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2013年高考生物总复习 第六章第2节 dna片段的扩增 pcr技术基础测试(含解析)中图版选修11.在实验室内模拟生物体内的dna复制,需要哪些条件()酶游离的脱氧核苷酸atpdna分子引物trna适宜的温度适宜的酸碱度abc d解析:选d。在实验室内模拟dna复制时,需要dna聚合酶催化合成dna子链;四种脱氧核苷酸为合成子链的原料;dna母链为dna复制的模板;还需要引物;还有适宜的温度,适宜的酸碱度等。2.标准的pcr过程一般分为变性、复性、延伸三大步,这三大步需要的温度依次是()a95 、55 、72 b72 、55 、95 c55 、95 、72 d80 、55 、72 解析:选a。当温度在95 时,双链dna解旋为单链,称之为高温变性;当温度下降到55 时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链dna结合称为低温复性;当温度上升到72 时,溶液中的四种脱氧核苷酸(a、t、c、g)在taqdna聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的dna链,称为延伸。3.如图表示pcr扩增的产物,请分析它是哪次循环的产物()a第一次循环 b第二次循环c第三次循环 d第四次循环解析:选a。在pcr反应中以引物为标记,第一次循环时,以加入的dna为模板,两条dna链可分别由引物和引物与其结合,并在dna聚合酶的作用下延伸,所以,形成的每个子代dna中只有一种引物。从第二次循环开始,第一次产生的dna分子又可作为模板参与反应,形成的dna分子两端都含有引物。4.(2012银川一中高二检测)关于pcr技术的应用,错误的一项是()a古生物学、刑侦破案、dna序列测定b诊断遗传病、基因克隆、古生物学cdna序列测定、基因克隆、刑侦破案d诊断遗传病、合成核苷酸、dna序列测定解析:选d。pcr技术在医学上用于遗传病的基因诊断、基因克隆、dna序列测定,法医上用于刑侦破案,古生物学上用于生物化石样品分析。pcr技术是以4种脱氧核苷酸为原料,合成双链dna的过程,pcr技术不能合成核苷酸。5.taq聚合酶的热稳定性是该酶用于pcr的前提条件,也是pcr技术能迅速发展和广泛应用的原因。taq聚合酶还具有逆转录性,其作用类似于逆转录酶。taq聚合酶表现为mg2依赖,该酶的催化活性对mg2浓度非常敏感。测定结果为mgcl2浓度在2.0 mmol/l时该酶催化活性最高,此浓度能最大限度地激活taq聚合酶的活性,mg2过高就会抑制酶活性,因此mgcl2的浓度在不同的反应体系中应适当调整,优化浓度。(1)从材料可知,影响pcr反应的因素除引物、反应温度和taq聚合酶外,还应有_。(2)taq聚合酶的作用是_,且只能由_端开始。(3)“pcr”与人体内的dna复制相比,有何不同之处?_。(4)实验室中微生物的筛选,应用了taq细菌能在热泉中生长的原理,人为提供有利于目的菌株生长的条件:_、_、_等。解析:pcr技术所需条件是模板、引物、原料、dna聚合酶和mg2,同时需要恰当的温度及缓冲液维持近中性酸碱度。pcr是体外扩增模板dna,与细胞内的dna复制不同,需要耐高温的dna聚合酶,通常用taq聚合酶,且引物为dna。taq聚合酶是从生活在热泉中的taq细菌中提取出来的、一种耐高温的dna聚合酶。
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