mmol L L 天冬氨酸 300mmol L Tris 缓冲液 88mmol L 试剂 2 R2 苹果酸脱氢酶 1635 U L 氧代戊二酸 36mmol L Tris 缓冲液 88mmol L EDTA 5 0mmol L 4 1 24 1 2 试剂准备 试剂准备 试剂为即用式 4 1 34 1 3 试剂稳定性与贮存 试剂稳定性与贮存 在 2 8 避光 密封的储存条件下 试剂盒自生产 之日起有效期为 12 个月 4 1 44 1 4 变质指示 变质指示 当试剂有看得见的微生物生长 有浊度 或者未开盖的液体 有沉淀时 表明试剂已变质 不能继续使用 4 1 54 1 5 注意事项 注意事项 试剂中含有稳定剂 可能存在一定的刺激作用和毒性 请勿 直接接触皮肤及眼睛 一旦接触 即用大量清水冲洗 请勿吞服 4 24 2 校准品 校准品 使用上海复星长征医学科学有限公司提供的 AST 校准品对自动 分析仪进行校准 4 34 3 质控品 质控品 使用正常值 病理值复合控制品 5 5 仪器仪器 AU2700 生化分析仪 罗氏 P800 生化分析仪 西门子 ADVIA 2400 生化分析 仪 东芝 TBA 120 生化分析仪 6 6 操作步骤操作步骤 6 16 1 样品的准备 样品的准备 将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置 6 26 2 试剂的检测 试剂的检测 仪器开机后 检查各种试剂的位置 体积等确认无误后方 可进行测定 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH JMYY JYK SOP SH 0404 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 页页 码 第码 第 22 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 6 36 3 项目基本参数 项目基本参数 参见生化检验 AU2700 生化分析仪 罗氏 P800 生化分析 仪 西门子 ADVIA 2400 生化分析仪 东芝 TBA 120 生化分析仪项目测定 6 46 4 仪器操作步骤 仪器操作步骤 参见生化检验 AU2700 生化分析仪 罗氏 P800 生化分析 仪 西门子 ADVIA 2400 生化分析仪 东芝 TBA 120 生化分析仪操作规程 7 7 质量控制质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析 以 2S 为质控警告限 3S 为失控限 绘制质控图 判断是否在控 8 8 计算方法计算方法 以 AST 复合校准品校准仪器后 在病人结果可报告范围内 仪器直接报告可 靠的检测结果 以 U L 报告 9 9 参考值范围参考值范围 37 5 34 U L 0 1 0 6 kat L 我室的参考值 13 40 U L 1010 临床意义临床意义 丙氨酸氨基转移酶 ALT 旧称谷丙转氨酶 GPT 天门冬氨酸氨基转移酶 AST 旧称谷草转氨酶 GOT 它们是氨基转移酶类的典型代表 氨基转移酶 催化氨基从氨基酸转移给 酮酸的反应 ALT 是肝脏的特异性酶 仅在肝胆疾病时显著升高 而 AST 水平的升高和 心肌或骨骼肌损伤 以及肝组织损害等都有关 因此同时进行 ALT 和 AST 的检 测用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤 AST ALT 比率可用于肝病的鉴别诊断 比率1 和严重肝病有关 常见慢性肝病 病毒性肝 炎 急性风湿性心肌炎 中毒性肝炎等此酶活性显毒增高 1111 操作性能操作性能 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH JMYY JYK SOP SH 0404 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 页页 码 第码 第 23 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 11 111 1 分析灵敏度 分析灵敏度 10 0U L 样本的吸光度变化率 A min 应不小于 0 003 11 211 2 线性范围 线性范围 试剂 盒 线性范围应覆盖 5 450 U L a 线性相关系数 r 应不小于 0 990 b 5 50 U L 范围内 线性偏差应不超过 3 0U L 51 450 U L 范围内 线性偏差应不超过 10 11 311 3 准确度 准确度 相对偏差 B 应不大于 10 11 411 4 精密度 精密度 1 重复性 变异系数 CV 应不大于 5 2 批间差 相对极 差 R 应不大于 5 1212 超出范围结果处理超出范围结果处理 试剂的线性范围为 5 450U L 当测定样本中天冬氨酸氨基转移酶活性高于 450U L 时 应对样本进行稀释后再进行测 应将样品用 0 9g L 氯化钠溶液作 1 9 稀释 重新测定 结果乘以 10 1313 病危报警值的处理病危报警值的处理 无警告 危急值 1414 方法局限性方法局限性 14 114 1 测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准 测定温度和测定时间 的控制 14 214 2 试剂中含有的乳酸脱氢酶 LDH 可以在测定延迟孵育时间内消除样本中 内源性丙酮酸的干扰达 1mmol L 血清丙酮酸的正常水平为 0 034 0 102mmol L 14 314 3 高脂血或黄疸样本在波长 340nm 处有较高的吸光度 这类样本如含有高 活性的天冬氨酸氨基转移酶 在测定过程中可能导致底物耗尽但在 340nm 仍维 持有较高吸光度的现象 此时应对样进行稀释后再进行测定 2016 12 31 发布 2017 01 01 实施 文件编号 文件编号 JMYY JYK SOP SH JMYY JYK SOP SH 0404 生化室作业指导书生化室作业指导书 版号版号 修号 修号 2 0 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 页页 码 第码 第 24 页 共页 共 309 页页 编写者 陈晓玲编写者 陈晓玲审核者 王沛审核者 王沛批准者 王沛批准者 王沛 14 414 4试剂启用后 在 2 10 避光的条件下可稳定 30 天 若试剂混浊 或以 水为空白在波长 340nm 处的吸光度值低于 1 0A 则不能使用 1515 补救措施补救措施 当仪器发生故障时 迅速联系仪器厂家进行维修 1616 参考文献 参考文献 16 116 1 叶应妩 王毓山 申子瑜主编 全国临床检验操作规程 中华人民共和 国卫生部医政司编 第四版 16 216 2 钱士匀主编 临床生物化学及生物化学检验实验指导 人民