高中生物教学论文 原生动物四膜虫“小材”有“大用”(pdf).pdf

2 o l o 第 4 5卷 第 1 2期 原生动 生塑兰望塑 四膜虫 小材 有 大用 术 物 缪 炜 中 国 科 学院水 生生 物 研究 所 湖北 武 汉 4 3 0 0 7 2 摘 要 在 概 述 了原 生动 物 四 膜 虫的 基 本 知 识 和 回 顾 了四 膜 虫在 分 子 生 物 学 领 域 的 重 要 贡 献 的基 础 上 介 绍 了利 用该 单 细胞 真 核 模 式 生物 所 开 展 的 四 膜 虫 功 能 基 因 组 学 毒 理 基 因组 学 进 化 基 因组 学 和 表 观 基 因 组 学 等 方 面 的 研 究 工 作 并 展 望 了 四膜 虫作 为 普 通 生 物 学 实验 进入 中学和 大 学课 堂 的应 用前 景 关键 词 四膜 虫 单 细胞 真 核 模 式 生物 基 因组 学 中 国图 书 分 类号 Q9 5 9 1 1 文 献 标 识码 A 2 0 0 9 年 的诺 贝尔 生 理 学 或 医 学 奖 授 予 了 3位 美 国科 学家 伊 丽莎 白 布 莱 克本 卡 萝尔 格 雷 德 杰克 绍斯塔克 以表彰他们发现了端粒和端粒 酶保 护染 色 体 的机 理 然 而 几 乎所 有 的媒 体把 视 线都 聚焦 在 了该 项 研 究 对 人 类 癌 症 和 衰 老 的重 要 意义 却忽略了一个小小的生命 只有 5 0 m左右 大小 的四膜虫 T e t r a h y me n a 对这 一伟大发现的贡 献 1 9 7 8年 布 莱 克本 教 授 正 是 在 这 个 单 细胞 真 核 生物 中发 现 了染 色 体 的末 端 端 粒 t e l o m e r e 的 结 构 并 于 1 9 8 5年 和 她 的学 生 格 雷 德 在 四 膜 虫 中进 一 步发 现 了形 成 端粒 的端 粒 酶 t e l o m e r a s e 事 实 上 这 并 非 四 膜虫 的首 次 得奖 1 9 8 9年 切 赫 教 授 就 因为在 四膜 虫 中发 现 了 核酶 r i b o z y me 而 获 得 了当 年 的诺 贝 尔化 学 奖 l 3 l 人 们 不 禁 好 奇 四膜 虫 小小 的 身躯 中倒 底 蕴 育着 怎样 巨大 的能量 令 其 为科 学研 究 做 出 了如此 巨大 的贡 献 其实 四膜虫广泛分布在世界各地的淡水水体 中 只 是 因为单 细 胞 的它 只 有针 尖 大 小 不被 人 们 所 注 意 说起 四膜虫 的历史 可 以追 溯 到 3 0 0多 年前 当 列 文 虎 克用 第 1台显 微 镜 将 人 类 的视 线 扩 展 至 微 观世 界 时就 发 现 了 四膜 虫 在 生物 学 分 类 系统 中 四膜 虫隶 属 于原 生 动 物 亚 界 中的 纤 毛 门寡 毛 纲 膜 口 目膜 15 1 科 四膜 虫 属 图 1 本 文 附 图见 封 四 因 其位于身体前端的 口器 由 4片纤毛膜组成而得名 四膜 虫 主要 以水 中 的细 菌 和其 他 有 机 质 为食 目前 还没有发现它能引起人体疾病或危害人类健康 四膜 虫 细 胞 最 大 的特 点 是 在 1个 细 胞 中有 2 种 核 5 小 核 mi c r o n u c l e u s 是 生 殖 核 生 长 时 基 因 一 般 不 表 达 5对 染 色 体 二 倍 体 大 核 f m a c r o n u c l e u s 是 营养 核 基 因转 录旺盛 约 2 2 5条 染色体 每 个 基 因约 4 5个 拷 贝 具 有 众 多染 色 体 的 四膜 虫 大核 好 比一 个 丰 富的资 源库 为研 究遗 传 物质 D N A 代 谢 所 需 的 分 子 提 供 了的 基 础 这 也 是 为什 么 作 为 染 色 体末 端 的 端 粒 最早 在 四膜 虫 中被 发 现 的 重 要 原 因 四膜 虫 生 活 史 包 括 无 性 繁 殖 的营 养 生 长 阶 段 和 有 性 生 殖 的 接 合 生 殖 阶 段 图 2 其 中 