水合氯醛对小鼠生长发育、学习记忆和治疗指数的影响.pdf

第 3 2卷第 2期 2 0 1 1 年3 月 V 0 l 3 2 NO 2 M a r 2 0l l 井 冈山大学学报 自然科学版 J o u r n a l o f J i n g g a n g s h a n Un i v e r s i t y Na t u r a l S c i e n c e 9 8 文章编号 1 6 7 4 8 0 8 5 2 0 1 1 0 2 0 0 9 8 0 4 水合氯醛对小鼠生长发育 学习记忆和 治疗指 数 的影响 张科学 赵佳佳 李华超 沈羽 权全 顾涛 许侃侃 张洋 戴体俊 1 徐州医学院麻醉学院 江苏 徐州2 2 1 0 0 4 2 徐州医学院麻醉生理学教研室 江苏 徐州2 2 1 0 0 4 3 徐州医学院麻醉药理学教研室 江苏 徐州2 2 1 0 0 2 4 邳州市红人医院麻醉科 江苏 邳州2 2 1 3 0 0 摘要 目的水合氯醛对小鼠生长发育 学习记忆和治疗指数的影响 方法用各组小鼠体重变化趋势观察水合 氯醛对小鼠生长发育的影响 避暗法和跳台法观察水合氯醛对小鼠学习记忆的影响 用分组法测量水合氯醛对小 鼠催眠的E D L D 和治疗指数 结果在跳台和避暗实验中 与NS 组相比 第一天C1 C 2 C 3 水合氯醛剂 量分别为0 0 0 5 0 0 0 7 5 0 0 1 ml 1 0 g 潜伏期缩短 P 0 0 1 避暗实验C1 c 3 组和跳台实验c 2 C 3 组错误次 数增加 P 0 0 1 第二天 与NS 组相比 避暗实验中c 1 C 3 组错误次数增加 尸 0 0 5 或P 0 0 1 C1 组潜伏 期缩短 P0 0 5 各组小鼠在1 5 d 体重大致呈增长趋势 组问比较无明 显差异 结论水合氯醛可在短期内损害小鼠学习记忆能力 对生长发育无明显影响 治疗指数为3 8 4 2 用药安 全范围较小 关键词 水合氯醛 生长发育 学习记忆 治疗指数 中图分类号 R 9 7 1 1 Q 4 1 8 文献标识码 A DOI 1 0 3 9 6 9 8 i s s n 1 6 7 4 8 0 8 5 2 0 1 1 0 2 0 2 6 EFFECTS oF CHLoRALDURATE oN THE GRoW TH LEARNI NG M EM oRY AND THERAPEUTI C I NDEX oF M I CE Z HA NG Ke x u e Z H AO J i a j i a 1 L I Hu a c h a o S HE N Y u 1 QU A N Qu a n GU T a o 1 XU Ka n k a n Z HA NGY a n g DAI T i j u n 1 S c h o o l o f An e s t h e s i o 1 o g y Xu z h o u M e d i c a l Co l l e g e Xu z h o u J i a ng s u 2 2 1 0 0 4 Ch i n a 2 De p a r t me n t o f An e s t h e t i c P h y s i o l o g y Xu z h o u Me d i c a l Co l l e g e Xu z h o u J i a n g s u 2 21 0 0 4 Ch i n a 3 De p a r t me n t o f An e s t h e t i c P h a r ma c o l o g y Xu z h o u M e di c a l Co l l e g e Xu z h o u J i a n g s u 2 21 0 0 2 Ch i n a 4 A n a e s t h e s i a F a c u l t y Ho n g r e n H o s p i t a l o f P i Z h o u P iz h o u J i a n g s u 2 2 1 3 0 0 C h i n a Ab s t r a c t Ob j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e e ff e c t s o f c h l o r a l d u r a t e o n t h e g r o wt h l e a r n i n g me mo r y a n d t h e r a p e u t i c i n de x o f mi c e M e t ho ds Th e e x p e r i m e n t s we r e d e s i g ne d t o s t ud y t he e f f e c t s o f c h l o r a l d u r a t e o n t he g r o wt h by me a s u r i n g t h e we i g h t o f mi c e l e a r n i n g me mo r y b y s t e p t h r o