贵州省遵义航天高中2014-2015学年高二(下)第一次月考生物试卷 (Wo.doc

2014-2015学年贵州省遵义航天高中高二（下）第一次月考生物试卷一、单项选择题（每小题6分，共78分）1（6分）（2015春遵义月考）下列说法中，正确的是（）A真核和原核的目的基因均可从基因文库中获取BDNA连接酶都是从原核生物中分离得到的C大多数限制酶识别的核苷酸序列由6个核糖核苷酸组成D人工合成法可合成已知序列任意大小的DNA片段2（6分）（2015春遵义月考）基因工程是在DNA分子水平进行设计施工的，在基因操作的以下步骤中，不进行碱基互补配对的是（）人工合成目的基因EcoliDNA连接酶结合目的基因与运载体将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和表达个体生物学水平的鉴定ABCD3（6分）（2015春遵义月考）广西大学动物科学院培育出转基因动物带有巴马香猪长肉基因的小白鼠他们将长肉基因与含有绿色荧光蛋白基因片段整合植入5只公鼠的睾丸中，这些公鼠与8只母鼠交配后，产下60只小白鼠，科研人员采集小白鼠的细胞在荧光显微镜下检测发现，在23只小白鼠的细胞中观测到绿色荧光，37只不含转基因成分以下相关说法，你认为正确的是（）A所需的基因操作工具有限制性内切酶、DNA连接酶和动物病毒B长肉基因是标记基因，绿色荧光蛋白的基因是目的基因C运用的生物技术有基因工程、细胞工程和DNA重组技术D据此分析可知长肉基因在小白鼠细胞中正常表达4（6分）（2015春遵义月考）下表为动植物细胞工程的有关内容比较，你认为错误的是（）项目植物细胞工程动物细胞工程特殊处理机械法去除细胞壁胰蛋白酶处理制细胞悬液法融合方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、生物方法典型应用人工种子、杂种细胞单克隆抗体的制备培养基区别含有生长素和细胞分裂素动物血液不可缺少A0处B1处C2处D3处5（6分）（2014秋东城区期末）将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类的某些癌细胞，其过程如图所示下列相关叙述不正确的是（）A过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同B经形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体C过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞D抗体的靶向作用使过程具有高度特异性6（6分）（2009浦东新区一模）在下列选项中，不需要采用植物组织培养技术的是（）A利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株B利用细胞工程技术培养“番茄一马铃薯”杂种植株C利用花药离体培养得到单倍体植株D利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到染色体数目加倍的植株二、非选择题：7（11分）（2015春遵义月考）实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定甲、乙两种化学物质毒性，并比较二者毒性的强弱请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列实验报告并回答有关问题实验原理：有毒物质能诱导细胞产生变异，根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性实验材料：活的小白鼠胚胎药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片实验步骤：（1）制备细胞悬浮液：把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入处理，使胚胎组织分散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液（2）进行细胞培养：取A、B、C三个洁净的培养瓶，加入等量的细胞悬浮液向A培养瓶中加入化学物质甲，向B培养瓶中加入，向C瓶内加入等量的生理盐水，并将培养瓶摇匀在实验中，C培养瓶起什么作用？（3）制作临时装片：当细胞增殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞，再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，用染色，35min后，盖上盖玻片（4）镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于期的细胞，并与C组对比以确认发生变异的细胞，同时统计（5）结果与结论：经研究人员实验得知：A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%、QB=12.5%、QC=0.1%，由此可知该实验的结论是8（11分）（2015春遵义月考）科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，番茄耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长质粒上有Pst、Sma、Hind、Alu等四种限制酶切割位点下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，、表示相关结构或细胞，请据图作答（1）图中涉及的技术有：（答出两点）（2）在构建基因表达载体时，可用一种或多种限制酶进行切割为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用，分别对目的基因和质粒进行切割，切割后产生的DNA片段分别为、种（3）图中I