接 合 生 殖 中 不 同 交 配 型 的 四 膜 虫 细 胞 两 两 接 合 小 核 减 数 分 裂 形 成 配 子 核 互 换 后 生 成 合 子 核 合 子 核分 裂分 化 产 生新 的大 核 和小 核 同时 旧 大核降解 最后接合 细胞分开完成有性生殖 在此 过 程 中 涉及 的减 数 分 裂 配 子 的发 生 合 子 的 形 成 等都 与多细胞真核生物 中的很类 似 使得 四膜虫 成 为 相 关 核 事件 和 发育 生 物学 研 究 的 良好 材 料 同 时 四膜 虫 还 具 有 以下 特 点 生 长 快 速 2 3 h细胞 数 量增 加 1 倍 作 为第 1种进 行 实验 室 无 菌 纯 培养 并 且 实现 细胞 同 步化 的 真核 细胞 其 培 养 简单 经济 操作精确度高和可控性强 利用四膜虫 中 已建 立 起 的一 系 列 成 熟 的基 因重 组 和 细胞 转 染 等分子遗传学操作方法 和技术 使得在嗜热 四膜虫 中进行 基 因敲 除 插 入 基 因表 达抑 制 和基 因过 表 达 等 十分 方 便快 捷 因此 四 膜虫 成 为 一 种重 要 的 单 细胞 真 核模 式 生物 6 在过 去 的 5 0年 中 以 四膜 虫 为 实 验 对 象 在 基 础 研 究 中取 得 了一 系列 突破 性 的 成果 如上世纪 6 0年代第 1个微管 动力蛋 白的发 现 7 0 8 0年代端粒和端粒酶 的发现及其作 用机制 的研究 大大促进了对细胞老化过程的认识 8 0年 代 核酶 及 R N A 自我 拼 接 的发 现 打 破 了人 们关 于 酶都是 由蛋 白质组成的 的固有观念 9 0年代组蛋 白 乙 酰化 翻译 后 修 饰 功 能 的发 现 成 为 当 下 热 点 研 究 表 观遗 传 学 的 经 典 文 献 之 一 大 核 D N A 重 整 中 基 金资助 国家 自然基金 资助 项 目 N o 3 0 8 7 0 3 5 6 N o 3 1 0 7 1 9 9 3 2 生物学通报 2 0 1 0年 第 4 5卷 第 l 2期 R N A i 机 制 的 存 在 作 为 共 同 发 现 者 被 评 为 S c i e n c e 2 0 0 2年度科学发现之一 2 0 0 5年底 美 国科 学 家 完 成 了 嗜热 四膜 虫 大 核 基 因组 的测 序 计 划 并 建 立 了相 应 的 预 测 基 因 数 据 厍 T e t r a h y me n a Ge n o me Da t a b a s e h t t p ww w c i l i a t e o r g E 7 J 单 细胞 的 四膜 虫竞 拥有 超 过 2 4 0 0 0多个 蛋 白编 码 基 因 比较 基 因组 学 的研 究 还 表 明 相 比 酵 母等一些模式生物 嗜热 四膜虫 和人类具有更 高 程度的基 因功能保 守性 其具备许 多在其他单 细 胞 模 式 生 物 如 酿 酒 酵 母 S a c c h a r o m y c e s c e r e v i s i a e 和 粟 酒 裂 殖 酵 母 S c h i z o s a c c h a r o m y c e s p o mb e中 没 有 发 现 的 而 在 不 同 真 核 生 物 类 群 包 括 人 中 普 遍保 守的功能基 因和基础代谢类型 其 中就包括 了 5 8个与人类疾病有关 的基 因 嗜热 四膜虫 的 大核 基因组测序不仅为 四膜虫研究 的进一步发展 奠定 了基 础 而 且 作 为 第 1个 完 成 的纤 毛 虫 基 因 组 直 接 推动 了另 外 3种 纤 毛 虫 草履 虫 尖 毛 虫 和 小瓜虫 大核基因组的测序完成 纤毛虫的后基因 组 时 代 随之 到 来 下 面 就 近 年 来 我 们 开 展 的 四膜 虫基 因组学研究做一介绍 1 四膜虫功能基 因组学研究 2 0 0 7 2 0 0 8年 我 们 通 过 和美 国 罗切 斯 特 大 学 合作 针对 嗜热 四膜虫构建 了世界上第 1个纤毛 虫 全 基 因组 基 因芯 