心肌标志物肌钙蛋白的检测方法.docx

心肌标志物肌钙蛋白的检测方法1 检验目的规范检测“肌钙蛋白I（CTNI）”的过程。2 适用范围适用于正常人和病人血清“肌钙蛋白I（CTNI）”的测定。3 职责：3.1 责任人：生化室当班工作人员。 3.2 质量要求：按照临床化检验室内质量控制作业指导书进行室内质控，合格后可发报告。3.3 完成时间：门诊检验结果当天下午2:30发报告；病房检验结果当天下午4:00发报告。4 检验原理本法采用固相层析免疫分析技术定性检测人血标本中的肌钙蛋白I。首先将血标本加到样品孔中，其中的肌钙蛋白I 即与抗体-染料结合物结合，移动到测定区。由于测定区中含固化抗体，抗原-抗体-染料复合物与固化的抗体相结合，未结合的染料复合物移出测定区外，其中有一些在对照区被捕获。如标本中的肌钙蛋白I 含量大于设定的临界值，即在测定区和对照区出现肉眼可见的紫红色水平带，表示结果阳性；如果只在对照区出现色带，表示结果阴性，即肌钙蛋白I 的含量小于临界值；若对照区无色带出现，不管测定区有无色带，结果无效，需重新测定。5 样本要求：5.1 样本类型样本量:空腹取静脉血3ml(血清或肝素抗凝血浆),按顺序将申请单和样本一一对应编号。认真检查检验材料、检验目的、病人姓名、性别、科室、床号、血液量等。5.2 容器和抗凝剂种类: 黄色胶头试管，含促凝剂；红色胶头普通生化管；肝素钠、肝素锂抗凝试管。5.3 样本处理方法将已编号的样本放入37的水温箱中，待血液自动凝固后，取出配平离心，3000r/min5min。将血清分离放入DADE BEHRING RXL专用样本杯后，仔细观察是否符合要求，否则申请重新采集样本; 上雅培AEROSET全自动生化分析仪直接将试管放入样本架上。 5.4 样本的稳定性:血清、血浆 在20-25放置可保存1天，2-8贮存最多7天；冷冻保存可超过1个月。已检测标本28保存3天。6 仪器：无需仪器7 试剂:包被有肌钙蛋白I 多克隆抗体膜条，浸渗有抗肌钙蛋白I 单抗的染料垫，以及用于调整抗原抗体在蛋白质基上活性的过滤垫。每个试盘封装在干燥袋中。8 校准：无需校准。9 程序步骤9.1 样本编号样本分离检验仪器准备、试剂准备室内质控测定、样本测定、资料录入分析室内质控、分析测定结果打印报告单结果审核签发 9.2 操作步骤9.2.1 取出肌钙蛋白I试剂： 试剂盒贮存于冰箱内，则试验前应放于室温下，准备试验时方可打开箔袋。9.2 .2 用滴管垂直滴入3滴血清或标本（约120UL）于试剂盒样本孔，开始计时。9.2.3 等待紫红色条带出现，测试结果应在10-20分钟读取，20分钟后读取的结果无效。9.2.4 阳性：出现两条色带，一条在测定区(T)，另一条在对照区(C)，表示结果阳性。一旦在测定区出现紫红色色带，就可读取结果。心肌钙蛋白I 试剂盒有一个最小的前区效应。因此，一个含有高浓度的心肌钙蛋白I浓度的样品产生的信号可能比预期稍弱，但也能产生一个阳性结果。9.3 阴性：对照区(C)中出现色带，测定区(T)中除了正常的背景颜色外无明显色带出现，表示标本中的肌钙蛋白I 含量低于设定的临界值。9.4 无效：若对照区在15 分钟内无色带出现，实验无效，应重新测定。10 质量控物：暂无。11 结果计算：无需计算。12 生物参考区间：阴性13 可报告区间:阴性、阳性14 危急值：阳性15 性能参数15.1 试剂盒测得正常值的上限为1ng/ml。本品设计阳性结果为肌钙蛋白I1ng/ml。一般在症状出现后3-10 小时血中含量达到正常值上限，10-24 小时到最大值。某些病人其含量升高可保持6-10 天。因此症状开始出现的前几小时测定结果为阴性并不能排除急性心肌梗塞的可能。若怀疑为心肌梗塞，在适当间隔时间后重复测定。肌钙蛋白I 水平的测定已经显示出在某些临床情况下，如术后出现AMI、外伤后、肾衰病人、骨骼肌病和癫痫病发作等有助于帮助诊断。15.2 实验的干扰因素下述干扰物质在此浓度以下时不影响肌钙蛋白I 的测定。生物素200ng/ml胆红素无干扰血红蛋白200ng/ml16 注意事项：16.1 体外诊断。16.2 过期产品。16.3 有叠氮钠，可和管中的铅、铜形成高爆炸性的金属叠氮物，如果放入排水管中应用大量水冲洗。16.4 品应用清洁的滴管头，不能用吸嘴。16.5 的手套取样品，工作后充分洗手。16.6 播疾病，所有病人的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。16.7 该试验装置密封保存。16.8 全注意16.8.1 此试剂为体外诊断用，不要吞服。16.8.2 避免与皮肤粘膜接触。接触到眼睛或吞服，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟，并立即寻找医疗保护。17 临床意义17.1 急性心肌梗塞：发病后3-6小时，cTnI常超过参考值上限，达峰值时间为14-20小时，恢复到正常时间为5-7日，其灵敏度为6-44%，特异性为93-99%，故较LD1/LD2比值更敏感。17.2 不稳定型心绞痛：cTnI也