中药及其制剂分析概论ppt课件.ppt

1 中药及其制剂分析概论 2 发言内容 3 中药及其制剂的鉴别方法 目前部分中药尚无含量测定项目 因此 鉴别就成为中药制剂质量控制的一个非常重要的环节 性状鉴别显微鉴别理化鉴别色谱鉴别光谱鉴别中药指纹图谱 4 性状鉴别 包括外观形状及感官性质等 如药材及其炮制品的形状 大小 色泽 表面特征 质地 折断面特征以及气味等 中药制剂的外观及内容物的形状 颜色 气味等 人参 甘草 冬虫夏草 5 显微鉴别 显微鉴别是利用显微镜来观察药材及含原药材粉末的中成药的组织构造 细胞形状以及化合物的特征 以鉴别中药的真伪 山药粉末显微鉴别1 白色或淡黄色粉末 2 淀粉粒众多 主要为单粒 呈椭圆形 3 草酸钙针晶束存在于粘液细胞中 长约80 240 m 6 显微鉴别 何首乌粉末显微鉴别1 黄棕色粉末 2 淀粉粒众多 3 草酸钙簇晶众多 4 具缘纹孔导管大小不一 7 理化法鉴别 利用药材中存在的特定成分 有效成分或主要成分的性质 通过与一定试剂发生化学反应 用化学方法和仪器分析方法鉴别药材的真伪优劣 显微化学反应法 微量升华法 荧光法与分光光度法 色谱法鉴别 8 微量升华法 载玻片 金属圈 金属片 石棉板 9 荧光法与分光光度法 利用中药及其制剂中某些组分的光谱特征如在紫外光下能激发显示不同颜色的荧光 紫外光或可见光波长区有明显的特征吸收峰等 可进行药物的鉴别 以评价中药的真伪 10 荧光法与分光光度法 延胡索药材切面于紫外灯下显亮黄色荧光 11 何首乌的紫外图谱 聚对苯二甲酸乙二醇酯 12 色谱法鉴别 薄层色谱法 操作简便 有多种专属的检出方法及丰富的文献资料 是目前中药制剂中应用最多的鉴别方法 对吸附剂 展开剂的选择 不是一味追求如何将检品分离成单一组分 而是如何在某一规定的条件将检品制成清晰 圆整 比移值稳定 可重复的色谱图谱 以便与对照品或标准中药材 标准中成药等进行对照比较 13 黄芩苷的TLC鉴别 1 2 供试品溶液3 阴性对照品溶液4 黄芩苷对照品溶液 14 钩藤的TLC鉴别 1 无柄果钩藤2 毛钩藤3 华钩藤4 大叶钩藤5 钩藤s 钩藤碱 15 中药指纹图谱 中药材或中成药经过适当处理后 利用现代信息采集技术和质量分析手段得到的能够显现中药材或中成药性质的图像 图形 光谱的图谱及其数据 称为中药指纹图谱 现阶段中药的有效成分大多尚未明确 中药指纹图谱技术较之单一成分或指标成分的质控方法 更具有科学性和全面性 狭义的中药指纹图谱主要指中药的化学指纹图谱 广义而言 还包括中药生物指纹图谱 色谱指纹图谱和光谱指纹图谱 16 黄芪药材HPLC DAD图谱 不同批次黄芪药材共有峰相对保留时间RSD小于1 0 而相对峰面积RSD较大 17 黄芪药材HPLC DAD叠加色谱图 18 中药及其制剂的杂质检查 19 水分检查法 固体中药制剂多数要检查水分 因为水分含量过高 可引起制剂结块 霉变或有效成分的分解 水分是丸剂 散剂 颗粒剂 胶囊剂等固体制剂的常规检查项目 20 烘干法 取供试品2g 5g 置扁形称量瓶中 首先在100 105 干燥5h 置干燥器中放置30min 称重 再于以上温度下干燥1h 至连续两次称重的差异不超过5mg为止 根据减失的重量计算供试品中含有水分的百分率 烘干法适用于不含或少含挥发性成分的药品 若供试品含水量较多 又含大量糖类 则应先在低温下烘去大部分水分 再在规定温度下干燥至恒重 21 甲苯法 甲苯法是利用水可与甲苯在69 3 共沸蒸出 收集馏出液 待分层后由刻度管测定出所含水的量 甲苯法可用于含挥发性成分样品的水分测定 本法不适用于微量水分的测定 中药制剂中含水量较高 可用本法测定 500ml短颈圆底烧瓶 水分测定管 直形冷凝管 22 减压干燥法 本法适用于含有挥发性成分的贵重药品 减压干燥器中 加入P2O5适量 取供试品置干燥恒重的称量瓶中 打开瓶盖置上述减压干燥器中减压至2 67kPa以下持续0 5h 室温放置24h 在减压干燥器出口连接新鲜无水氯化钙干燥管 缓缓打开活塞 待内外压一致后关闭活塞 打开干燥器 盖上瓶盖 取出称量瓶迅速精密称定重量 计算供试品中含有水分的百分率 23 气相色谱法 该法用无水乙醇浸提供试品 抽提出样品中的水分 以纯化水作标准对照 在气相色谱仪上进样各5 l 用直径为0 25mm 0 18mm二乙烯苯 