片 Mi c r o a r r a y 分 析 平 台 基 于 此高通量基 因表达分析技术 完成 了嗜热 四膜虫 3 种典 型生理或发育状 态 生长 饥饿 及接合 生殖 共 2 0个 时期 的全基 因组表达数据 的采集和分析 建立和发展 了协同表达基因的发现等分析方法 8 3 为 四膜 虫 功 能 基 因组 学 的 开 展 奠 定 了 基 础 被 同 行 评 价 为 a m a j o r m i l e s t o n e i n mo l e c u l a r r e s e a r c h o n c i l i a t e s 以此 为 基 础 建 立 的 四膜 虫 基 因表 达 数据 库 T e t r a h y me n a G e n e E x p r e s s i o n D a t a b a s e 网 站 h t t p t g e d i h b a c c n 于 2 0 0 9年 5月 开 通 可 在线提供嗜热 四膜虫任一基因的表达谱 和协同表 达 基 因 c o e x p r e s s e d g e n e 的 搜 索 服 务 同 时 提 供 了嗜 热 四膜 虫 所 有 预 测 基 因 的 核 酸 和 蛋 白质 序 列 及 每 一 个 基 因 的 Mi c r o a r r a y探 针 序 列 等 信 息 T G E D还 欢迎其他研究者 上传 自有数 据 以达 到 与 全 世 界 对 四膜 虫 和 纤 毛虫 研 究 有 兴趣 的科 研 工 作者分享数据的 目的 T G E D 自开通 以来 17 1 访问 量近 2 0 0多次 来 自4 0多个 国家和地区的访 问 I P 数量 超过了 3 0 0 0个 这些数据显示 T G E D已经 成 为 世 界 四膜 虫 研究 的重 要 资 源 目前 我 们 与 南 开大学合作开展 的四膜虫转录组测序工作进展顺 利 预 计 2 0 1 0年 内完 成 相 应 数 据 库 的 建 立 将 进 一 步 推 动 四膜 虫 相 关 研 究 2 四膜 虫 毒 理 基 因 组 学研 究 四膜虫 作 为 毒 理 学及 生 态 毒 理 学研 究 的 良好 模 式 生 物 已有 几 十年 历史 9 1 然 而 对各 类 化 学 污染 物 的毒性 研 究 主要集 中于 急性 毒 理 实验 而 针 对长 期暴露 于环境毒物下产生的慢性作用 以及对致毒 机 理 本 质 的认识 十 分不 足 有 学 者 指 出 目前 的毒 理 学与生态毒理学研究的主要难题在于如何将各 类化学污染物质对动 植物造成的个体毒害作用与 其 对 整个 生态 环 境 的影 响相 统 一 而 在接 下 来 的几 十 年 里所 面 临 的挑 战则 表 现在 4个方 面 1O 1 揭 示 分 子 的代 谢 机 制 及 在 亚 细胞 水 平 与化 学 污 染 物 的 交 互 作用 包 括对 f 生 物 基 因组 和蛋 白质 组 的影 响 2 发展对作用于 复杂 的细胞与生理过程 的毒性效 应 的模 型 3 阐明分子 细胞 与药理生理 实验 终 点 与更 高层 次 的生 态 效 应 间 的 联 系 4 实 现 对 工 业生产 的进步 包括生物技术与纳米技术的发展在 内所可能带来的危害 的预警作用 因此 我们提出 针对那些慢性低毒 的 且可通过食物链传递和生物 富集的污染物 如持久性有机污染物等 危害大 分 子机理复杂及 缺乏 高效灵敏 的毒性评价系统等问 题 利用 嗜热 四膜虫处于食物链底层 对环境更敏 感 可纯培养 具备真核生物基本生命过程和成熟 的一系列分子遗传学操作方法等特点 开展分子毒 理学研究 目前我们利用抑制差减杂交 S S H 和 Mi c r o a r r a y方 法 在 基 因水 平 筛 选 出一 批 滴 滴 涕 D D T 二恶英 T C D D 和三丁基锡 T B T 暴露 下差 异表 达 的 四膜 虫基 因 通过 基 因本体 g e n e o n t o l o g y G O 分析推测了这些环境激素类污染物对 四膜虫的分子作用机理 