江苏省洪泽外国语中学高二生物复习资料 专题5 课题1 DNA的粗提取与鉴定学案 新人教版.doc

江苏省洪泽外国语中学高二生物复习资料 专题5 课题1 dna的粗提取与鉴定学案 考试说明解读：1.本课题通过尝试对植物或动物组织中的dna进行粗提取，了解dna的物理化学性质，理解dna粗提取以及dna鉴定的原理。教学重点：1.dna的粗提取和鉴定方法。教学难点：1.dna的粗提取和鉴定方法。课前预习：1提取dna的方法提取生物大分子的基本思路是 。对于dna的粗提取而言，就是要利用dna与 、 、 等在物理和化学性质方面的差异，提取dna，去除其他成分。2、实验原理：（1）dna的溶解性：思考题1：dna在氯化钠溶液中的溶解度有什么特点？对此有什么应用？ 思考题2：利用什么原理来将dna与蛋白质分离开？ （2）dna对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解 ，但对 没有影响。大多数蛋白质不能忍受 的高温，而dna在 以上才会变性。 能够瓦解细胞膜，但对dna没有影响。（3）细胞在 中易吸水而导致细胞膜和细胞核膜的破裂，据此可得到含有核dna的溶液。（4）dna的鉴定：思考题3：依据什么原理来鉴定dna？ 实验设计：（一）、实验材料：鸡血细胞液思考题4：生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，他们能否选用牛、羊、马血做实验材料？为什么？ （二）、实验步骤：1制备鸡血细胞液：在鸡血中加入质量浓度为01g/ml的 溶液，离心处理；2提取鸡血细胞的细胞核物质：向鸡血细胞液中加入蒸馏水，搅拌、过滤；思考题5：加入蒸馏水的目的是什么？为什么能达到此目的？ 3溶解细胞核内的dna：加入2mol/l的氯化钠溶液，搅拌，使dna呈溶解状态；4析出含dna的黏稠物：加入蒸馏水，用玻璃棒搅拌；思考题6：此时加入蒸馏水的目的是什么？ 5滤取含dna的黏稠物：过滤；思考题7：这次过滤与上次过滤的目的一样吗？为什么？ 6将dna的黏稠物再溶解：加入2mol/l的氯化钠溶液，搅拌，使dna呈溶解状态；7过滤含有dna的氯化钠溶液：过滤；思考题8：这一步骤的目的是什么？ 思考题9：为什么反复地溶解与析出dna，能够去除杂质？8提取含杂质较少的dna：加入冷却的95%的酒精，搅拌；思考题10：这一步骤的目的是什么？ 思考题11：为什么加入的酒精需要冷却的？ 9dna的鉴定：取两支识管，各加入0015mol/l的氯化钠溶液5ml，一支加入提取的dna，两支各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后置于沸水中加热。思考题12：为什么要设置对照组？实验中能观察到什么现象？ 典型例题：1. 本实验中有三次过滤：过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液 过滤含粘稠物的0.14mol/lnacl溶液 过滤溶解有dna的2mol/lnacl溶液以上三次过滤分别为了获得 （ ）a.含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含dna的滤液b.含核物质的滤液、滤液中dna粘稠物、含dna的滤液c.含核物质的滤液、滤液中dna粘稠物、纱布上的dnad.含较纯的dna滤液、纱布上的粘稠物、含dna的滤液2下列有关“dna粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的是 （ ）adna在nacl溶液中的溶解度，随nacl溶液浓度的降低而减小b利用dna不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的dnacdna是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂d在沸水中，dna遇二苯胺会出现紫色反应当堂巩固：3下列dna粗提取的实验操作中，经离心或过滤后取上清液或滤液的有（多选）（ ）a在新鲜鸡血中加入适量的柠檬酸钠，混合均匀后离心b在盛有血细胞的塑料烧杯中加蒸馏水，快速搅拌后过滤c在2moll的氯化钠溶液中放入丝状物，轻轻搅拌后过滤 d在溶有dna的氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水，轻轻搅拌后过滤4（多选）下表是关于dna粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述正确的是： （ ）识剂操作作用a柠檬酸钠溶液与鸡血混合防止血液凝固b蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状c蒸馏水加入到溶解有dna的nacl中析出dna丝状物d冷却的酒精加入到过滤后dna的nacl中产生特定的颜色反应课后训练：1下列不适宜作为dna提取的实验材料是 （ ） a鸡血细胞 b蛙的红细胞 c人的成熟红细胞 d菜花2.在利用洋葱进行dna粗提取的实验中，加入洗涤剂和食盐的作用分别是 ( )a.