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分子生物学技术论文参考 随着医学的不断发展生物学也不断在创新其中现代分子生物学技术起到关键作用下面小编整理了分子生物学技术论文欢迎阅读 农产品安全检测中的分子生物学技术 【摘要】本文主要介绍了酶联免疫分析技术、聚合酶链式反应技术、试纸条快速检测技术、流动注射免疫分析技术等分子生物学检测技术的原理、开发及其在农产品中有毒有害物质检测中的应用 【关键词】农产品;有毒有害物质;分子生物学;检测技术 0前言 民以食为天食以安为先农产品安全性要求农产品中不应含有可能损害或威胁人体的物质或因素它关系到人体健康和社会稳定随着世界经济全球化、贸易自由化和农产品国际贸易的迅速发展农产品安全已成为事关人民健康和构建和谐社会的重大战略问题及时、安全、准确地检测出农产品中的病原微生物是农产品安全检测的重要内容随着农产品分析物质的不断微量和痕量化农产品基质的不断复杂仅使用传统分析技术已难以解决所有的问题分子生物学技术不仅可以简化前处理过程、而且操作简便、检测成本低、安全可靠且能进行特异性处理分析其在农产品分析中占据越来越高的比例1目前在农产品检测中常用的技术包括：酶联免疫分析技术(ELISA)、基因芯片技术、分子印迹技术、聚合酶链式反应(PCR)技术、试纸条快速检测技术、流动注射免疫分析技术、生物传感器技术(biosensor)等分子生物学技术解决了传统农产品前处理所不能解决的问题特别是在农产品中有毒有害物质检测中发挥了重要的作用 1应用于农产品安全检测中的分子生物学技术 1.1酶联免疫分析技术 酶联免疫分析技术是20世纪70年代初期由荷兰学者Weeman与Schurrs和瑞典学者Engvall与Perlman几乎同时提出的最初ELISA主要用于病毒和细菌的检测20世纪70年代后期开始广泛应用于抗原、抗体的测定范围涉及到一些药物、激素、毒素等半抗原分子的定性定量检测它是在RIA理论的基础上发展起来的一种非放射性标记免疫分析技术它利用酶标记物同抗原抗体复合物的免疫反应与酶的催化放大作用相结合既保持了酶催化反应的敏感性又保持了抗原抗体反应的特异性极大的提高了灵敏度且克服了RIA操作过程中放射性同位素对人体的伤害酶联免疫分析法在农产品安全检测中最为常用2农兽药残留免疫分析方法的建立包括待测物选择、半抗原合成、人工抗原合成、抗体制备、测定方法建立、样本前处理方法和方法评价等步骤ELISA具有样品前处理简单纯化步骤少大量样本分析时间短适合于做成试剂盒现场筛选等优点使其可试验快速现场监测是现阶段农产品安全检测领域应用较多的一项检测技术目前酶联免疫检测的农、兽药残留种类主要包括：有机磷农药、拟除虫菊酯类农药、有机氯类农药、氨基甲酸酯类、兽药类等 1.2PCR技术(聚合酶链式反应技术) 该技术诞生于1985年由美国Cetus公司和加州大学联合创建PCR技术利用变性与复性原理在体外使用DNA聚合酶在引物的引导和脱氧核糖核苷酸(dNTP)的参与下将模板在数小时内进行百万倍扩增该技术可选择性地放大特定的DNA序列因此在农产品致病性微生物检测方面发挥着越来越重要的作用3实时定量PCR技术是近年发展起来的新型技术该技术通过直接测定PCR过程中荧光信号的变化利用电脑分析软件对PCR过程中产生的扩增产物进行动态监测和自动定量从而成功地实现了PCR从定性到定量的飞跃而且使用实时定量PCR技术不需要进行凝胶电泳避免了交叉污染使反应具有更强的特异性和更高的自动化程度随着分子生物学技术的不断发展多重PCR4、标记PCR和不对称PCR等多种不同的PCR方法都被应用于农产品检测中它们的应用使PCR技术拥有了更高的灵敏度和更短的周期5 1.3试纸条快速检测技术 试纸条与试剂盒相比较具有更加易于携带、检测更加迅速等优势在实际检测过程中特别是现场快速检测并不一定需要对每个样品都获得定量数据而只需要定性地判别出某个样品是否含有某种农兽药含量是否超过规定标准既可6因此只需要几分钟或十几分钟就可以获得结果的快速检测试纸条是最为合适的检测工具7试纸条技术与试剂盒相类似其特点是以微孔膜作为固相载体标记物可用酶或各种有色微粒子如彩色乳胶、胶体金、胶体硒等以红色的胶体金最为常用固相膜的特点在于其类似滤纸的多孔性液体可穿过固相膜流出也可以通过毛细管层析作用在膜上向前移行常用的固相载体膜为硝酸纤维素膜、尼龙膜等试纸条技术主要包括酶标记免疫检测技术(immunoenzymelabelingtechnique)和胶体金标记免疫检测技术(immunogoldlabellingtechnique)酶标记免疫检测技术是以酶为示踪标记物而胶体金标记免疫检测技术是以胶体金作为示踪标记物应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术 1.4流动注射免疫分析技术 流动注射免疫分析法是将速度快、自动化程度高、重现性好的流动注射分析与特异性强、灵敏度高的免疫分析集为一体这种分析方法具有分析时间短、需要样品量小和操作简便等特点8利用FIIA对一些样品分析测定耗时不足1minFIIA有：均相FIIA和非均相FIIA流动注射免疫分析主要包括：流动注射脂质体免疫分析技术、流动注射荧光检测、流动注射化学发光检测、流动注射分光光度检测和流动注射电化学检测利用FIIA是一种灵敏性、专一性、准确性好、快速、节约成本的方法样品也不需要预处理和富集 2结语 随着经济的全球化发展和农产品的跨区域、跨国际流通对农产品病原菌的检测要求也越来越高从定性和定量两方面出发准确、快速、经济的检测方法是农产品安全检测的发展方向尽管分子生物学检测方法具有诸多优点但目前它们大多处于实验室阶段不能广泛应用于实践仅能作为标准检测方法的参考因此在今后的工作中应进一步加快研究步伐建立真正实用的农产品快速检测方法产品快速检测方法 【参考文献】 1杨大进.改革开放30年食品理化检测方法的发展J.中国食品卫生杂志21(4)：309312. 2尤敏霞.酶联免疫吸附法在食品检验中的应用J.河南预防医学杂志20(3)：237238240. 3周晓红李晖杨杏芬.食品中诺如病毒RTPCR检测技术研究进展J.国外医学卫生学分册36(4)：234238. 4宋岱松.多重PCR技术在食品安全检测中的应用J.山东畜牧兽医30(5)：5758. 5雷永良王晓光叶碧峰梅建华柳付明陈莎彬兰进权李永芬陈秀英.实时荧光定量技术在食品污染物监测中的应用J.中国卫生检验杂志19(4)：828830857. 6黄小燕梁珠娴李繁鲁玉花.盐酸克伦