ampr基因的目的是，除了ampr、鱼的抗冻蛋白基因以外，还应具有的结构是、（4）研究人员通常采用法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内通常采用技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质9（11分）（2015春遵义月考）据近日每日科学网站报道，英国牛津大学科学家最近发现了一种“改造”病毒的新方式，可按需要剔除病毒的关键毒性，并保持其复制能力，使其成为杀死癌细胞却不伤害健康细胞的“安全卫士”这将为癌症治疗的改进提供新的平台，也将为新一代抗病毒疫苗的研制奠定良好基础已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如图：（1）过程可以通过技术大量扩增A基因，该技术的原理是（2）过程构建A基因重组载体时，必须使用限制酶和两种工具酶（3）若受体细胞为动物细胞，过程常用的方法是，A蛋白属于性物质（4）过程运用了技术，该过程技术的原理是（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的所制备的疫苗对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行比较；或用图中的进行特异性结合检测10（11分）（2015春遵义月考）天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精请回答下列问题：（1）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是，该项方法要用作探针进行检测（2）采用PCR技术可对目的基因进行体外扩增该反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核苷酸、引物、和假如引物都用3H标记，从理论上计算循环4次，所得DNA分子中含有3H标记的DNA占（3）已知BamH与Bgl的识别序列及切割位点如图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH和Bgl识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后序列明显增多（4）基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质，却能生产自然界不存在的新的蛋白质，但最终还须通过改造基因来实现，原因是11（10分）（2015春遵义月考）现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质（1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养然后再从培养细胞中取出注入B品种牛的卵母细胞（2）对重组细胞经过某处刺激和培养后，可形成胚胎，在培养过程中，配制的培养液通常加入等天然成分，提供O2和CO2的作用分别是和（3）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量不足，为解决这一问题，可以从屠宰场收集，并从中获得卵母细胞（4）克隆牛的产生说明具有全能性克隆牛的性状主要表现品种牛的特征由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自个亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成（相同，不同）2014-2015学年贵州省遵义航天高中高二（下）第一次月考生物试卷参考答案与试题解析一、单项选择题（每小题6分，共78分）1（6分）（2015春遵义月考）下列说法中，正确的是（）A真核和原核的目的基因均可从基因文库中获取BDNA连接酶都是从原核生物中分离得到的C大多数限制酶识别的核苷酸序列由6个核糖核苷酸组成D人工合成法可合成已知序列任意大小的DNA片段考点：基因工程的原理及技术版权所有分析：获取目的基因的方法主要有两种：（1）从供体细胞的DNA中直接分离基因，最常用的方法是“鸟枪法”又叫“散弹射击法“；（2）人工合成基因，这种方法有两条途径，一是以目的基因转录的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，再在酶的作用下合成双链DNA，即目的基因；另一条途径是蛋白质的氨基酸序列，推测出信使RNA序列，再推测出结构基因的核苷酸序列，然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成解答：解：A、真核和原核的目的基因均可从基因文库中获取，A正确；B、T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，噬菌体是一种病毒，B错误；C、大多数限制酶识别的核苷酸序列由6个脱氧核糖核苷酸组成，C错误；D、当基因比较小，核苷酸序列又已知的情况下，适用于用人工合成法合成，D错误故选：A点评：本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记原核细胞基因和真核细胞基因结构的异同；识记基因工程的操作步骤，掌握目的基因的获取方法，能运用所学的知识准确判断各选项2（6分）（2015春遵义月考）基因工程是在DNA分子水平进行设计施工的，在基因操作的以下步骤中，不进行碱基互