u g h a n d s t e p d o wn t e s t t h e h y p n o s i s E Ds o L D5 o a n d t h e r a p e u t i c i n d e x o f c h l o r a l d ura t e o n mi c e b y g r o u p i n g me t h o d Re s u l t s I n t h e s t e p d a wn a n d s t e p t hro u g h t a s k s 收稿 日期 2 0 1 0 1 2 1 2 修改 日期 2 0 l l O 2 0 4 基金项 目 国家自然科学基金项 目 3 0 8 7 2 4 3 2 3 0 4 7 1 6 5 7 3 9 9 7 0 7 1 5 江苏省 自然科学基金项目 B K 2 0 0 1 4 3 作者简介 张科学 1 9 8 8 一 男 江苏徐卅 1 人 徐州医学院麻醉学院本科生 E ma i l z h a n g k e x u e 2 0 1 0 1 6 3 c o rn 赵佳佳 1 9 8 8 一 女 浙江缙云人 徐州医学院麻醉学院本科生 E m a i l 1 1 3 9 7 0 4 8 5 q q c o m 李华超 1 9 8 8 一 男 江苏连云港人 徐州医学院麻醉学院本科生 E m a i l 3 5 3 8 6 0 2 1 1 q q t o m 沈羽 1 9 8 8 一 女 江苏扬州人 徐州医学院麻醉学院本科生 E ma i l 3 5 1 8 9 1 1 5 3 q q c o rn 权全 9 8 8 一 男 江苏徐州人 徐州医学院麻醉学院本科生f E ma i l 8 1 2 0 9 9 9 9 6 q q c o rn 顾 涛 1 9 8 9 男 江苏苏州人 徐州医学院麻醉学院本科生 E ma i l 4 5 2 6 2 1 2 6 8 q q e o m 许侃侃 1 9 8 8 一 男 江苏徐州人 徐州医学院麻醉学院本科生 E mai l 8 1 2 8 6 5 9 1 2 q q c o rn 张洋 1 9 7 6 一 男 江苏徐州人 讲师 主要从事重要脏器保护方面的研究 E ma i l 7 2 4 2 6 1 7 7 7 q q c o m 戴体俊 1 9 4 4 一 男 江苏徐州人 教授 主要从事麻醉药理学研究 E ma i l d a i t ij u n 1 6 3 c o rn 井冈山大学学报 自然科学版 a s c o mp a r e d wi t h t h e NS g r o u p t h e s t e p d o wn l a t e n c y d e c r e a s e d i n t h e C 1 C 2 a n d C 3 gro u p s t h e d o s e o f c h l o r a l d u r a t e a r e 0 0 0 5 0 0 0 7 5 a n d 0 0 1 mL 1 0 g a t t h e fi r s t d a y P 0 0 1 t h e e r r o r t i me s o f C 1 C 3 gro u p s i n s t e p t h r o u g h t e s t a n d C 2 C 3 gro u p s i n s t e p d o wn t e s t i n c r e a s e d 尸 O 0 1 A t t h e s e c o n d day i n t h e s t e p t hro u g h t e s t t h e e r r o r t i me s o f C 1 a n d C 3 gro u p s i n c r e a s e d 0 0 5 a n d t h e s t e p d o wn l a t e n c y o f C 1 gro u p d e c r e a s e d r 尸O 0 5 T h e w e i g h t o f a l l gro u p s s h o w e d t h e t e n d e n c y o f i n c r e a s e f r o m t h e fi r s t da y t o the fi f t h da y a n d t h e r e i s n o o b v i o u s d i f f e r e n c e a mo n g the m Co n c l u s i o n Ch l o r a l d u r a t e h a s n o o b v i o u s e f f e c t o n t h e gro wt h o f t h e mi c e b u t ma y t e mp o r a r i l y i mp a i r t h e l e a r n i n g me mo r y T h e t h e r a p e u t i c i n d e x o