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专题4 酶的研究与应用课题3 酵母细胞的固定化【教学目标】1 说出固定化细胞的作用和原理。2 了解固定化细胞常用的方法和载体材料。3 尝试制备固定化酵母细胞,并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。【教学重点】 制备固定化酵母细胞。【教学难点】制备固定化酵母细胞。【教学方法】 实验法【教学准备】 PPT课件、实验材料(干酵母、海藻酸钠、无水CaCl2、蒸馏水)、实验仪器(烧杯、玻棒、酒精灯、三脚架、石棉网、注射器等)【教学过程】I、引入图片:传统酿酒作坊酿酒过程图片思考:有什么方法可以使酵母细胞从反应产物中分离并被重复使用呢?II、新课一、固定化细胞技术 引入固定化细胞技术的概念,了解常用的载体。二、制备固定化酵母细胞阅读教材P5051实验操作步骤,思考:(1)制备过程包括哪几个步骤?应该注意哪些问题?(2)你认为哪个步骤的操作是最重要的一环?(一)制备固定化酵母细胞1酵母细胞的活化: 称取1g干酵母,放入50ml的小烧杯中,加入蒸馏水10ml,搅拌均匀成糊状,放置1小时,使其活化。 活化就是处于 状态的微生物重新恢复正常生活状态。2配制物质的量尝试为0.05mol/L的CaCl2溶液 称取无水CaCl2 g,放入 ml烧杯中,加入 ml蒸馏水,充分溶解。3配制海藻酸钠溶液(1)称取 g海藻酸纳,放入 ml小烧杯中,加入 10ml 水。(2)称取 g海藻酸纳,放入 ml小烧杯中,加入 水。(3)用酒精灯加热。加热溶化海藻酸钠时要注意:用 或 ,边 ,将海藻酸钠调成糊状,直至完全溶化。4.海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合将溶化好的海藻酸钠溶液 至室温,加入已 的酵母细胞,充分搅拌,使其混合均匀,再转移至 中。5固定化酵母细胞以 的速度 地将注射器中的溶液滴加到配制好的 溶液中,观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶球的情形,并适当调整注射器与液面的 。将凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡 min,以便形成稳定的结果。6观察现象,填表:载体凝胶珠颜色凝胶珠形状0.7g海藻酸钠10 ml H2O ml H2O思考:如何通过凝胶珠的颜色、形状来判断细胞固定化是否成功?上表说明如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明 ;如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明 ; 小贴士:检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法:用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠制作成功。在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。(二)用固定化酵母细胞发酵1将固定好的酵母细胞用 冲洗2-3次。2发酵时的温度为 ,时间 。3观察利用固定化酵母细胞发酵的葡萄糖溶液,看看是否有 产生,闻闻是否有 。(三)总结与反思:1 是操作中最重要的一环,决定实验的成败。2 涉及固定化细胞的质量。如果 ,将很难形成凝胶珠;如果 ,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目少,影响实验效果。【练习与巩固】1.关于酵母细胞活化的说法,不正确的是( )。A酵母细胞活化就是由无氧呼吸变成有氧呼吸 B酵母细胞活化所需要的时间较短 C活化就是让处于休眠状态的细胞恢复生活状态 D酵母细胞活化后体积增大 2.使用固定化细胞的优点是( )。A.能催化大分子物质的水解 B可催化一系列化学反应 C与反应物易接近 D有利于酶在细胞外发挥作用3下列不是用于包埋法固定化细胞的载体是( ) A琼脂糖 B醋酸纤维素 C聚丙烯酰胺 D聚乙烯树脂4下列关于固定化细胞的叙述,正确的是 ( )A催化效率高,低耗能、低污染 B对环境的条件非常敏感,容易失活C既能与反应物充分接触,又能与产物分离 D成本低、操作简单,但反应效率可能很低5溶解海藻酸钠,最好采用下列哪种加热的方法 ( ) A小火间断 B小火持续 C大火间断 D大火持续6.对配制海藻酸钠溶液的叙述不准确的是( )。 A加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环 B.海藻酸钠的浓度涉及固定化细胞的质量C海藻酸钠的浓度过高,易形成凝胶珠 D海藻酸钠的浓度过低,形成凝胶珠内包埋细胞过少7、下列有关固定化酵母细胞制备步骤正确的是 ( )A应使干酵母与自来水混合并搅拌,以利于酵母菌活化B配制海藻酸钠溶液时要用小火间断加热的方法C向刚溶化好的海藻酸钠溶液中加入已活化的酵母细胞,充分搅拌并混合均匀D将与酵母细胞混匀的海藻酸钠溶液注人CaCl
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