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文档简介
江苏省盐城市时杨中学2012-2013学年高二下学期生物dna的粗提取与鉴定导学案 人教版编制:沈粉华 审核: 批准: 【学习目标】1.简述dna粗提取与鉴定的基本方法和原理。2.概述dna提取中去除杂质的方法和原理。3、尝试对植物和动物组织中的dna就行粗提取,并进行鉴定。【问题情境】1、dna的鉴定原理?2、dna粗提取实验材料选取的原则?3、破碎鸡血细胞,获取含dna的滤液为什么加蒸馏水?4、破碎植物细胞加洗涤剂和食盐的作用分别是什么?5、为什么反复地溶解和析出dna,能够去除杂质?6、dna析出方法?【我的疑问】备 注 第1页共4页 【自主探究】(一)dna粗提取的原理1dna的溶解性 dna在不同浓度 溶液中溶解度不同;dna不溶于 。2将dna和蛋白质进一步分离。蛋白酶水解 而不会对dna产生影响。温度值为 ,蛋白质变性沉淀,而dna不会变性。洗涤剂将细胞膜上的 ,从而瓦解细胞膜。(二)实验设计1实验材料2破碎细胞,获取含dna的滤液如是洋葱,加入一定量 溶解细胞膜;加入一定量的食盐,溶解dna物质。3去除滤液中的杂质方案一的原理是 ;方案二的原理是 ;方案三的原理是 。4dna析出与鉴定(三)实验操作制备鸡血细胞液加 ,静置或离心破碎细胞,释放dna 加 ,同一方向快速通方向搅拌过滤,除去细胞壁、细胞膜等。溶解核内dna 加入nacl至 ,同一方向缓慢搅拌dna析出加蒸馏水至 ,过滤,在溶解到2mol/l溶液中除去细胞质中的大部分物质。dna初步纯化 与等体积 混合,析出白色丝状物除去核蛋白、rna、多糖等。dna鉴定 ,沸水浴,呈现蓝色备 注第2页共4页 【课堂检测】()1. 在dna分子的粗提取实验中,两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是a.稀释血液、冲洗样品b.使血细胞破裂,降低nacl浓度使dna析出c.使血细胞破裂,增大dna溶解度d.使血细胞破裂,提取含杂质较少的dna( )2(多选)与析出dna粘稠物有关的叙述,正确的是 a.操作时缓缓滴加蒸馏水,降低dna的溶解度 b.在操作a时,用玻璃棒轻缓搅拌(可以加速细胞的破裂),以保证dna分子完整 c.加蒸馏水可同时降低dna和蛋白质的溶解度,两者均可析出 d.当丝状粘稠物不再增加时,此时nacl的浓度相当于0.14mol/l( )3(多选)关于dna的粗提取与鉴定实验的表达哪项是正确的a. 离心后除去血液中的上清液是为了除去杂质b. 离心沉淀的血细胞中加水是为了提取dna c.向溶解的dna烧杯中加蒸馏水是漂洗dnad. nacl溶液的物质的量浓度为2mol/l时,dna溶解4dna在nacl溶液中溶解度有二重性,随着nacl溶液的变化而变化。(1)请在下列nacl溶液中选出溶解度能使dna析出最彻底的一种( )和溶解度最高的一种( )a. 0.14mol/l b. 2mol/l c. 0.15mol/l d. 0.3mol/l(2)dna不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液,利用这一原理可以_,可以推测溶于酒精中的物质可能有_。(3)利用dna与_ _变蓝色的特性,将该物质作为鉴定_ _的试剂。其实验过程要点是向放有_的试管中加热4ml的_ _。混合均匀后,将试管置于_ 5min,待试管_ _,观察试管中溶液颜色的变化,这个实验也说明dna耐_ _温。【回标反馈】备 注 第3页共4页 【巩固练习】()1.洗涤剂能够瓦解 ,但对dna没有影响。a.细胞壁 b.细胞膜 c.细胞核 d.细胞质()2在沸水浴的条件下,dna遇 会被染成蓝色。a.斐林试剂 b.苏丹染液 c.双缩脲试剂 d.二苯胺( )3在dna提取过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是a.不易破碎 b.减少提取过程中dna的损失 c.增加dna的含量 d.容易洗刷( )4下列操作中,对dna的提取量影响最小的是a.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,放出dna等核物质b.搅拌时,要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌c.在“析出dna粘稠物”时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中粘稠物不再增加d.在用酒精沉淀dna时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却e在dna的溶解和再溶解时,要充分搅拌( )5dna的粗提取中,将与滤液体积相等的、冷却的 ,静置23min,溶液中会出现白色丝状物。a.09%的nacl b.0.14mol/l的nacl溶液 c.质量分数15%的hcl d.体积分数为95%的酒精溶液( )6.以血液为实验材料时,需要向血液中加入 ,防止血液凝固。a.醋酸钠 b.龙胆紫 c.柠檬酸钠 d.醋酸洋红( )7.在向溶解dna的nacl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是( )a.加快溶解dna的速度 b. 减少dna的溶解度,加快dna析出c. 加快溶解杂质的速度 d.减小杂质的溶解度,加快杂质的析出( )8.去除滤液中的杂质时,直接在滤液中加入嫩肉粉,利用嫩肉粉中的 分解蛋白质。a.胃蛋白酶 b.胰蛋白酶 c.木瓜蛋白酶 d.肠肽酶9.(多选)关于dna在nacl溶液中的溶解度,下面的叙述哪一个是错误的 a.随着nacl溶液浓度增大,dna在nacl溶液中的溶解度也增大 b.随着nacl溶液浓度的减小,dna在nacl溶液中的溶解度也减小 c.dna在nacl溶液中的溶解度与nacl溶液的浓度无关 d.当nacl溶液的浓度为0.14mol/l时,dn
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