乙基乙烯苯型高分子多孔小球为载体 柱温140 150 热导检测器检测 用外标法计算样品中的含量 优点 对于是否含挥发性成分 含水量从微量到常量 都不影响测定 另外 在有仪器的前提下 气相色谱法快速 灵敏 简便 提高了效率 24 总灰分和酸不溶性成分 总灰分指药材或制剂经加热炽灼灰化遗留的无机物 包括药物本身所含无机盐 泥土 砂石 测定方法 精密称取供试品2g 3g 置已炽灼至恒重的坩埚中 缓缓炽热使完全炭化 再在500 600 炽灼至完全灰化并至恒重 根据残渣的重量计算总灰分的含量百分率 25 残留农药 常用农药有有机氯类 艾氏剂 六六六 氯丹等 有机磷类 三硫磷 氯硫磷 蝇毒磷等 氨基甲酯酸类 西维因 二硫代氨基甲酸酯类 福美铁 代森锰等 无机农药 磷化铝 砷化钙等 接触农药不明的样品 一般可测定总有机氯量和总有机磷量 使用过已知农药的样品多采用气相色谱法检查有关的农药 26 残留农药 气相色谱法是对残留农药进行定性和定量分析的最常用方法 测定有机氯时 使用电子捕获检测器 火焰光度检测器是测定硫 磷化合物的专用检测器 磷酸盐与钼酸铵试液硫酸试液反应生成磷钼酸 再与氨基萘磺酸试液反应 被还原为钼蓝 在820nm处测定吸光度 同法制备标准曲线 按标准曲线法测定含量 生成红色硫氰酸铁配位离子 于460nm波长处有最大吸收 吸光度与氯离子量呈线性关系 故可用比色法测定含氯量 2Cl Hg SCN 2HgCl2 2SCN 6SCN Fe3 Fe SCN 6 3 27 中药及其制剂的含量测定方法 高效液相色谱法 薄层扫描法 分光光度法 化学分析法 28 Question 比较化学分析法和高效液相色谱法2种中药制剂含量测定方法的优缺点 化学分析法 为经典的分析法 方法的精确度高 但不如色谱法等仪器分析方法灵敏 专属 当测定组分含量较高时方可应用且多用于组成较简单的制剂 测定前一般还需进行提取 纯化等处理过程 以排除干扰 高效液相色谱法 分离效能高 分析方法灵敏 专属分析速度快 应用范围广 但不如化学分析法准确 29 化学分析法 化学分析法包括重量法和容量法 化学分析法为经典的分析法 方法的精确度高 但不如光谱法等仪器分析方法灵敏 专属 当测定组分含量较高时方可应用且多用于组成较简单的制剂 测定前一般还需进行提取 纯化等处理过程 以排除干扰 30 分光光度法 分光光度法灵敏 简便 在中药制剂分析中也有应用 由于中药制剂成分复杂 不同组分的紫外吸收光谱往往彼此重叠 干扰 因此在测定前必须经过提取 纯化等步骤 以排除干扰 同时应取阴性对照品在相同条件下测定 应无吸收 在中国药典中 紫外分光光度法主要用于几个最大吸收波长较高 吸收较强的组分的含量测定 如小檗碱 芦丁 黄芩苷 丹皮酚等 比色法在中药制剂分析中也有应用 一般用于一类成分总量的含量测定 31 薄层扫描法 薄层扫描法具有分离效能高 快速 简便等特点 因而适用于中药制剂的分析 薄层扫描法虽然精密度和准确度不如高效液相法高 但它可以作为高效液相色谱的补充 用于无紫外吸收 或不能用高效液相色谱法分析的组分 如人参皂苷 贝母生物碱等 双波长飞点薄层扫描仪器CS 9301PC 32 高效液相色谱法 高效液相色谱法分离效能高 分析速度快 应用范围广 其重现性和准确度均优于薄层扫描法 是中药制剂含量测定的首选方法 33 色谱条件的选择 中药制剂分析中 多使用反相高效液相色谱法 RP HLPC 使用甲醇 水或乙腈 水的混合溶剂作为流动相 若分离酸性组分 可在流动相中加入适量酸 如醋酸 磷酸 以抑制其解离 对酸性较强的组分 也可使用离子对色谱法 常用的反离子试剂有氢氧化四丁基铵等 若分离碱性组分 多采用反相离子对色谱法 在酸性流动相中加入烷基磺酸盐 有机酸盐 也可使用无机阴离子 如磷酸盐作为反离子 34 含量测定法 外标法 若标准曲线过原点 测定组成含量变化不大 可使用外标一点法 由于中药制剂中测定组分含量的波动范围较大 所以最好采用标准曲线法定量 内标法 中药制剂组成复杂 若使用内标法 会增加分离难度 其他成分很容易干扰内标峰 所以中药制剂含量测定中 当组成相对简单 杂质不干扰内标峰时 才能使用内标法 35 供试品溶液的制备 中药制剂中多含有糖 制备供试液时 宜使用高浓度的醇或其他有机溶剂提取测定组分 最好不使用水为溶剂 以免提出的糖污染色谱住 提取的方法视制剂的情况而定