从而开辟 了四膜虫毒理基 因组学研究方 向 同时 我们还利用重组基因表达 和细胞转染技术将被 T B T显著诱导表达的热休克 蛋 白 7 0基 因 h s p 7 0 2 的启 动子与报告 基 因绿色 荧光蛋 白 G F P 连接到 四膜虫 r D N A载体 p D 5 H 8 中 得到的表达载体 H S P 7 0 2 一 G F P p D 5 H 8转染进 四膜虫体 内 在 T B T暴露下 该四膜虫细胞株因 h s p 7 0 2 基因启 动子驱动下游 基 因的表达而发 出绿色荧光 图 3 具有实时监测环境样 品 T B T的 应 用前 景 2 01 0 年 第 4 5卷 第 1 2期 生物学通报 3 3 四膜 虫 进 化 基 因 组 学 研 究 杜 布 赞 斯 基f T h e o d o s i u s D o b z h a n s k y 在 1 9 7 3年 写 道 不 在进化 论 的光 芒照 射下 生 物学 中的一 切 理 论 都将 变得 苍 白无 力 N o t h i n g i n B i o l o g y Ma k e s S e n s e E x c e p t i n t h e L i g h t o f E v o l u t i o n 人 们 也逐 渐 地 认识 到 正是 生 物进 化 的过 程使 得 物 种个 体 基 因 组 中那 些适 合 特定 的 不 断 变 化 的环 境 中 的特 性 能 伴 随 着 物 种 多 样性 的稳 定 发 展 和 自然选 择 的作 用 而得 以世代 传递 不 同群 体 和个 体在 生物 学性 状方 面 的差 异 反 映 了其 在进 化 过 程 中基 因组 与 内 外 环境相互作用的结果 多基因家族 mu l t i g e n e f a m i l v 的存 在 是真 核生 物 的基 困组 的一 个显 著 特点 它 们 由某一 共 同祖先 基 因经 重复 和变 异产 生 根 据其 在进化上的同源性又可分为直系同源 f o r t h o l o g y 和 旁系同 p a r a l o g y 的关系 我们在对基因进行相关 的功 能研 究 的 同时 也 必然 需 要 对形 成 个 体 特殊 的 基 因 家族 以及 相 关 的 表 达 调 控 参 与代 谢 反 应 的 过 程 等背 后 的演 化历 程 和 进化 驱 动力 进 行 探讨 从 而使 我们 可 以更 清 晰地认 识生 命 的本 质和 复 杂性 因此 从模 式生 物 人手 针对 具 有 重要 功 能 的基 因家 族 从 进化 的角度 来探 讨 其 功 能演 化 是 真 核生 物 进 化 基 因组学 研究 的重 要 内容 根 据 全 基 因组 的 比较 分 析 发 现 嗜 热 四膜 虫 具 有 相 比 许 多 其 他 单 细 胞 真 核 生 物 更 多 基 因 数 目 其 基 因组 内含 有 为 数 众 多 的 大 型 基 因 家族 并 且 这 些 基 因 家 族 的 存 在 和 近 期 产 生 的基 因 复 制 g e n e d u p l i c a t i o n 事 件 可 能 很 好 地 反 映 了该 物 种 内重 要 的基 因类 型 发 生 的功 能 多 样 性 近 期 的进 化适 应 性 以及 所 受 到 的选 择 压 力 此 外 研 究 中 也 特 别 指 出 嗜 热 四膜 虫 基 因 组 中发 生 了大 规 模 数 目倍 增 的 基 因 家 族 主 要 参 与 细 胞 内 与 感 知 s e n s i n g 和应 对 r e s p o n d i n g 环境 变化 密 切 相关 的 生 理 过 程 而 这 些 正 是 作 为 具 有 自 由生 活 异 养性 类 型 细胞 的关 键 性 生 理 反 应 所 以 我们 提 出 通 过 对 四膜 虫 中与 环 境 胁 迫 关 系 密 切 的基 因类 型或 基 因家 族 的 比较 分 析 将 对 揭 示 其 所 代 表 的这 类 真核 模 式 生 物 中 的相 关 基 