f c h l o r a l d u r a t e i s 3 8 4 2 a n d t h e s c o p e o f d r u g s a f e t y i s l o w Ke y wo r d s c h l o r a l d u r a t e gro wt h l e a r n i n g me mo r y t h e r a p e u t i c i n d e x 药品和食品对儿童生长发育 的影 响问题成 为 当今 社会关注热 点 水合氯醛是 三氯乙醛 的水合 物 口服给药迅速吸收 是儿科临床上广泛应用的 一 种 中枢镇静药物 被广泛用于止惊及检查以及 小儿高热 破伤风及子痫引起的惊厥等 d J L 灌肠 应用方便 且起效快 作用时间长 儿童正处于生 长和智力发育关键时期 水合氯醛对生长发育和学 习记忆的影响的探究显得尤为重要 而在这方面研 究国内外少见报道 本实验旨在探究水合氯醛对小 鼠生长发育和学习记忆的影响和治疗指数 以供临 床用药参考 1 材料 与方法 1 1 试剂和仪器 水合氯醛 批号 9 9 1 2 0 7 上海试剂一厂 白 鹤分厂产 用蒸馏水将其配制成 1 0 溶液 DT 2 2 0 0 跳台仪 成都泰盟科技有限公司产品 B A2 2 0 0小 鼠避暗仪 成都泰盟科技有 限公司产品 1 2 实验动物及方法 昆明种小 鼠 1 0 g M 6 g 共计 2 4 8 只 许可证号 YXK 苏 2 0 0 5 0 0 1 8 由徐州医学 院实验动物中心提 供 实验前 2 d使小 鼠熟悉实验室环境 自由饮食 摄水 跳台法和避暗法 L E 5 o 和 E D 5 0 测量雌雄兼 用 比例相当 1 3 水合氯醛对小鼠学习记忆的的影响 采用避暗法和跳台法 按分层随机 区组设计将 6 4只小鼠分为2大组 每大组又分4组 NS组 Cl 组 C 2组和C 3组f 后 3组 水合 氯醛 剂量 分 别为 0 0 0 5 0 0 0 7 5 0 0 1 m1 1 0 g 各组小 鼠雌雄 比例 平均体重基本相 同 每组均为8只 各组在训练前 1 5 mi n 分别腹 腔注射 生理盐水和相应剂量水合 氯 醛 1 3 1 跳 台实验 将小鼠放入反应箱 内适应环境 5 mi n 然后 以 3 6 V 5 0 H z交流 电给予电击 小鼠受电击 正常 反应是跳 回平台 以躲避伤害性 刺激 多数小 可 能再次或多次跳至铜栅上 受到 电击后义止 回平 台 如此训练 5 mi n 2 4 h后重作测验 记永 小鼠第 1次跳下平台的潜伏期 s t e p d o w n l a t e n c y 5 mi n内受到电击的次数 错误次数 e rr o a i me s 1 若 小鼠 5 mi n未跳下平台 错误次数记为 0次 潜伏 期记为 3 0 0 S 1 3 2 避暗实验 J 训练 时 先将 小 鼠放入 反应 箱 中 适 应环 境3 min 然后取出 向暗室底部铜栅通4 0 V 5 0 Hz 交流 电 再将小鼠背对洞口放入明室 小鼠进入暗 室则受到 电击 2 4 h 后重复实验 记录小 鼠第1次进 入 暗室的时问 步入潜伏期 s t e pt hro u g h l a t e n c y 和5 m i n 内受到的电击次数 错误次数 e r r o r t i me s 小鼠5 m i n 未进入暗室 错误次数记为0次 潜伏期 记 为3 0 0 S 1 4 水合氯醛对小鼠生长发育的影响 按分层随机区组设计将6 4 只小 鼠分为4组 NS 组 Cl组 C 2组和C 3组f 后3组水合氯醛剂量为 0 0 0 5 0 0 0 7 5 0 0 1 m1 1 0 g 各组小鼠雌雄比例 平均体重基本相 同 每组均为l 6只 分别测定注药 前基础体重和注药后1 d 至5 d 各组小鼠体重 1 5 水合氯醛对小鼠催眠的治疗指数 T I 治疗指数用 L D5 0 E D 5 0 表示 催H E E D5 o 和L D 5 0 测定用小 鼠1 2 0只 以分组法测定腹腔注射水合氯 醛 的E D5 0 和L D5 o 各分 为6组 剂量呈等比数列 每组1 0只 观察记录每组中阳性结果 1 6 统计学处理 所有数据均用 X t s 表示 用S P S S 1 3 0软件进 行统计学处理 生长发育采用趋势图 组间比较采 用单因素方差分析 尸 0 0 5认为差异有显著性 1 0 0 外 冈山人学学报 自然科学版 2 结果 2 1 水合氯醛对小鼠学习记忆的的影晌 在避暗实验中 与 NS组相比 第一天 C1组 利 C 3组错误次数增加 P 0 0 1 CI组 C 2组 C 3组滞伏期缩短 P 0 0 1 在跳台利避暗实验 中 与 NS组相比 第 天 c1组和 C 3组错误次数增 加 P 0 0 5或 P O 0 1 C1组潜伏期显著性缩 短 P 0 0 5 见表 1 在跳台实验中 与 NS组 相比 第一天 2组和 3组错误次数增加 尸 0 0 1 Cl组 C 2组 C 3组潜伏期缩短 P 0 0 1 见 表 2 表 1 避 暗实验 中错误 次数和潜伏期 的 比较 月 8 S Ta