破坏细胞壁；溶解dna b.破坏细胞膜；溶解dnac.破坏细胞壁；溶解蛋白质 d.破坏细胞膜；溶解蛋白质3用过滤的方法得到细胞中的氯化钠溶液后，还要用酒精处理，可以得到较纯化的dna因为： ( )adna易溶于酒精，而滤液中某些杂质不易溶于酒精bdna不易溶于酒精，而滤液中某些杂质易溶于酒精cdna和滤液中其他成分更易溶于酒精ddna和滤液中其他成分都不溶于酒精4.下图为“dna粗提取和鉴定”实验的相关操作。这些操作目的正确的是 （ ）a.是洗涤红细胞，去除血细胞表面的杂质b.是溶解dna，去除不溶于酒精的杂质c.溶解dna，去除不溶于2mol/lnacl溶液的杂质d.稀释nacl溶液，去除不溶于低浓度nacl溶液的杂质5.以血液为实验材料时，为防止血液凝固需要向血液中加入 （ ） a.醋酸钠 b.龙胆紫 c.柠檬酸钠 d.醋酸洋红6.向溶有dna的2mol/l的nacl溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程dna和杂质蛋白质溶解度变化情况分别是 ( ) a减小；减小 b增大；增大 c先减小后增大；增大 d减小；增大7玻璃棒搅拌出的较纯净的dna的颜色以及dna遇二苯胺(沸水浴)染上的颜色分别( ) a黄色、紫色 b白色、砖红色 c白色、蓝色 d蓝色、砖红色8.在研究dna的基因样本前，采集来的血样需要蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是 （ ） a.除去血浆中的蛋白质 b.除去染色体上的蛋白质 c.除去血细胞表面的蛋白质 d.除去血细胞中的所有的蛋白质，使dna释放，便于进一步提纯9与析出dna粘稠物有关的叙述，不正确的是 （ ） a.操作时缓缓滴加蒸馏水，降低dna的溶解度 b.在操作时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证dna分子完整 c.加蒸馏水可同时降低dna和蛋白质的溶解度，两者均可析出 d.当丝状粘稠物不再增加时，此时nacl的浓度相当于0.14mol/l10在dna提取过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是 （ ） a.不易破碎 b.减少提取过程中dna的损失 c.增加dna的含量 d.容易洗刷11dna的粗提取中，将与滤液体积相等的、冷却的（ ），静置23min，溶液中会出现白色丝状物。 （ ） a.09%的nacl b.0.14mol/l的nacl溶液 c.质量分数15%的hcl d.体积分数为95%的酒精溶液12.去除dna滤液中的杂质时，可直接在滤液中加入 （ ），反应1015min（ ）a.嫩肉粉 b.蒸馏水 c.2mol/lnacl d.酒精13.下列关于dna粗提取与鉴定的说法正确的是 ( )a.析出dna时要缓慢地加蒸馏水，当析出黏稠物时即不再加水b.在探究洗涤剂对植物细胞dna提取的影响实验中，自变量是洗涤剂和食盐c.提取的dna溶解后加入二苯胺试剂即可染成蓝色d.将含有dna的滤液放在6075的恒温水浴箱中保温后过滤，能去除蛋白质杂质14填写本实验完成下列实验操作时所用试剂。 提取鸡血细胞中核物质 溶解核内dna： 析出2mol/lnacl溶液中的dna dna粘稠物的再溶解 提取杂质较少的dna白色乳状丝状物 dna的鉴定 课前预习：思考题1、dna在氯化钠溶液中的溶解度，随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为014mol/l时，dna的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的dna析出；思考题2、dna不溶于酒精，但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理，可以将dna与蛋白质进一步地分离。思考题3、在沸水浴的条件下，dna遇二苯胺被染成蓝色，所以可用二苯胺作鉴定。思考题4、不能。因为哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，仅靠白细胞和淋巴细胞中的少数dna，在实验中很难提取到。思考题5、加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出dna；蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂。思考题6、使氯化钠溶液浓度接近014mol/l，使dna最大限度地析出。思考题7、不一样；这次过滤是为了去除溶于氯化钠溶液的杂质，而上次过滤是为了去除破裂的细胞膜等物质。思考题8、除去含有dna滤液中的杂质；思考题9、用高盐浓度的溶液溶解dna，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使dna析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出dna，就能够除去与dna溶解度不同的多种杂质。思考题10、去除溶于酒精的杂质；思考题11、可抑