因 的 起 源 基 因功 能 及 其 在进化过程 中产生的多样 化和复杂性提供重要 线索和有益的信息 近 期 我 们 通 过 在 基 因 组 水 平 对 嗜 热 四 膜 虫 P 4 5 0 A B C转 运 蛋 白 基 因 家 族 和 金 属 硫 蛋 白 等 基 因 家 族 基 因 的 鉴 定 结 构 进 化 和 功 能 演 化 的 分 析 推 测 了 它 们 在 四膜 虫 中 发 生 大 量 倍 增 的 时 间和 模 型 建 立 了真 核 生 物 中这 些 基 因 的进 化 路 线 提 出 了 自由生 活 单 细 胞 真 核 生 物适 应 环 境 表 现 在 基 因组 水 平 上 的特 点 同时 也 证 实 了我 们 提 出 的 四膜 虫 是 研 究 与 环 境 感 知 和 响应 相 关 基 因家 族 进 化 与 功 能 良好 真 核 模 式 生 物 的 观点 4 表 观 基 因组 学 研 究 表 观遗 传学 E p i g e n e t i c s 是指 基于 非基 因序 列 改 变 所 致 的 可 遗 传 的 基 因 表 达 水 平 变 化 表 观 遗 传 学 的研 究 内容 主 要 包 括 D N A 化 学 修 饰 组 蛋 白化 学 修 饰 染 色 质 可 塑 性 变 化 及 非 编码 R N A 的 调控 作用等方面 表观基 因组学 E p i g e n o m i c s U 是 在 基 因 组水 平 上 对 表 观遗 传 学 改 变 的研 究 四膜 虫 中组 蛋 白 乙酰 化 对 基 因 表 达 调 控作 用 的发现是表观遗传学 中的重要贡献 近年来 四膜 虫 表 观遗 传 学 研 究 也 在 持 续 进 展 我 们 开 展 的 四 膜 虫 表 观 基 因组 学 是 利 用 四膜 虫 野 生 型 突变 株 和 敲 除 株 的 Mi c r o a r r a y数 据 在 基 因 组 水 平 开 展 组 蛋 白 甲基 化 磷 酸 化 和 泛 素 化 及 相 关 调 控 基 因 在代 谢 发 育通路 或 网络 中作用 的 四膜 虫表 观遗 传学研究 目前我们 的研究主要集 中在 Hl磷酸 化 和 去 磷 酸 化 在 四膜 虫 饥 饿 时 期 的 作 用 以 及 H 3 K 2 7去 甲基 化 在 四膜 虫 接 合 生 殖 过 程 中的 作 用 等 方 面 已 经 完 成 了 多个 四膜 虫 组 蛋 白突 变 株 和 H 3 K 4甲 基 化 酶 H 3 K 2 7去 甲 基 化 酶 基 因 敲 除 株 的 Mi c r o a r r a y分 析 在开展四膜虫基础研究的同时 我们也借鉴国 际 同行 的经 验 加强 四膜 虫 的科 普 教 育 纤 毛虫 分 子 生 物 学 会 议 C i l i a t e Mo l e c u l a r B i o l o g y 属 于 F A S E B 夏 季研 究 会 议 系列 之一 是该 领 域 中世 界 最 高水 平 的学 术 会 议 每 2年 召 开一 次 每 次 会 议 都 会 安 排 推 动 四膜 虫 进人 中学 和 大 学本 科 实验 的讨 论 美 国 科学家在这方面作了很多工作 比如今年康奈尔大 学 的 C l a r k教 授 在 美 国 国 家 健 康 研 究 院 N a t i o n a l I n s t i t u t e s o f He a l t h 的 资 助 下 利 用 四膜 虫 开 展 了 针对 中学生 的 第 2课 堂教育 A S S E T a d v a n c i n g s e c o nd a r y s c i e n c e e du c a t i o n wi t h t e t r a h y me n a h t t p s c o n fl u e n c e c o r n e l 1 e d u d i s p l a y A S S E T H o me 我 们 也和武汉高校合作 通过将 四膜虫接 合生殖实验 作 为普 通 动 物 学 的 自选 实 验 