唾液淀粉酶活力的测定.doc_第1页
唾液淀粉酶活力的测定.doc_第2页
唾液淀粉酶活力的测定.doc_第3页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

唾液淀粉酶活力的测定一、实验目的了解并掌握唾液淀粉酶活力的测定方法二、实验原理唾液淀粉酶能催化水解淀粉,生成分子较小的糊精和麦芽糖。本实验利用碘的呈色反应来测定唾液淀粉酶水解淀粉作用的速度,从而测定唾液淀粉酶活力的大小。三、实验仪器和试剂1. 仪器(1)多孔白瓷板 (2)50mL三角瓶 (3)恒温水浴锅(4)烧杯 (5)500mL容量瓶 (6)100mL容量瓶(7)漏斗 (8)吸管2. 试剂(1)原碘液:称取碘11g、碘化钾22g,加少量蒸馏水完全溶解后,定容至500mL,于棕色瓶中保存。(2)稀碘液:吸取原碘液2mL,加碘化钾20g,用蒸馏水溶解,定容至500mL,于棕色瓶保存。(3)标准“终点色”溶液准确称取氯化钴40.2439g、重铬酸钾0.4878g,加蒸馏水溶解并定容至500mL。准确称取铬黑T 40mg,加蒸馏水溶解并定容至100mL。取液80mL与液10mL混合,即为终点色。冰箱保存。(4)2可溶性淀粉溶液:称取烘干可溶性淀粉2.00g,先以少许蒸馏水混匀,倾入80mL沸水中,继续煮沸至透明,冷却后用蒸馏水定容至100mL。(需新鲜配制)(5)稀释100倍的唾液用蒸馏水漱口,以清除食物残渣,然后让唾液流入量筒并稀释100倍,混合备用。(6)0.02mol/L、pH6.8磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液:称取磷酸氢二钠45.23g和柠檬酸8.07g,用蒸馏水溶解后定容至1000mL,配好后用酸度计或精密试纸校正pH。四、操作步骤(1)将“标准色”溶液滴于白瓷板的左上角空穴内,作为比较终点色的标准。(2)在50mL的三角瓶中,加入2可溶性淀粉溶液20mL,加缓冲液5mL在37水浴中平衡约10min,加入0.5mL稀释唾液,立即记录时间,充分摇匀。定时用滴管取出反应液约0.25mL,滴于预先充满此稀碘液(约0.75mL)的调色板空穴内,当空穴颜色由紫色变为棕红色,与标准色相同时,即为反应终点,记录时间T(min)。五、计算1mL唾液淀粉酶于37、pH 6.8的条件下,1h液化可溶性淀粉的克数,称为唾液淀粉酶的活力单位。酶活力单位=(60/T202n)/0.5n 唾液淀粉酶稀释倍数60 1h(60min)0.5 吸取待测唾液淀粉酶的量(mL)2淀粉浓度20 2可溶性淀粉溶液的量(mL)T 反应时间(min)六、注意事项1. 全部时间应该控制在22.5min,否则应改变稀释倍数,重

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论