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文档简介
第一节 微生物的培养和应用第1课时 培养基的配制与无菌操作和接种技术(时间:30分钟满分:50分)考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难微生物培养基的配制268无菌操作和接种技术1、4、5综合考查3、7一、选择题(共5小题,每小题4分,共20分)1细菌培养基常在121 压力锅中灭菌。如果只是在100 温度下将细菌培养基灭菌,下列生物仍会存活的是 ()。a大肠杆菌 b一种青霉菌c枯草芽孢杆菌 d沙门氏菌解析芽孢是为了抵御外界不良环境而形成的一种休眠体,100 的温度不能将其杀死。答案c2下列物质中,不能用作酵母菌培养基中碳源的是 ()。a含碳有机物 b蛋白胨c含碳无机物 d花生粉饼等天然物质解析酵母菌是异养型生物,只能利用有机物中的碳。答案c3三个培养皿中分别加入10 ml不同的培养基,然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36 h后,计算菌落数,结果如表所示。下列选项错误的是 ()。培养皿培养基成分菌落数琼脂、葡萄糖35琼脂、葡萄糖、生长因子250琼脂、生长因子0a.该实验采用的是固体培养基b该实验可采用涂抹平板法接种c和对照,说明大肠杆菌的生长不需要生长因子d和对照,说明大肠杆菌的生长需要糖类解析培养基中均加入了琼脂,故为固体培养基;微生物接种的方法很多,最常用的是平板划线法或稀释涂布平板法;组和组存在两个变量,不能说明大肠杆菌的生长是否需要生长因子;组和组对照,自变量是葡萄糖的有无,说明大肠杆菌的生长需要糖类。答案c4下列有关平板划线操作的叙述,不正确的是 ()。a第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物b每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种c在第二次划线时,接种环上的菌种直接来源于菌液d划线结束后,灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者解析接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种;从第二次划线开始,每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端;划线结束仍需灼烧接种环,是避免细菌污染环境和感染操作者。答案c5获得纯净培养物的关键是 ()。a将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌b接种纯种细菌c适宜条件下培养d防止外来杂菌的入侵解析防止外来杂菌的入侵是获得纯净培养物的关键。答案d二、非选择题(共30分)6(10分)如下表所示为某微生物培养基的配方,请回答下面的问题。成分含量nano33 gk2hpo41 gkcl0.5 gmgso47h2o0.5 gfeso40.01 g(ch2o)30 gh2o1 000 ml青霉素0.1万单位(1)依物理性质,该培养基属于_培养基;依用途划分,则属于_培养基。(2)根据培养基原料,所培养微生物的同化作用的类型是_,培养的微生物可能是_。(3)该培养基中的碳源是_。不论何种培养基,在各成分都熔化后分装前,要进行的是_和_,搁置斜面时,一般需冷却至_左右,在_附近操作。解析(1)依物理性质,该培养基中未加凝固剂应属液体培养基;依用途,该培养基中加入了青霉素抑制了许多微生物生长,应属选择培养基。(2)由于该培养基中加入了有机碳源,故所培养的微生物应属异养型。(3)该培养基的碳源是(ch2o);培养基熔化后需调节ph并灭菌;搁置斜面时,应冷却至50 左右,操作应在酒精灯火焰旁进行。答案(1)液体选择(2)异养型真菌(3)(ch2o)调ph灭菌50 酒精灯火焰7(10分)根据所学的微生物知识回答下列相关的问题。(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑_、_和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行_(消毒、灭菌);操作者的双手需进行清洗和_;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能_。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的_。(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_。(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。(6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及培养物必须经过_处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。解析大肠杆菌体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短,常作为遗传学研究的实验材料。微生物培养操作过程中要保证在无菌条件中进行。答案(1)温度酸碱度易培养生活周期短(2)灭菌消毒损伤dna的结构(3)比例合适(4)鉴定(或分类)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生(6)灭菌8(10分)氯苯化合物是重要的有机化工原料,因其不易降解,会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(如图)筛选出能高效降解氯苯的微生物sp1菌,培养基配方如表。(1)配制号固体培养基时,除添加号液体培养基成分外,还应添加1%的_。(2)培养基配制时,灭菌与调ph的先后顺序是_。(3)从用途上来说,号培养基和号培养基分别属于_培养基和_培养基。在号培养基中,为sp1菌提供氮源的成分是_。(4)在营养缺乏或环境恶劣时,sp1的菌体会变成一个圆形的休眠体,这种休眠体被称为_。(5)将sp1菌接种在含不同浓度氯苯的号培养液中培养,得到生长曲线(如图)。从图可知sp1菌在_培养条件下最早停止生长,其原因是_。解析本题主要考查微生物的相关知识。(1)固体培养基必须含有适量的琼脂;(2)配置培养基时应先调ph后灭菌;(3)号培养基是为了获得更多的菌株,属于基础培养基,号培养基是为选择出sp1菌株,属于选择培养基,号培养基成分中含n物质为硝酸铵,则应由它为sp1菌株提供氮源;(4)在恶劣环境下一
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