介 绍 四 膜 虫 基 因组 数 据 库 的使 用 以及 提 供 本 科 生 参 与科 研 工 作 等 方 式 向 青 少 年 宣 传 和 普 及 四膜 虫 知 识 让 学 生 了 解 4 生 物 学 通 报 Q Q 箜箜鲞笙 塑 性的变化 术 近 5 4亿年以来生物多样 刘 俊 中国 科学院古脊椎动物与古人类研究所 北京 1 o o o 4 4 摘要 J 4 日 J z 要介绍 了地质年代表 的划分 以及 地球历 史中的重要类群的起 源时 间 重点介 绍 了 5 4亿年 以来有关生物 多样性 变化的研 究 生命发展 史表 明人类需要保 护生物 多样性 来维 持 自 己的 生存 关键词 地质年代表 灭绝事件 新类群起 源 中国图书分类号 Ql l 文献标 志码 A 生 物多样性 是 当今世 界全人类 关心 的热点 今 天地球上所 有 的物种据 估计至少有数 百万种 不 过 在 以每 天 数 种 的 速 度灭 绝 可 以想 象 地 质 历 史 中生物多样性是变化的 但是具体是如何变化 的呢 地球生命历史中常常有 5次大灭绝的提法 这个结论是如何得来的 人们对生命历史 的认识来 自于化石 地质学 家 根 据 地层 中包 含 的化 石 的 主要 演 化 阶 段 将 3 8 5亿 年来 的地球演化史划分为太古宙 元古宙 和显 生 宙 显 生 宙 指 看 得 见生 物 的 时代 在大 约 舢 5 t 止 5 4亿年前 动物演化 出外壳和清晰的骨骼结构 故 称 显 生 宙 而 显 生 宙 又根 据 生 物 面 貌 与 现 代 的 差异分为古生代 中生代 以及新生代 图 1 各个 代又细分为若 干纪 纪下又分为若干世 例如新生 代共包括 7个世 最近 1万年称为全新世 世下分 为期 期是地质 年代 的最小单位 年代单位 宙代 纪世期 对应的地层单位分别为 宇界系统阶 各 个 阶 期 以全 球 层 型 剖 面 和 层 型 点 G S S P 通 常 称为 金钉子 来定义 而金钉子一般是 以某类标 准 化 石 的首 次 出 现来 确 立 的 例 如 二 叠 系 与 三 叠 止 S 止 S j 止舢 舢 喜 屯 S l L S 喜 屯 小 小 四膜 虫 对 科 学 研究 的 巨大 贡 献 引 起 学 生 对 四膜虫研究 的兴趣 我们期待着更多 的人关注和 加入 四膜虫研究队伍 也期待着小小 四膜虫在科 学研究 中的又一巨大突破早 日到来 主 要 参 考文 献 1 Bl a c k b u r n E H J G Ga l 1 A t a n d e ml y r e p e a t e d s e q u e n c e a t t h e t e r mi n i o f t h e e x t r a c h r o mo s o ma l r i b o s o mal RNA g e n e s i n Te t r a h y me n a J Mo l B i o l 1 9 7 8 1 2 0 1 3 3 5 3 2 Gr e i d e r C W E H B l a c k b ur n I d e n t i f i c a t i o n o f a s p e c i fic t e l o me r e t e r mi n al t r a n s f e r a s e a c t i v i t y i n T e t r a h y me n a e x t r a c t s Ce l l 1 9 8 5 4 3 2 P t 1 4 0 5 一 l 3 3 Kr u g e r K e t Se l f s p l i c i n g RNA a u t o e x c i s i o n a n d a u t o c y c l i z a t i o n o f t h e rib o s o mal RNA i n t e r v e n i n g s e q u e n c e o f T e t r a h y m e n cq C e l l 1 9 8 