补配对的是（）人工合成目的基因EcoliDNA连接酶结合目的基因与运载体将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和表达个体生物学水平的鉴定ABCD考点：基因工程的原理及技术版权所有分析：基因工程的基本操作步骤主要包括四步：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定其中人工合成目的基因、基因表达载体的构建、目的基因的检测都进行碱基互补配对原则解答：解：人工合成目的基因的方法是逆转录法，需要进行碱基互补配对，正确；目的基因与运载体结合时，进行碱基互补配对，正确；将目的基因导入受体细胞，不进行碱基互补配对，错误；检测目的基因时需要用到基因探针，进行碱基互补配对；基因表达包括转录和翻译过程，都要进行碱基互补培养，正确；个体生物学水平的鉴定不需要碱基互不配对原则，错误故选：C点评：本题考查基因工程的相关知识，要求考生掌握基因工程的操作步骤，能准确判断哪些步骤进行碱基互补配对原则，相关知识点只需考生熟记即可，属于考纲识记层次的考查要求考生在平时的学习过程中注意知识网络结构的构建3（6分）（2015春遵义月考）广西大学动物科学院培育出转基因动物带有巴马香猪长肉基因的小白鼠他们将长肉基因与含有绿色荧光蛋白基因片段整合植入5只公鼠的睾丸中，这些公鼠与8只母鼠交配后，产下60只小白鼠，科研人员采集小白鼠的细胞在荧光显微镜下检测发现，在23只小白鼠的细胞中观测到绿色荧光，37只不含转基因成分以下相关说法，你认为正确的是（）A所需的基因操作工具有限制性内切酶、DNA连接酶和动物病毒B长肉基因是标记基因，绿色荧光蛋白的基因是目的基因C运用的生物技术有基因工程、细胞工程和DNA重组技术D据此分析可知长肉基因在小白鼠细胞中正常表达考点：基因工程的原理及技术版权所有分析：根据题意分析：1、马香猪长肉基因是目的基因，将之导入小鼠，获得转基因小鼠，而目的基因在小鼠中是成单存在的，产生的配子中只有一半有目的基因，所以产生的后代有一部分有转基因成分，有一些没有；2、绿色荧光蛋白（GFP）在紫外光的照射下会发出绿色荧光，能示踪蛋白质的转移途经解答：解：A、转基因小鼠需要限制酶和DNA连接酶将目的基因与运载体连接，还需要病毒作为运载体将目的基因导入小鼠细胞，A正确；B、长肉基因是目的基因，绿色荧光蛋白的基因是标记基因，B错误；C、运用的生物技术有基因工程、细胞工程，基因工程又叫DNA重组技术，C错误；D、根据题意分析转基因小鼠产生的配子中只有一半有目的基因，后代应该一半有绿色荧光，而产下60只小白鼠中在23只小白鼠的细胞中观测到绿色荧光，37只不含转基因成分，说明有一些小白鼠中的目的基因没有表达，D错误故选：A点评：本题主要考查基因工程的原理和技术、胚胎工程，要求考生识记基因工程的原理及操作过程，能准确判断图中各过程的名称；识记PCR技术的原理及过程，能与体内DNA复制进行比较；识记胚胎工程技术，能运用所学的知识答题4（6分）（2015春遵义月考）下表为动植物细胞工程的有关内容比较，你认为错误的是（）项目植物细胞工程动物细胞工程特殊处理机械法去除细胞壁胰蛋白酶处理制细胞悬液法融合方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、生物方法典型应用人工种子、杂种细胞单克隆抗体的制备培养基区别含有生长素和细胞分裂素动物血液不可缺少A0处B1处C2处D3处考点：植物体细胞杂交的过程；细胞融合的概念及方法版权所有分析：细胞工程包括植物细胞工程和动物细胞工程，植物细胞工程的技术包括植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术；动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等解答：解：（1）在植物细胞杂交时首先运用纤维素酶或果胶酶去除植物细胞的细胞壁，而在动物细胞培养过程中要运用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞，错误；（2）植物体细胞杂交过程中运用物理法和化学法将原生质体进行融合，没有生物方法，而动物细胞融合可以利用物理、化学、生物三种方法，正确；（3）可以利用植物组织培养技术获得人工种子，利用植物体细胞杂交获得杂种细胞，动物细胞工程中利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体，正确；（4）植物细胞工程中的培养基中需要用生长素和细胞分裂素以影响愈伤组织的生长和分化；动物细胞工程的培养液中大多数情况需要加入动物血清、血浆等天然成分，但是有时需要明确界定培养液成分时（而血清中有很多位置成分），也可采用无血清培养，错误由此可见，表中只有2处不正确故选：C点评：本题结合图表，考查细胞工程的相关知识，要求考生识记植物细胞工程和动物细胞工程的技术手段、特殊处理、融合方法、应用和培养基成分，能正确进行区分和比较，属于考纲识记层次的考查5（6分）（2014秋东城区期末）将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类的某些癌细胞，其过程如图所示下列相关叙述不正确的是（）A过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同B经形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体C过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞D抗体的靶向作用使过程具有高度特异性考点：单克隆抗体的制备过程版权所有分析：单