bl e l The c o mpa r i s o ns o f er r or t i me s a nd s t e p d own l a t e n c y i n s t e p t hr ou gh t e s t 表 2 跳台实验中错误次数和潜伏期的比较 n 8 士s T a b l e 2 Th e c o mp a r i s o n s o f e r r o r t i me s a n d s t e p d o wn l a t e n c y i n s t e p d a wn t e s t 8 NS 1 5土 1 5 4 6士 l O 3 C1 2士05 I 2 2士98 C2 l 6土 1 0 6 2士9 8 C3 l 1士 1 0 1 1 5士 l 5 2 与 NS组相比 p O 0 5 JD O 0 5 见图 1 图 l 各组小 鼠体重的比较 1 6 F i g 1 T h e c o mp a r i s i o n s o f we i g h i n mi c e 2 3水合氯醛对小鼠催眠的治疗指数 治疗指数为 3 8 4 2 用药安全范围较小 见表 3 表 3水合氯醛 E D 5 0 L D 5 0 和治疗指数的测定 n 1 0 T a b l e 3 T h e E D s o a n d L D s o o f c h l o r a l d u r a t e me t h o d o f 2 r 0 u D i n g 1 3 讨论 本实验结果表 明 水合氯醛可在短期内损害小 O 5士 1 1 O 2士 0 5 O 1士O4 O 2士 O 7 2 5 7士8 2 2 8 7士2 3 2 9 4 l 6 2 5 6 9 l O0士O O O 士 O4 O 1 士 O 4 1 4士 3 5 3 0 0 00 2 8 6 3 9 2 6 3士 1 O 5 2 8 4士2 9 鼠学习记忆能力 对生 长发育无明显影响 治疗指 数为3 8 4 2 用约安全范同较小 水合氯醛镇静作川在临床上应川广泛 本实验 证实其对于小鼠生 长发育未见无明显影响 故可以 确定对于儿童患者用药在生长发育方面是安全的 王玲 高 萍 钔 李记森 等研究证明 儿童用水 合氯醛通过灌肠的途径给药 起效快 应川 于儿科 门诊手术及治疗是一个行之有效的方法 有 临床推 广意义 本实验得山水合氯醛的治疗指数为 3 8 4 2 腹 腔注射安全范围小 水合氯醛小剂量产生镇静作用 较大剂量引起睡眠效应 大于催眠剂量有较好 的抗 惊厥作用 更大剂量导致 昏迷 最终因呼吸中枢 与血 管运动 中枢受严重抑制而致死 跳台和避暗实验 2 j 是目前测量学习记忆能力较 常用的实验方法 参照文献报道 2 o 方法 本实验用 腹腔注射给药的方法 建立动物遗 模型 结果显示 腹腔注射 0 0 0 5 0 0 0 7 5 0 0 1 mL 1 0 g 后 小鼠跳 台和避暗实验出现了潜伏期缩短 错误次数增多等 明显的遗 现象 探究其作川机制 徐叔云 J 认为 水合氯醛镇静 催眠 抗惊厥的作刚原理主要是抑 井冈山大学学报 自然科学版 1 0 1 制脑干 网状结构上行激动系统 本实验证实水合氯 醛对学习记忆短期 内有损害作用 机制可能与此相 关相 关 另外 全身麻醉 药物 的麻醉 作用是对 G AB A 甘氨酸 谷氨酸 乙酰胆碱和 5 一 羟色氨等 神经系统影响的结果 J 一定剂量下的水合氯醛 可能作用于这些神经系统影响学习记忆功能 中枢 神经元烟碱受体对 C a z 通透性约是外周烟碱受体 的 7倍 一旦激动极易引起神经细胞内 C a 积聚 启动兴奋性突触传递l 1 们 水合氯醛可能通过对 C a 的调节来抑制烟碱受体功能 而烟碱受体与脑 内的 去 甲 肾上腺素 乙酰胆碱 多巴胺及 5 一 羟色胺等递 质系统和觉醒状态 的维持有密切关系 对上述系统 递质释放具有促进作用 6 J 具体机制有待进一步 探究 参考文献 1 黄芳 魏翠芬 刘艳 等 bJ D 听诱发电位检查前口服水合 氯醛镇静作用的观察 J 听力学及言语疾病杂志 2 0 0 9 1 7 1 5 1 5 4 2 徐叔云 卞如濂 陈修 药理实验方法学 M 3 版 北京 人 民卫生 出版社 2 0 0 2 8 2 6 8 3 0 3 王玲 胡素君 不同途径水合氯醛给药对新生儿彩超检 查 前镇静作用 的探讨 中国实用医药 J 2 0 0 8 3 1 5 l 1 5 1 1 6 4 高书萍 刘庆利 水合氯醛不同给药途径对不同年龄组 忠 儿 镇 静 效 果 的 对 比 研 究 J 护 理 实 践 与 研 究 2 0 0 6 3 4 4 1 4 2 5 李记森 王智亮 王少华 等 水合氯醛灌肠在儿科门诊手 术及治疗中的应用 J 中国实用医药 2 0 0 8 3 7 9 9 6 戴体俊 叶妙 傅英 注射挥发性麻醉药对动物的效应 J 临床麻醉学杂志 1 9 9 7 1 3 2 6 2 2 6 3 7 徐叔云中华临床药物学 M 北京 人民卫生出版社 2 00 3 5 79 8 Mi l u t i n o v i c P S Y a