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不同来源大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验综述摘要：由于不同来源基因型大肠杆菌的致病力和在动物中致病的表现也不一样，本综述通过查看不同文献资料，选择其中比较典型的几种进行归纳总结。关键词：大肠杆菌 分离鉴定 药敏试验本文的研究希望能为临床上的大肠杆菌病防治提供一定的借鉴作用。本研究通过对山东某大型养殖场的病料采集，分离鉴定了38株鸭大肠杆菌。利用玻片凝集试验和试管凝集试验对分离菌进行了0血清型鉴定，用菌液涂布法对分离菌进行了药敏试验，结果表明，该养殖场存在较为严重的大肠杆菌感染，分离的38株大肠杆菌均有致病性，分属7种血清型，分别是02、021、083、0119、0139、073和078，占分离菌株的8684；另有5株未能定型。药敏试验结果表明，38株鸭大肠杆菌对21种抗生素均有不同程度的耐药，并以多重耐药为主，耐药性差异较大，最为敏感的抗生素是磷霉索和阿米卡星2种药物1。对驻马店地区规模化肉鸡场所发疾病进行调查，根据临床症状、病理变化及病原分离鉴定结果，确诊为大肠杆菌病。选择10株分离菌进行药敏试验，结果表明多数菌对利高霉素、头孢曲松、丁胺卡那霉素、新霉素、氧氟沙星敏感，敏感率分别为80、60、60、60、50；对多黏菌素、氟苯尼考的敏感率分别为10、20；分离的10株菌对甲砜霉素、强力霉素、恩诺沙星、诺氟沙星、环丙沙星、链霉素、阿莫西林、氨苄青霉素、土霉素全部耐药2。为更好预防水貂大肠杆菌病提供依据。从山东某大型水貂养殖场采集病料，通过病原分离、培养特性、染色特性和生化试验等对病原进行分离与鉴定，并对分离菌进行药敏试验。共分离致病菌18株，其中有10株为大肠杆菌，说明该养殖场主要的细茵病为大肠杆菌感染。药敏试验结果表明分离出的大肠杆菌对大多数抗茵药物敏感。水貂发生细菌病后，应尽可能通过药敏试验筛选敏感药物，避免盲目投药3。从河南省信阳市规模化猪场腹泻仔猪病例中分离到4株革兰氏阴性杆菌，通过细菌培养特性、细菌形态和生化试验，确定为大肠杆菌。经0血清型鉴定，分离株为08、0157、0117、038。动物试验结果显示，4个分离菌株对小鼠有较强的致死性，为致病性大肠杆菌。药敏试验结果显示，分离菌株对头孢曲松、头孢噻呋、头孢噻肟和丁胺卡那等药物高度敏感，对四环素、强力霉素、诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星等药物产生耐药性4。目前，在国内大肠杆菌(Ecoli)病的发病率相对其他细菌病依然较高，并且以继发感染和混合感染情况最为常见。为了研究不同来源大肠杆菌的毒力与药敏试验。鸭源大肠杆菌病是鸭的常发病之一，严重影响着养鸭业的健康发展，其主要发病特征为心包炎、肝周炎、气囊炎、输卵管炎，临床上常通过其病原的分离鉴定来确诊该病。鸭大肠杆菌血清型众多，分布范围广，因此，弄清大肠杆菌的血清型分布和临床分离鸭大肠杆菌的耐药情况，对鸭大肠杆菌病的治疗具有重要的指导意义5。以上所有实验均是跟沙门氏菌进行生化实验比较，确定是感染大肠杆菌的条件下进行的研究。本研究通过对山东某大型养殖场的病料采集，分离鉴定了38株鸭大肠杆菌。