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体单克隆抗体的制备过程要进行三次筛选：筛选能够产生单一抗体的B淋巴细胞筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）筛选出能够产生特异性抗体的细胞群生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素（借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞疗效高，副作用小，位置准确）解答：解：A、过程的原理和植物原生质体融合的原理都是细胞膜具有一定的流动性故A正确B、经形成的杂合细胞可能有三种，要经过筛选，筛选得到杂交瘤细胞，去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞故B错误C、过程要筛选出能够产生特异性抗体的细胞群，并培养细胞群故C正确D、癌细胞是抗原，抗体与抗原发生特异性结合生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素（借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞疗效高，副作用小，位置准确）故D正确故选B点评：本题考查了制备单克隆抗体的相关内容意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用6（6分）（2009浦东新区一模）在下列选项中，不需要采用植物组织培养技术的是（）A利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株B利用细胞工程技术培养“番茄一马铃薯”杂种植株C利用花药离体培养得到单倍体植株D利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到染色体数目加倍的植株考点：植物培养的条件及过程版权所有分析：植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体解答：解：A、基因工程培养抗棉铃虫的棉花植株的过程中，将含有目的基因的棉花细胞形成转基因植物要用到植物组织培养技术，A错误；B、“番茄一马铃薯”杂种植株的培养过程包括植物体细胞杂交和植物组织培养，而将杂种细胞形成杂种植株的过程属于植物组织培养，B错误；C、花药离体培养得到单倍体植株，将花粉形成完整植株也属于植物组织培养，C错误；D、用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗后，由植株正常生长、发育就可获得多倍体植株，不需要采用植物组织培养技术，D正确故选：D点评：本题考查植物组织培养的应用，意在考查学生分析问题和解决问题的能力，解题的关键是理解将细胞培育成植株即为植物组织培养二、非选择题：7（11分）（2015春遵义月考）实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定甲、乙两种化学物质毒性，并比较二者毒性的强弱请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列实验报告并回答有关问题实验原理：有毒物质能诱导细胞产生变异，根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性实验材料：活的小白鼠胚胎药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片实验步骤：（1）制备细胞悬浮液：把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织分散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液（2）进行细胞培养：取A、B、C三个洁净的培养瓶，消毒灭菌，加入等量的细胞悬浮液向A培养瓶中加入化学物质甲，向B培养瓶中加入等量的化学物质乙，向C瓶内加入等量的生理盐水，并将培养瓶摇匀在实验中，C培养瓶起什么作用？对照（3）制作临时装片：当细胞增殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，用适宜浓度的龙胆紫溶液染色，35min后，盖上盖玻片（4）镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于细胞有丝分裂中期的细胞，并与C组对比以确认发生变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数（Q值）（5）结果与结论：经研究人员实验得知：A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%、QB=12.5%、QC=0.1%，由此可知该实验的结论是甲、乙都是有毒性的，且乙的毒性大于甲考点：动物细胞与组织培养过程版权所有分析：根据题干信息“甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质”、“鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱”和“根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性”，可知自变量为甲乙两种化学物质，因变量是Q值，即变异细胞占全部培养细胞的百分数对照实验的三个步骤：取材、编号；分别作不同的处理；观察实验结果和得出实验结论解答：解：（1）在动物细胞培养过程中，