n g L C a n t o r R S e t a l l An e s t h e t i c l i k e mo d u l ati o n o f a g a mma a mi n o b u t y r i c 9 1 0 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 a c i d t y p e A s t r y c h n i n e s e n s i t i v e g l y c i n e a n d N me t h y l D a s p a r t a t e r e c e p t o r s b y c o r e l e a s e d n e u r o t r a n s mi t t e r s J An e s t h a n a l g 2 0 0 7 1 0 5 3 8 6 3 9 2 W h i t t i n g t o n R A Vi r a g L1 I s o fl u r a n e d e c r e a s e s e x t r a c e l l u l a r s e r o t o n i n i n t h e mo u s e h i p p o c a m p u s J An e s t h An a l g 2 0 0 6 1 0 3 9 2 9 8 葛 源 戴体俊 曾因明 等 侧脑室注射烟碱对小鼠异氟 烷七氟烷亚麻醉下遗忘作用的影响 J 中国药理学通 报 2 0 0 8 2 4 4 4 8 2 4 8 5 Ba tik J Wo l ma c o t S I n d i r e c t mo d u l a t i o n b y 7 n i c o t i n i c a c e t y l c h o l i n e e c e p t o r s o f n o r a d r e n a l i n e r e l e a s e i n r a t h i p p o c a mp a l s l i c e s i n t e r a c t i o n wi t h g l u t a ma t e a n d G AB A s y s t e ms a n d e ff e c t o f nic o t i n e wi t h d r a w a l J Mo l P h a r ma c o l 2 0 0 6 6 9 2 6 1 8 6 2 8 P a r o d i M Pa t t i L Gr i l l i M e t a 1 Ni c o t i n eh a s ap e r mi s s i v e r o l e o n t h e a c t i v a t i o n o f me t a b o t r o p i c g l u t a ma t e 5 r e c e p t o r s c o e x i s t i n g wi t h n i c o t i n i c r e c e p t o r s o n r a t h i p p o c a mp a l n o r a d r e n e r g i c n e r v e t e r mi n a l s J Ne u r o C h e m I n t 2 0 0 6 4 8 2 1 3 8 1 4 3 Ca bY J S u r o wy C S P u t t f a r c k e n P S Di ff e r e n t nic o t i nic a c e t y l c h o l i n e r e c e p t o r s u b t yp e s me d i a t i n g s t r i a t a l a n d p r e f r o n tal c o r t i c a l 3 H d o p a mi n e r e l e a s e J Ne u r o P h a r ma c o l 2 0 0 5 4 8 1 7 2 7 9 M a Z S e c k e r R E M c Ke n n a J e t a 1 Eff e c t s o n s e r o t o n i n o f 一 nic o t i n e a n d di me t h y l p h e n y l p i p e r a z i n i u m i n t h e d o r s a l r a p h e a n d n u c l e u s a c c u mb e n s o f f r e e l y b e h a v i n g r a t s J N e u r o s c i e n c e 2 0 0 5 1 3 5 3 9 4 9 9 5 8 Fe u e r s t e i n T J Ke t a mi n e i n h i b i t s N me t h y l D a s p a r t a t e N MDA r e