实验动物环境设施与标准3.ppt

实验动物环境设施控制3 第三节设施的运行管理 一 设施的人员配置1 总负责人2 具体操作人员3 设施质量监督人员二 规章制度和SOP的建立三 仪器设备的管理 第四节特殊动物实验设施 一 生物危害特殊实验动物设施生物危害程度分级 低危害 中等危害 有限危害 高个体危害 低群体危害 高个体危害 高群体危害 生物安全水平分级生物安全防护水平 BSL 分为4个等级 分别称为一级 二级 三级和四级生物安全防护实验室 BSL1 4实验室 一级生物安全防护 BSL 1 实验室普通微生物实验室 即处理对健康成年人已知无致病作用的病原微生物 不特别禁止外人入内 穿戴工作服 防护眼镜等 可在开放的实验台 洗手池上操作 BSL 2实验室 BSL 3实验室中等致病微生物实验室 即处理对人或环境具有中等潜在危害的病原微生物 如布鲁杆菌 沙门菌 霍乱弧菌 肝炎病毒 狂犬病毒等 使用 级或 级生物安全柜 实验服 手套 面部保护措施等 备有高压灭菌器 自动关门等 禁止外人入内 BSL 4实验室目前我国最高安全级别的生物安全防护实验室 其研究对象多为严重的甚至是致死性疾病微生物或其毒素 如SARS 禽流感 炭疽菌等 实验室处于负压密闭状态 空气只能从外部流入室内 空气向外排放要经严格净化过滤 杀菌等处理 实验或动物实验必须在负压生物安全柜进行 实验动物必须饲养在负压生物安全柜中 人员进入实验室 要更换专用防护服装 离开时按无菌要求 将脱掉的外层鞋套 手套和衣服装入高压消毒炉中消毒 然后脱掉内层鞋套 手套 置另一高压消毒袋中 消毒面部和手 试验物品和动物通过传递窗进入实验室 实验废物 动物尸体 实验材料及仪器设备移出实验室前 需经严格消毒和无菌包装后 经传递窗递出实验室 实验前后 要求对实验室进行严格的消毒 灭菌和空气净化处理 人流 淋浴 更衣 保护性实验服 手套 面罩等 前室 三级生物安全防护实验室 感染操作室 消毒室 淋浴 更衣 物流 物品 清洁准备室 消毒柜 传递窗 三级生物安全防护实验室 感染操作室 消毒柜 消毒室 动物实验室的相应生物安全防护水平 ABSL 分为4个等级 分别称为一级 二级 三级和四级生物安全防护实验室 ABSL1 4实验室 一 笼具笼架 一 笼具大小适当 保证空气流通 方便动物取食和饮水 以及人对动物的观察 各种动物大小不同 生物学特性亦有差异 因此所用的笼具也各有特点 1 理想笼具的要求 坚固耐用 操作方便 经济实用 2 笼具的式样 鞋盒式笼具 悬挂式金属网笼具 前开口式笼具以及其他笼具如 如代谢笼 组合式笼具 活动笼具以及动物围栏等特殊笼具 独立供气动物笼 IVC 系统 IndependentVentilationCage IVC 99 9 的空气经过过滤 每个动物饲养笼配备不间断的真正高效HEPA high efficiencyparticulateair 过滤器 IVC系统不适宜做大规模的实验动物繁殖和生产 只适合于啮齿类动物进行动物实验研究 以及饲养免疫缺陷动物 遗传学研究动物等 应用IVC系统最好在洁净动物实验室内 笼类垫料的更换应在特殊的封闭罩内进行 二 饮水设备和无菌水生产系统 一 饮水设备 包括饮水瓶 饮水盆和自动饮水装置等 二 无菌水生产系统这种系统通常先以超滤膜滤去0 5 m以上的悬浮微粒 可滤去细菌和真菌 然后以紫外线照射 可杀灭病毒 并进一步杀灭细菌和真菌 纯水机 三 双扉压力蒸汽灭菌器 渡槽及传递窗 四 层流架层流架是本身带空气净化和通风系统 可作实验动物饲养和动物实验观察的专用设备 一般为四周封闭 前方开启的柜形构造 