高考生物总复习 第六章第2节 DNA片段的扩增 PCR技术能力提升（含解析）中图版选修1.doc

2013年高考生物总复习 第六章第2节 dna片段的扩增 pcr技术能力提升（含解析）中图版选修11.dna的复制需要引物，其主要原因是()a可加快dna的复制速度b引物可与dna母链通过碱基互补配对结合c引物的5端有助于dna聚合酶延伸dna链ddna聚合酶只能从3端延伸dna链解析：选d。dna的两条链是反向平行的，为了明确地表示dna的方向，通常将dna的羟基(oh)末端称为3端，而磷酸基团的末端称为5端。dna聚合酶不能从5端开始合成dna，而只能从3端延伸dna链。因此，dna复制需要引物。当引物与dna母链通过碱基互补配对结合后，dna聚合酶就能从引物的3端开始延伸dna链，dna的合成方向总是从子链的5端向3端延伸。2.下列有关pcr的描述不正确的是()a是一种酶促反应b引物决定了扩增的特异性c扩增产量为y(1x)nd扩增对象是氨基酸序列解析：选d。pcr是一种体外迅速扩增dna片段的技术，它以极少量的dna为模板，以四种脱氧核苷酸为原料，在引物作用下使dna聚合酶从引物的3端连接脱氧核苷酸，短时间迅速复制上百万份的dna拷贝，其扩增产量为y(1x)n，y代表dna片段扩增后的拷贝数，x表示平均每次的扩增效率，n代表循环次数。3.(2012长安一中高二检测)用于pcr的引物长度通常为2030个核苷酸，是一小段()adna brnacdna或rna d双链dna解析：选a。用于pcr的引物是一小段dna(单链)，细胞内dna复制的引物，一般为rna。4.pcr利用了dna热变性的原理，pcr仪实际上是一种能自动调控温度的仪器，对pcr过程中“温度的控制”的说法中错误的是()a酶促反应需要高的温度，是为了确保模板是单链b延伸的温度必须大于复性温度，而小于变性温度cdna聚合酶不具热变性，要用耐高温的聚合酶ddna解旋酶不具热变性，为了确保模板是单链解析：选d。pcr是一种体外dna扩增技术。dna双链的解开不需要解旋酶，靠高温使其变性，双螺旋结构解体，双链分开，延伸时，在耐高温的dna聚合酶的作用下根据碱基互补配对原则合成新的dna，因此延伸的温度要大于复性温度小于变性温度。5.pcr实验中使用的微量离心管、吸头、缓冲液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是()a反复洗涤 b外源dna污染c高压蒸汽灭菌 d在20 储存解析：选c。通过对pcr实验中所用仪器和试剂进行高压蒸汽灭菌，可以避免外源dna等因素的污染。6.dna扩增过程中，dna片段经若干次扩增，与其数目的理论值变化相符的图是()解析：选c。pcr反应中dna的扩增数目和生物体内的dna复制是类似的，即1个dna分子复制一次，变为2个，复制2次，产生4个dna分子，呈指数扩增，开始有一个dna分子为模板，经过n次复制后得到的dna分子的数量为2n，与曲线c相符合。7.在pcr实验操作中，下列说法不正确的是()a在微量离心管中添加各种试剂时，只需一个吸头b离心管的盖子一定要盖严，防止液体外溢c用手轻弹离心管壁的目的是使反应液充分混合d离心的目的是使反应液集中在离心管底部，提高反应效果解析：选a。在微量离心管中添加各种试剂时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸头必须更换，确保实验的准确性；离心管的盖子一定要盖严，防止实验中脱落或液体外溢；离心10 s的目的是使反应液集中在离心管底部，提高反应效果。8.(2012南通一中高二检测)一个由15n标记的dna分子，放在没有标记的环境中培养，利用pcr循环5次后标记的dna分子占总数的()a1/10 b1/5c1/16 d1/25解析：选c。dna的复制是半保留复制，其特点是：新形成的dna双链，一条来自亲代dna分子的母链，另一条是新合成的子链。在没有标记的环境中培养，不论经过多少次复制，最终标记的两条链始终分别存在于两个dna分子中，这样经过n次循环后，标记的dna分子占总数的2/2n，即1/2n1。taq dna聚合酶由水栖高温菌分离而得。其生长适宜温度为70 75 。回答下列问题：(1)用taq dna聚合酶代替一般的dna聚合酶是使pcr普及应用的关键。因为普通的酶不能耐受95 时使双链dna变性的温度，因此，每次循环都要_，taq dna聚合酶的发现和应用解决了上述问题，提高了pcr的效率，使pcr技术趋向_。(2)pcr反应扩增dna片段时，_决定了扩增片段的长短。(3)若加入的模板是两个相同的dna分子，如果只想要“拷贝”这两个长长的dna分子中“特定区间”，在其他条件均理想时，经过三十次循环，理论上能获得_个“特定区间”片段。解析：普通dna聚合酶在dna变性温度条件下失活。因此，必须循环一次更换一次新酶才能保证dna复制顺利进行，而taq dna聚合酶在95 的dna变性条件下不会失活，故可以反复利用，解决了pcr反应连续扩增dna片段的关键因素。dna聚合酶只能从两引物的3端开始连接脱氧核苷酸，是dna片段延伸的起始位点，两引物的5端决定了扩增产物dna片段终点。每个dna分子中“特定区间”经过30次pcr反应后理论上可获得230个“特定区间”，其中两个位于dna分子的两条链上，不是“特定区间”片段。故两个dna经30次pcr循环后获得的“特定区间”片段理论上有23024。答案：(1)加入新酶自动化(2)两个引物(3)23024pcr是一种体外迅速扩增dna片段的方法，用于放大特定的dna片段，数小时内可使目的基因片段扩增到数百万个拷贝的分子生物学技术。pcr需要模板dna、引物、脱氧核糖核苷酸和dna聚合酶等条件。下图为模板dna分子及2种引物，请回答相关问题：(1)pcr的全称是_。pcr与体内dna复制的不同之处主要表现在温度环境的不同，在pcr中先用95 高温处理的目的是_；而这一过程中在细胞内是通过_实现的。(2)在pcr技术中所需要的引物实质上是一种_。请在图中绘出引物结合的位置。(3)若将1个dna分子拷贝10次，则需要在缓冲液中至少加入_个引物。(4)dna子链复制的方向是_，这是由于_。解析：本题考查考生对pcr技术的理解，属于知识识记和理解层次的考查，符合高考对选修内容考查的特点。pcr技术又称多聚酶链式反应，在pcr中先用95 高温处理的目的是使dna分子中的氢键断裂，两条链解开，即使dna分子变性。引物是一种单链dna或rna分子，它能与解开的dna母链的3端结合，为dna聚合酶提供吸附位点，使dna聚合酶从引物的3端开始连接脱氧核苷酸，从而决定了dna子链复制的方向是从5端到3端。在dna分子扩增时，需要2种引物，由于新合成的子链都需要引物作为复制的起点，故所需的引物数目等于新合成的dna子链数目，即221022112个。答案：(1)多聚酶链式反应使dna变性(使dna的两条链解开)解旋酶的催化(2)单链dna或rna分子，见右图(3)2112(4)5端到3端dna聚合酶只能从引物的3端拼接单个脱氧核苷酸分子1.dna体外扩增技术的反应过程称为聚合酶链式反应(pcr)。2pcr过程需要的引物是人工合成的dna单链，其长度通常为2030个脱氧核苷酸。pcr过程中dna的解旋是通过对反应温度的控制来实现的。3在pcr过程前，