利用玻片凝集试验和试管凝集试验对分离菌株进行了0血清型鉴定，用菌液涂布法对分离菌株进行了药敏试验，获得了该场流行的优势血清型，为更好的预防大肠杆菌病提供了依据，本次试验采集了42份病料，经实验室分离鉴定，获得了38株鸭大肠杆菌，分离率为9048，另有4份病料没有分离到大肠杆菌。究其原因，可能与接种环接种培养基时挑取病料较少或没有挑到病灶区有关。另外，临床上鸭大肠杆菌常与其他细菌或病毒混合感染，如鸭疫里默氏杆菌、禽白痢、葡萄球菌、链球菌等，且有时表现出许多类似的症状，此次也存在其他病原菌感染的可能，而本次试验中使用的培养基主要是针对大肠杆菌的。再有，临床上抗菌药物的使用，也会影响细菌分离6。鸡大肠杆菌病是由大肠杆菌(Escherichia coli)的某些致病性菌株引起的不同类型疾病的总称(杜元钊等，2005；辛朝安，2003)，其能侵害各种日龄鸡，主要侵害26周龄的雏鸡，临床上以败血症、气囊炎、心包炎、肝周炎、肉芽肿、输卵管炎、卵黄性腹膜炎、关节炎、眼炎、脐炎为主要特征，发病率和死亡率较高。该病对肉鸡生产造成巨大的危害。由于大肠杆菌血清型太多，并且极易产生耐药性，为弄清本病流行情况及流行菌株的耐药性，从而科学指导用药，笔者对规模化肉鸡场所发鸡大肠杆菌病进行病原的分离鉴定及药敏试验，以期为临床防制鸡大肠杆菌病提供理论依据7。近几年来，在肉鸡生产中，为了控制大肠杆菌及某些细菌感染，治疗中盲目使用一些抗菌药物，导致耐药菌株日益严重。从本次药敏试验的结果可见，曾对大肠杆菌比较敏感的头孢类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类药物均表现出不同程度的耐药。这可能与近年来长期大剂量使用这些药物密切相关，因此在临床选药时，应根据药敏试验来确定，同时还应考虑联合用药、交叉用药和轮换用药等方法，另外还可考虑中西药结合使用。调查发现，发生大肠杆菌病的养鸡场多与环境条件、饲养密度、种蛋污染等因素有关，为减少此病的发生，应采取综合防制措施，加强饲养管理，提供优质饲料及清洁的饮水，做好通风工作，保持环境的清洁卫生，定期消毒，采用全进全出的饲养管理方式，减少各种不良应激，避免从有污染的孵化场引进种蛋或雏鸡。同时做好种蛋、孵化器具的消毒工作。对于该病流行的鸡场，在利用药物预防的同时，采用本地(场)菌株制造的灭活疫苗或用大肠杆菌多价疫苗进行免疫，可以起到事半功倍的效果8。水貂大肠杆菌病是水貂的一种肠道传染病，常呈败血型经过，伴有严重下痢，侵害呼吸器官，死亡率高。自20世纪80年代以来，山东省水貂养殖场数量逐年增加。据海关贸易总署统计，全国平均年产水貂皮1 200万张，其中山东省了占23。养殖水貂利润很高，是农民脱贫致富的有效途径，深受农民的欢迎。由于养殖水貂的规模不断扩大，水貂抗病力逐年降低。条件性致病菌是继发水貂细菌病的主要病原，给水貂养殖业带来巨大的经济损失，也制约了水貂养殖业的进一步发展。近年来，科研工作者对水貂病毒性疾病的研究较为深入，并且已经得到一定控制，而对水貂细菌性疾病的相关报道则很少。笔者通过对山东省威海市某大型养殖场的病料采集，分离并鉴定了10株水貂大肠杆菌，并对分离菌株进行了药敏试验，以期为更好地预防水貂大肠杆菌病提供依据9。笔者对某大型养貂场进行了为期3个月的病料采集，共收集28次(份)病料，经实验室分离与鉴定，共获得10株大肠杆菌，分离率为357，说明大肠杆菌是该养貂场的主要细菌病原，这与文献中的大肠杆菌病是水貂常发病的报道一致。大多数大肠杆菌是人类和动物肠道中的共栖菌，但当细菌发生移位，入侵肠外组织，即成为条件性致病菌，另外，还有某些血清型的大肠杆菌是人类和动物的重要致病菌。