其侧边及背部安装空气净化系统 内部分层放置动物饲养盒 五 隔离罩 器 塑料制作外包裹层 内以刚性材料作构架支撑 隔离罩是保持内环境完全无菌的密封装置 为无菌实验动物饲养繁殖 实验操作和处理后观察的唯一设备 目前其他实验动物设施设备都无法达到这种无菌标准 六 单体独立通气笼盒 IVC 是采用高效终端空气过滤器 通过对盒内输送经过高效过滤的空气以保障实验动物免受微生物感染 是具有持续防护作用的预防屏障 七 运输笼国际上常用的运输笼具有控温控湿和空气过滤通风系统 其内部已基本达到SPF级设施标准 实际上是一间特殊的能移动的实验动物饲养设施 通常是将卡车的车厢改造为洁净动物设施 其中具有控制各种环境指标的系统措施 八 垫料垫料的原料主要有锯末 木屑 电刨花 粉碎玉米芯等 国外尚有膨化系列垫料 吸附力强 代谢笼 九 实验动物设施的维护实验动物设施的各项环境因素指标靠有关设备的运转来维持 并始终处于动态的变化之中 通过对环境指标的常规监测 可随时掌握机器设备的运行状况 并确定是否需要维修 一 空气过滤系统的维护空气过滤系统有初效过滤 中效过滤和高效过滤三个级别 初效过滤材料可滤去空气中直径大于5 m的微粒 中效过滤材料的过滤对象是粒径大于1 m的微粒 而高效过滤材料的过滤孔径有多种 实验动物设施常用的高效过滤材料对0 5 m以上微粒的过滤效率可达到99 97 空气过滤系统在工作时不断有粉尘被阻拦在滤材上 可逐渐形成堵塞 而对多个环境因子造成不良影响 如进气量下降 换气次数减少 并导致氨浓度上升 梯度压差改变等 因此过滤材料应及时更换 初效过滤材料一般1周到2周更换一次 更换频度取决于单位面积滤材的进气强度以及外环境空气中的粉尘含量等因素 初效过滤材料换下后经水洗干燥可重复使用 中效过滤材料3个月到半年更换一次 影响其更换周期的因素与初效过滤材料相仿 中效过滤材料通常做成袋状 称中效袋 外包中效箱 更换时打开中效箱更换中效袋 换下的中效袋经洗涤干燥后也可重复使用 高效过滤器装在送风系统末端 洁净室中高效过滤器通常1 1 5年更换一次 因为更换高效过滤器对环境因素有很大影响 因而不宜过频更换 延长更换周期最有效的措施是加大高效过滤器的面积以及提高初效和中效过滤的质量 尚应改善外环境清洁状况 降低粉尘含量 二 空调系统维护空调系统的正常运行是温度湿度两个重要指标得到有效控制的保证 因此必须充分重视实验动物设施中空调系统的维护 通常每年在机器较空闲的时候 应进行一次检修 空调系统最常发生的问题是热交换部件被灰尘和纤维状物质覆盖 从而热交换率下降 于是夏天的高温不能降低 冬天的低温不能提高 此时应清洗热交换部件 还应在每次更换初效过滤材料时检查清洗热交换部件 致冷剂泄漏使制冷能力下降亦颇多见 如发现制冷能力下降 应考虑空调系统制冷剂不足 温度湿度自动控制装置也可能发生故障 从而导致控制失灵或不准确 此时应检修调校 压力蒸汽灭菌器是实验动物设施中最重要的物料灭菌器械 应随时注意其灭菌效果 最好每次灭菌都加指示剂 一次灭菌失败即可导致微生物污染 而导致严重后果 水的灭菌系统也很重要 尤其在水源微生物控制不严格的情况下 要特别注意水灭菌系统的完好性 无菌水系统常见的问题是超滤膜击穿而除菌失败 此外也有紫外光源损坏等 因而要经常检查维护 系统正常运行时 水中应无微生物检出 除了上述三个重要系统要经常维护外 尚有许多其它维护工作要做 如传递渡槽中消毒液的检查和更换等 任何一个环节的故障都可能导致设施环境质量下降 从而造成实验动物不合格 而引起巨大损失 十 环境和设施的管理环境和设施的使用维护对于实验动物的生产及动物实验的