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，将细胞分散成单个（2）进行细胞培养：实验设计时要遵循对照原则和单一变量原则，所以本实验要设计三组实验，单一变量是有毒物质的有无和有毒物质的种类取A、B、C三个洁净的培养瓶，消毒灭菌，加入等量的细胞悬浮液；向A培养瓶中加入化学物质甲，向B培养瓶中加入等量的化学物质乙，并将培养瓶摇匀；C瓶不作处理，作为对照（3）当细胞增殖到大约8代左右时，同时从恒温箱中取出3个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，滴加用适宜浓度的龙胆紫液染色，35min后，盖上盖玻片（4）有丝分裂中期的细胞中染色体形态稳定、数目清晰，整齐地排列在赤道板上因此用显微镜观察时要寻找处于有丝分裂中期的细胞，并与C组对比以确认发生变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数（Q值）（5）A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，由此可知该实验的结论是甲、乙两种化学物质均有毒性；且乙的毒性比甲的毒性大故答案为：（1）胰蛋白酶液（2）消毒灭菌 等量的化学物质乙 对照（3）从瓶壁上脱落适宜浓度的龙胆紫溶液（4）细胞有丝分裂中期该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数（Q值）（5）甲、乙都是有毒性的，且乙的毒性大于甲点评：本题考查探究实验，意在考查提升学生理解动物细胞培养和分析实验的能力实验设计时要注意单一变量原则和对照原则要注意无关变量应该相同且适宜8（11分）（2015春遵义月考）科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，番茄耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长质粒上有Pst、Sma、Hind、Alu等四种限制酶切割位点下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，、表示相关结构或细胞，请据图作答（1）图中涉及的技术有：DNA重组技术、植物组织培养技术（答出两点）（2）在构建基因表达载体时，可用一种或多种限制酶进行切割为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用Pst I、Sam I，分别对目的基因和质粒进行切割，切割后产生的DNA片段分别为4、2种（3）图中I ampr基因的目的是重组质粒的鉴定和筛选，除了ampr、鱼的抗冻蛋白基因以外，还应具有的结构是启动子、终止子（4）研究人员通常采用农杆菌转化（或基因枪法等）法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内通常采用抗原抗体杂交技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质考点：基因工程的原理及技术；植物培养的条件及过程版权所有分析：结合题意分析图解：鱼的抗冻蛋白基因上具有三种限制酶切割位点，Pst酶的切割位点存在于目的基因的两侧，Sma酶的切割位点存在于目的基因的左侧，而Alu酶的切割位点存在于目的基因的中央，因此不宜选用Alu酶质粒上有Pst、Sma、Hind、Alu等四种限制酶切割位点，在选择限制酶时一般选择同种限制酶，以便形成相同的黏性末端其中分别表示：基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、脱分化、再分化解答：解：（1）图中涉及的技术有DNA重组技术、植物组织培养技术（2）在构建基因表达载体中，如果目的基因和载体用同一种限制酶切割，获得的黏性末端相同，将会发生自身环化现象，故应选用不同的限制酶分别对目的基因和载体切割，以获得不同的黏性末端，故应选用Pst和Sma对含鱼抗冻蛋白基因的DNA、质粒进行切割，Pst和Sma在鱼抗冻蛋白基因的DNA上共有3个酶切位点，切割后产生4个DNA片段，而环状质粒上有两个酶切位点，切割后产生2个DNA片段（3）图中I ampr基因是标记基因，可以对重组质粒进行鉴定和筛选，重组质粒上除了ampr、鱼的抗冻蛋白基因以外，还应具有启动子、终止子（4）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，通常采用抗原抗体杂交技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质故答案为：（1）DNA重组技术、植物组织培养技术（2）Pst I、Sam I 4 2（3）重组质粒的鉴定和筛选 启动子 终止子（4）农杆菌转化（或基因枪法等） 抗原抗体杂交点评：本题具有一定的难度，属于考纲中理解层次的要求，考查了基因工程的工具酶、目的基因导入受体细胞以及利用植物组织培养技术培养转基因植株的相关知识，解答的难点是能够根据目的基因和质粒上的切割位点选择合适的限制酶9（11分）（2015春遵义月考）据近日每日科学网站报道，英国牛津大学科学家最近发现了一种“改造”病毒的新方式，可按需要剔除病毒的关键毒性，并保持其复制能力，使其成为杀死癌细胞却不伤害健康细胞的“安全卫士”这将为癌症治疗的改进提供新的平台，也将为新一代抗病毒疫苗的研制奠定良好基础已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如图：（1）过程可以通过PCR技术大量扩增A基因，该技术的原理是DNA双链的复制（2）过程构建A基因重组载体时，必须使用限制酶和DNA连接酶两种工具酶（3）若