水貂大肠杆菌病的发病与饲养场内的饲养管理、饲料、环境卫生和气候变化等有密切的关系，因此，临床防治大肠杆菌病，水貂场应严格控制饲养管理，不能混群饲养，同时要严格管理饲养卫生，增强消毒意识，做到定期消毒，减少环境中致病菌的含量，从而有效减少致病菌对水貂的侵害，气候剧变时可以适当使用药物预防。饲喂安全的饲料可以有效减少水貂大肠杆菌病的发生。对来源不明的动物性饲料，必须经高温加工后方可饲喂。此次分离的10株水貂大肠杆菌对头孢西叮、头孢他啶和头孢吡肟3种抗菌药物的敏感率为100，对其他15种抗菌药物则表现为不同程度的耐药，有2株大肠杆菌可对13种药物同时耐药。多重耐药现象的出现与水貂细菌病防治中滥用抗菌药物有很大关系，许多养殖户不按照剂量及疗程给药治疗，或在饲料及饮水中长期添加抗菌药物进行疾病预防，都会造成耐药性提高。药敏试验结果表明，水貂发生细菌病后应尽可能通过药敏试验筛选敏感药物，避免盲目投药10。仔猪大肠杆菌病是由病原性大肠杆菌引起的养猪场常见的细菌性传染病，根据猪的发病年龄和临床表现不同可分为仔猪黄痢、仔猪白痢和仔猪水肿病。不同地区流行的优势血清型有差异，即使在同一地区不同饲养场的大肠杆菌分离株的血清型也有差别。因此，对当地流行的大肠杆菌进行血清型和耐药性试验等相关研究，对大肠杆菌病的有效防治具有重要的理论和实践意义4。大肠杆菌血清型众多，且具有较强的地域性分布，弄清各地致病性大肠杆菌的优势血清型以及敏感药物，对于该病的区域性防治具有重要的指导意义。大肠杆菌是一种在人和温血动物肠道内常见的细菌。大多数大肠杆菌菌株无害。然而一些菌株，如肠出血性大肠杆菌(EHEC)可引起严重的食源性疾病，出现包括腹部绞痛、腹泻、血性腹泻、发烧、呕吐以及溶血尿毒综合症等临床症状。其代表株0150：H7，大肠杆菌是与公共卫生有关的最重要的出血性大肠杆菌的血清类型。羊、猪、鸡、马、鹿、鸽、海鸥等动物均可能成为EHEC的携带者。因此弄清肠出血性大肠杆菌(EHEC)在动物中的携带情况及其传播模式，具有极其重要的公共卫生意义。大肠杆菌很容易产生耐药性，它可以通过菌毛将耐药质粒传递给其他大肠杆菌M1，再加上临床上盲目用药致使大肠杆菌的耐药性日益严重，有些甚至出现多重耐药的现象，给猪大肠杆菌的及时治疗增添了一定的难度。最好的措施是建立长期的耐药性和病原血清型分布监测机制，在临床实践中根据药敏试验结果，选择有效抗生素，并注意交叉用药，用量适当，尽可能控制和减少耐药性的产生，提高抗生素对猪大肠杆菌病的防治效果；同时能够根据当地所流行的优势血清型进行相关的疫苗研究和防控工作。试验中的4株大肠杆菌分离自同一区域邻近的几家猪场，由于存在相同的用药习惯，因此表现出了类似的药敏试验结果4。参考文献：1吴信明；连洪梅；王艳；赵蕾；汪洋；沈志强中国畜牧兽医 2010年第37卷第10期疾病防治1796717236(2010)100178032张桂枝；靳双星；李建中郑州牧业T程高等专科学校畜牧系6717236(2010)020180-023孙蓉蓉；邹玲；刘文华；张灿；李文立；任慧英青岛农业大学动物科技学院517661l(2015)1l一119014李迎晓；焦凤超；易本驰；何敏；陈敏信阳农业高等专科学校动物科学系10021302(2013)010217025刁有祥，李久芹，陈庆普山东省鸡大肠杆菌的分离鉴定EJ3中国预防兽医学报，2002。1：21236中国