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3.2 月季的花药培养一被子植物花粉发育过程1被子植物的花粉是在 中由 经过 分裂形成的。所以,花粉是 的生殖细胞。2结合教材内容填下列示意图:小孢子母细胞(2n)( )时期(n)单核( )期(n)双核期( )细胞核(n)( )细胞核(n)( )细胞(n)( )细胞(n)( )个精子(n)( )分裂( )分裂单核( )期(n)( )分裂思考1由此可见,被子植物的花粉的发育要经历 时期, 期和 期等阶段。思考2在正常情况下,一个小孢子母细胞可以产生 个精子;在一枚花药中可以产生 个花粉。二产生花粉植株的两条途径1产生花粉植株(即单倍体植株)的两种途径:一是花粉通过 阶段发育为植株,二是通过 阶段发育为植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中 的种类及其 的配比。2填写培育花粉植株的途径图解:( )花药中的花粉( )( )( )(愈伤组织)( )丛芽生根移栽3胚状体的结构及其发育过程与种子相似,所以把胚状体到从芽的过程称为 ,而把从愈伤组织到从芽的过程称为 。4.植物体细胞发育而来的胚状体又叫 ,花粉发育而来的胚状体叫 ,可发育为_ 植物,要使其成为纯合的正常植株,可用 处理发育中的幼苗。三影响花药培养的因素1影响花粉植株成功与否和成功率的主要因素: 和 等。2材料的选择:从花药来看,应当选择(初花期、盛花期、晚花期)的花药;从花粉来看,应当选择(四分体期、单核期、双核期、萌发期)的花粉。因为单核期以前的花药 ,选择单核期以后的花药接种, 。从花蕾来看,应当选择(完全未开放、略微开放、完全盛开)的花蕾。四实验设计1.材料的选择:选择花药时一般通过 确定花粉发育时期,此时需要对花粉细胞核进行染色,最常用的染色剂是 和 ,它们分别可以将细胞核染成 色和 色。2.材料的消毒花蕾(无菌水)清洗(无菌吸水纸)吸干水分(无菌水)冲洗3.接种和培养(1)剥取花药:消毒后的花蕾,要在 条件下除去花萼、花瓣。在剥离花药时,要尽量不损伤花药,否则 还要彻底除去花丝,因为 。(2)接种花药:剥取的花药要立刻接种。每个培养瓶接种 个花药。(3)培养:花药培养利用的培养基是 培养基,ph为 ,温度为 ,幼苗形成之前(需要、不需要)光照。(4)培养2030d后,花药开裂,长出 或释放出 。前者还要转移到 进行分化培养成再生植株;后者要尽快 并转移到新的培养基上。(5)通过愈伤组织形成的植株,常常会出现 的变化,因而需要鉴定和筛选。3.2一1. 花药 花粉母细胞 减数 2小孢子母细胞(2n)(小孢子四分体)时期(n)单核(居中)期(n)双核期(生殖)细胞核(n)(花粉管)细胞核(n)(生殖)细胞(n)(营养)细胞(n)(2)个精子(n)(有丝)分裂(减数)分裂单核(靠边)期(n)(有丝)分裂思考1 小孢子四分体时期 单核期 双核期 思考2 8 许多二 1胚状体 愈伤组织 激素 浓度 2. (脱分化)花药中的花粉(分化)(再分化)( 胚状体 )(愈伤组织)(诱导)丛芽生根移栽3分化 再分化 4体细胞胚或胚状体 花粉胚 单倍体 秋水仙素三1.材料的选择 培养基的组成 2初花期 单核期 质地幼嫩,极易破碎 花瓣已有松动,微生物可能侵入花药,给消毒带来困难完全未开放四 1. 镜检 醋酸洋红 焙花青-铬矾 红色 蓝黑色 2. 70%酒精30s 0.1%氯化汞24min(或1%次氯酸钙或饱和漂白粉) 3. (1)无菌 接种后容易从受伤部位产生愈伤组织 与花丝相连的花药不
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