高级生化题库——第四章 酶.doc

第四章 酶一、 名词解释1、固定化酶二、 是非题1、酶的最适pH与酶的等电点是两个不同的概念，但两者之间有相关性，两个数值通常比较接近或相同。 （）2、对于一个酶而言，其过渡态的底物类似物与底物的物相比较，是更有效的竞争性抑制剂。 （）3、在结构上与底物无关的各种代谢物有可能改变酶的Km值o4、如果加入足够的底物，即使存在非竞争性抑制剂，酶催化反应也能达到正常的Vmax。5.、酶反应最适pH不仅取决于酶分子的解离情况,同时也取决于底物分子的解离情况( )6、反竞争性抑制剂(I)首先与酶结合形成EI，EI再与底物(S)结合形成EIS，EIS不能分解成产物，I因此而起抑制作用。7、Km的物理意义是指当酶反应速率达到最大反应速率一半时的底物浓度。为使某一反应的反应速度从10%Vmax提高到90%Vmax，其底物浓度应提高9倍。8、推导Michaelis-Menten方程时，假设之一是随底物转变为产物，酶-底物复合物的浓度不断下降。9、一种酶有几种底物时，就有几种Km值。10、别构酶对温度的反应很特殊，有的在0时不稳定，在室温时反而稳定。三、 填空题1、酶容易失活，如何保存酶制品是一个很重要的问题。通常酶制品的保存方法有和等。2、有一类不可逆抑制剂具有被酶激活的性质,被称为_型不可逆抑制剂,又可被称作酶的_3、抗体酶既具有专一结合抗原的性质，又具有酶的催化功能。4、胰蛋白酶原_端切去6肽后变成有活性的胰蛋白酶。5、于1953年首先完成了胰岛素的全部化学结构的测定工作。而牛胰核糖核酸酶是测出一级结构的第一个酶分子，由一条含124个残基的多肽链组成，分子内含有_个二硫键。6、胰凝乳蛋白酶原受到胰蛋白酶作用后，在_与_之间的肽键断开，成为有活性的-胰凝乳蛋白酶，再失去两个二肽_和_而形成酶的稳定形式-胰凝乳蛋白酶。7、根据国际酶学委员会的分类方法，酶可分为六大类，第六大类是 。8、从鸡蛋清等来源的溶菌酶可溶解细菌的_从其作用机制看,它实际上是一种_酶。9、与酶活性有关的必需基团常见的有_，_，_，_等。四、 单项选择题1、酶的竞争性抑制的动力学特点是（ ）A Km值增大，Vmax不变 （竞争） B Km值（不变）与Vmax值均增大（减小）（非竞争）C Km值增大，Vmax减小 （混合） D Km值减小，Vmax不变减小（反竞争）2、在酶的可逆抑制剂中，不影响酶的二级常数（Kcat/Km）的是： （）竞争性抑制剂；非竞争性抑制剂；反竞争性抑制剂；都不是3、有的酶存在多种同工酶形式，这些同工酶所催化的反应： （） 并不完全相同； 完全相同，而且反应的平衡常数也相同； 完全相同，但由于每种同工酶活性不同，反应平衡常数可以不相同。4、底物引进一个基团以后,引起酶与底物结合能增加,此时酶催化反应速度增大,是由于_A. 结合能增大B. 增加的结合能被用来降低反应活化能C. 增加的结合能被用来降低KmD. 增加的结合能被用来增大Km5、在研究酶反应速度应以初速度为准的原因中，哪项不对？A、反应速度随时间延长而下降B、产物浓度的增加对反应速度呈负反馈作用C、底物浓度于反应速度成正比D、温度和PH有可能引起部分酶失活E、测定初速度比较简单方便6、下列几种酶中，哪一个酶需要金属离子作为辅基a.羧肽酶 b.核糖核酸酶 c.溶菌酶 d.胰凝乳蛋白酶7、当酶促反应速度为Vmax的80%时，其Km与S之间的关系如下列情况中的哪一种？ a.Km=0.5S b.Km=0.25S c.Km=0.75S d.Km=S8、胰凝乳蛋白酶的活性中心中构成一个电荷中继网的三个氨基酸残基是：（）（1）HIS，Arg，Glu（2）Ser，Lys，Asp （4）Ser，Arg，Glu9、MWC模型和KNF模型的一个区别是：（） （1） MWC模型可以解释正协同性，而KNF模型不能 （2） MWC模型可以解释负协同性，而KNF模型不能（3） MWC模型不能解释正协同性，而KNF模型能（4） MWC模型不能解释负协同性，而KNF模型能10、汞对酶的抑制作用，可用下列哪个方法解除？A. 加大底物浓度B. 透析（对PH7.4磷酸缓冲液）C. 解磷定D. 二巯基丙醇11、胰凝乳蛋白酶催化肽链水解时，主要通过下列哪个机制，从而使酶反应速度加快？A. 诱导契合B. 底物形变C. 邻近效应，轨道定向D. 广义酸碱催化，形成共价中间物12、对于别构酶而言，在一定底物浓度范围内，S的变化如不足以影响酶反应速度，则该酶具：A. 正协同作用B. 负协同作用C. 同促效应D. 异促效应13、一种单亚基的酶处于人体某一代谢途径的中间，在病人中发现，突变造成了对于酶唯一底物的km值变为原来的两倍，要保持此途径的代谢速率，底物浓度应怎样变化：A、正好两倍 B、正好一半 C、大于两倍 D、小于一半五、 简答题1、 酶分离纯化的动力学？ 酶提纯的目的，不仅要求酶量得率高，而且要求得到不含或少含其它杂蛋白，使酶的纯度提高。因此，在酶的纯化过程中，除了测定体积或一定重量酶制剂中含有的酶活力单位数之外，还要测定酶制剂中蛋白（或蛋白氮）的含量，以求得酶的纯度。酶的纯度用比活力表示。 比活力=活力单位数/毫克蛋白=总活力单位数/总蛋白（氮）毫克数。此外在酶的纯化工作中还要计算两个具有实际意义的项目：即纯化倍数和产量%， 纯化倍数=每次比活力/第一次比活力 产量%=每次总活力/第一次总活力100% 以下为从粘质赛氏菌粗提提纯液提纯Asn酶的过程，经7步，分别测总活力单位，总蛋白量的数据，从这些数据中进一步计算出活力、产量%和纯化倍数。纯化步骤总蛋白（g）总活力单位比活力单位/mgPr纯化倍数产量%1.粗抽提液30210000.711002.氯化锰 酸，热度水 Pr(55,5分钟)7.64150172.02.8723.KOH冰冻融解5.58148722.73.8714.DEAE-纤维素吸附层吸0.113502544.563.5245.硫酸铵盐析0.048346771.7102.0176.羟基磷灰石吸附0.0163133200.0286.0157.PAGE电泳0.0123100255.0365.0153、 回答下述问题是对或是错，假若是错请解释为什么？1） 在底物饱和的条件下，酶的催化反应速率与酶浓度成比例。2） 在底物浓度成为反应限速因子是，酶的催化反应速率随反应时间而下降4、说明磺胺药治病的基本原理。4、请解释什么是酶的活力和酶的比活力，并说出活力的比活力两个指标在酶的纯化过程中分别可以反映什么？5、PH对酶活力的影响。答案：大部分酶的活力受其环境PH的影响。在一定PH下，酶反应有最大速度，高于或低于这个PH，反应速度下降。通常称此PH为酶反应的最适PH（optimumPH）。它因底物种类、浓度、缓冲液的成分不同而不同。具体地讲，PH酶活力的影响主要在以下几个方面： 过酸、过碱会影响酶蛋白的构象，甚至使酶失活。 PH改变不剧烈时，酶虽然不变性，但活力受影响。原因是PH影响底物分子、影响酶分子的解离状态及它们的结合状态。PH影响分子中另一些基团的解离，它们的离子化状态与酶的专一性及酶分子的乥性中心的构象有关。6、一个酶促反应，Vmax=25mol L-1min-1，Km=1.2510-5mol/L,反应液体积10ml。计算S=2.010-3 mol/L时，头五分钟内生成的产物总量。当S=2.010-6 mol/L时，能否进行同样的计算？请说明理由。6、你能从Michaelis-Menton（米氏）方程中得到哪些启示？7、试说明酶