2 3 1 1 l 4 7 5 7 4沈 韫芬 原 生动物 学 北京 科学 出版社 1 9 9 9 5 Go r o v s k y M A M a c r o a n d mi c r o n u c l e i o f T e tr a h y me n a p y rif o r mi s a mo d e l s y s t e m f o r s t u d y i n g t h e s t r u c t u r e a n d f u n c t i o n o f e u k a r y o t i c n u c l e i J P r o t o z o o l 1 9 7 3 2 O 1 l 9 2 5 6 As a i D J F J E d i t o r s T e t r a h y me n a t h e r mo p h i l a Vo 1 6 2 Me t h o d s i n C e l l Bi o l o g y Ac a d e mi c p r e s s 2 0 0 0 5 8 0 7 Ei s e n J A e t a 1 Ma c r o n u c l e a r g e n o me s e qu e n c e o f t h e c i l i a t e T e t r a h y me na t h e r mo p h i l a a mo d e l e u k a r y o t e PL o S Bi o l 2 0 0 6 4 S 9 2 8 6 8 Mi a o W c t a 1 Mi c r o a r r a y a n aly s e s o f g e n e e x p r e s s i o n d u rin g t h e T e t r a h y m e n a t h e r mo p h i l a l i f e c y c l e P L o S O n e 2 0 0 9 4 2 4 4 2 9 9 P e r s o o n e G D Di v e To x i c i t y t e s t s o n c i l i a t e s a s h o r t r e v i e w E c o t o x i c o l E n v i r o n S a f 1 9 7 8 2 2 1 0 5 1 4 1 0 Mo o r e M N Bi o c 0 mp l e x i t y t h e po s t g e n o me c h a l l e n g e i n e c o t o x i c o l o g y A q u a t T o x i c o l 2 0 0 2 5 9 1 2 1 1 5 1 1 Mi a o W e t a 1 I d e n t i fi c a t i o n o f dif f e r e n t i all y e x p r e s s e d g e n e s i n T e t r a h y me n a t h e r mo p h i l a i n r e s p o n s e t o d i c h l o r o d i p h e n y h r i c h l o r o e t h a n e D D T b y s u p p r e s s i o n s u b t r a c t i v e h y b ri d i z a t i o n E n v i r o n Mi c r o b i o l 2 0 0 6 8 6 1 1 2 2 9 1 2 F e n g L W Mi a o Y W u Di f f e r e n t i all y e x p r e s s e d g e n e s o f T e t r a h y me n a t h e r m o p h i l a i n r e s p o n s e t o t r i b u t y h