受体细胞为动物细胞，过程常用的方法是显微注射法，A蛋白属于抗原性物质（4）过程运用了动物细胞融合技术技术，该过程技术的原理是细胞膜的流动性（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的A蛋白所制备的疫苗对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行核酸序列（或基因序列）比较；或用图中的抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测考点：基因工程的原理及技术；单克隆抗体的制备过程版权所有分析：分析题图：图示为疫苗生产和抗体制备的流程之一，其中表示逆转录过程；是获取目的基因（A基因）的过程；是基因表达载体的构建过程；是将目的基因导入受体细胞的过程；是从小鼠皮下获取已经免疫的B细胞的过程；表示B细胞的增殖和分化过程；是细胞融合过程；X为杂交瘤细胞解答：解：（1）基因工程的操作步骤是：目的基因的获取构建基因表达载体导入受体细胞目的基因的检测和表达过程代表的是目的基因（A）的获取，可以通过PCR技术大量扩增A基因，该技术的原理是DNA双链的复制（2）构建A基因重组载体时，首先需用限制性核酸内切酶切割含有A基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶连接A基因和运载体形成A基因重组载体（3）是将目的基因导入受体细胞的过程，常用显微注射法将目的基因导入动物细胞，A蛋白是外源基因控制产生的，属于抗原性物质（4）过程采用动物细胞融合技术，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，获得的细胞叫杂交瘤细胞，其具备了骨髓瘤细胞无限增殖的特性和效应B细胞产生抗体的特性，从而制备单克隆抗体动物细胞融合技术的原理是细胞膜的流动性（5）本题中提示该RNA病毒表面的A蛋白为主要的抗原，故而可选用通过基因工程生产的A蛋白制备疫苗；确诊时为判断该病毒是否为题目中的RNA病毒，可以进行核酸序列的比对，也可以利用单克隆抗体具备特异性，利用抗A蛋白的特异性单克隆抗体通过能否特异性结合判断病毒表面是否有A蛋白的存在进一步进行检测是否为目的RNA病毒故答案为：（1）PCR DNA双链的复制（2）DNA连接酶（3）显微注射法 抗原（4）动物细胞融合技术 细胞膜的流动性（5）A蛋白 核酸序列（或基因序列） 抗A蛋白的单克隆抗体点评：本题以图展示了疫苗的生产和单克隆抗体的制备的过程，考查了中心法则、基因工程、动物细胞工程等现代生物科技考查了学生对相关知识的理解和掌握情况，培养学生搜集和处理科学信息的能力，思维能力，分析和解决问题的能力，具有一定的难度10（11分）（2015春遵义月考）天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精请回答下列问题：（1）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是DNA分子杂交技术，该项方法要用用放射性同位素标记的目的基因作探针进行检测（2）采用PCR技术可对目的基因进行体外扩增该反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核苷酸、引物、Taq酶（耐高温的或热稳定的DNA聚合酶）和模板DNA假如引物都用3H标记，从理论上计算循环4次，所得DNA分子中含有3H标记的DNA占100%（3）已知BamH与Bgl的识别序列及切割位点如图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH和Bgl识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后序列明显增多（4）基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程却能生产自然界不存在的新的蛋白质，但最终还须通过改造基因来实现，原因是基因控制蛋白质的合成，改造基因即改造了蛋白质；改造的基因可以遗传，直接改造的蛋白质不能遗传；目前对大多数蛋白质复杂的高级结构还不清楚，所以改造基因比直接改造蛋白质容易考点：基因工程的原理及技术版权所有分析：基因工程操作的工具是限制性内切酶、DNA连接酶和运载体；基因工程操作的步骤为提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达目的基因的检测有多种手段，如DNA分子杂交技术；分子杂交技术；抗原抗体杂交技术微生物在基因工程具有重要的作用，如获取运载体，用来生产多肽药物等解答：解：（1）检测目的基因是否导入受体细胞，可采用DNA分子杂交技术，用放射性同位素标记的目的基因作探针进行检测（2）PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、TaqDNA聚合酶和（对干扰素基因特异性的）DNA引物；假如引物都用3H标记，由于每次合成都需要引物，所以从理论上计算循环4次所得DNA分子中都含有3H（3）巳知BamHI与BglII的识别序列及切割位点如图2所示用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH和Bgl识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后和序列明显增多（4）基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程虽能生产自然界不存在的新蛋白质，但最终还须通过改造基因来实现，原因是：基因控制蛋白质合成，改造基因即改造了蛋白质