无菌知识与无菌操作注意事项.doc

无菌知识与无菌操作注意事项目录 1、 微生物基本知识 2、 无菌的基本知识 3、 GMP中关于洁净区管理的基本要求 4、 洁净区人员卫生规范 5、 洁净区人员行为规范 6、 具体工作中的注意事项 具体内容 1、微生物基本知识 1.1微生物包括细菌、真菌、放线菌、蓝线菌、立克次氏体、支原体、衣原体、病毒。 1.2细菌的特点体积小、面积大 吸收多、转化快 生产旺、繁殖快 适应性强 分布广、种类多 1.3细菌的形态 1球菌 2杆菌 3螺旋菌 1.4细菌的结构 1基本结构细胞壁、细胞膜、细胞核、核质体 2特殊构造鞭毛、菌毛、芽孢、美膜、气泡 1.5芽孢某些细菌在其生产的一定阶段于营养细胞内形成一个圆形或卵圆形的内生孢子是细菌的休眼体。 特点含水量低、壁原而致密对热、化学剂、辐射、压力、抵抗力强。 1.6常见污染药物的菌体都是一些生命力强的菌体如葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、枯草杆菌以及一些霉菌等。 2、无菌的基本知识 按照无菌的最严格的定义只有完全没有活微生物的样品才认为是无菌的。但由于检查有一定的限度它属于小概率事件不可能破坏所有的药品所以对于整批药品而言实际上不能证明绝对无菌。因此声称无菌的一批产品的无菌情况是按照概率来定义的。所以不能仅靠无菌检查来保证产品的无菌而应通过全过程的无菌管理来保证产品的无菌。 我公司生产的产品主要用于注射剂的原料因此要严格控制其无菌和澄明度。如果使用了染菌的针剂若是非致病菌可能回引起局部的炎症而若是致病菌就可能会引起相应的疾病染菌严重的药品若用于输液会引起脓毒症、败血症甚至死亡。较大的微粒可造成局部循环障碍引起血管栓塞微粒过多造成局部堵塞和供血不足组织缺氧而产生水肿和静脉炎异物侵入组织由于巨噬细胞的包围和增殖引起的肉芽肿。此外威力还可引起过敏反应、热原样反应。 灭菌与消毒 灭菌方法 物理灭菌法干热灭菌、湿热灭菌、辐射灭菌、过滤除菌 化学灭菌法化学药剂杀菌法、气体灭菌法 2.1化学消毒 消毒剂名称 使用浓度 作用机制 应用范围 苯酚 3-5 蛋白质变性 地面、喷雾 乙醇 75 蛋白质变性、损伤细胞膜、脱水、溶解类酯 皮肤、器械 甲醛 0.510 破坏氢键和氨基 熏蒸 新概念 3.3 蛋白质变性 皮肤、环境、设施 新洁尔灭 0.050.1 蛋白质变性破坏细胞膜 皮肤、粘膜、手术器械 万福金安 10 氧化膜、酶系统、DNA 表面、环境 环氧乙烷 600mg/L 烷基化破坏酶 固体、粉末灭菌 2.2物理灭菌 紫外线是一种比可见的紫外光波长还要短的不可见电磁波它的波长范围是100380nm微生物体内都含有核酸而核酸吸收紫外线照射的辐射能后可引起光化破坏作用从而杀死微生物。注意紫外线不能直接照射在皮肤上如照射时间较长会出现皮肤变黑和烧灼等现象如果眼睛受到紫外线辐射则会得结膜炎后角膜炎。 由于紫外线的杀菌只限于被照射物的表面不能透入溶液或固体物质的深部因此最适宜做空气杀菌。 3、GMP中关于洁净区管理的基本要求 3.1、洁净室区内人员数量应严格控制。其工作人员包括维修、辅助人员应定期进行卫生和微生物学基础知识、洁净作业等方面的培训及考核对进入洁净室区的临时外来人员应进行指导和监督。 3.2、洁净室区与非洁净室区之间必须设置缓冲设施人、物流走向合理。 3.3、100级洁净室区内不得设置地漏操作人员不应裸手操作当不可避免时手应及时消毒。 3.4、10,000级洁净室区使用的传输设备不得穿越较低级别区域。 3.5、100,000级以上区域的洁净工作服应在洁净室区内洗涤、干燥、整理必要时应按要求灭菌。 3.6、洁净室区内设备保温层表面应平整、光洁不得有颗粒性物质脱落。 3.7、洁净室区内应使用无脱落物、易清洗、易清毒的卫生工具卫生工具要存放于对产品不造成污染的指定地点并应限定使用区域。 3.8、洁净室区在静态条件下检测的尘埃粒子数、浮游菌数或沉降菌数必须符合规定应定期监控动态条件下的洁净状况。 3.9、洁净室区的净化空气如可循环使用应采取有效措施避免污染和交叉污染。 3.10、空气净化系统应按规定清洁、维修、保养并作记录。 4、洁净区人员卫生规范 4.1.一般生产生产人员要有健康档案每年至少体检一次。 传染病、皮肤病患者和体表有伤口者不得从事直接接触药品的生产。 要经常洗澡、理发、刮胡须、修剪指甲、勤换衣服、保持个人清洁。 不得裸手直接接触药品。 4.2 十万级区 除符合4.1的要求外还应符合 直接接触药品工序的操作人员不得化妆佩带饰物与手表眼镜要进行相应的清洁后方能带入。按规定洗手、更衣戴帽应不露头发。工作服、鞋、帽不得穿离本工作区。 仅限于该区域的生产人员和经批准的人员进入不得串岗尽量减少参观人员。 出入本区人员应严格遵守净化程序。 4.3万级区及百级区 除符合4.1、4.2的要求外还应符合 操作人员不得有外伤、炎症、瘙痒症。每班必须换内、外衣一次。 百级区不得裸手操作手部要半小时消一次毒。 本区操作人员数量要控制到最低限度少走动、动作要轻、缓严禁跑、跳、打闹、摘口罩、挽袖子在非坐具及地面上坐卧等。 本区域的工作人员包括维修、辅助人员应定期进行卫生和微生物学基础知识洁净作业等方面的培训及考核对进入本区的临时外来人员要进行详细的指导和严格的监督5、洁净区人员行为规范 5.1只能用无菌工具接触无菌药品。无菌工具比如铲子只能用于处理无菌原料。两次使用之间无菌工具应放在无菌容器中。如果有必要这些无菌工具在操作过程中应及时更换。在最初的灭菌后无菌手套应经常消毒以减少污染机率。人员不得直接接触无菌药品、容器、挡板、关键的表面。 5.2缓慢而又谨慎的操作。剧烈运动或操作会在控制区产生不能被接受的空气湍流。这种操作会破坏无菌环境对洁净区的设计参数和控制是一个挑战。在洁净区工作要遵循这个原则即缓慢小心的操作。 5.3人的身体不能进百级层流罩。百级层流罩设计用于保护设备表面、包装容器和产品无菌在无菌区域人员不能破坏百级层流罩的单向流向。 5.4采取必要的操作方式以保证产品的无菌为了保持附近无菌原料的无菌性正确的无菌操作应当是从侧面接触药品而不是从上面接触药品在垂直的百级层流罩中同样不能在直接面对无菌生产线的区域内说话。 6、具体工作中的注意事项 6.1 卫生要求 厂房设施 地面、门窗、玻璃、墙面、顶棚、灯具洁净完好无浮土、粉尘、脏物、水迹 生产车间全部门窗要关闭。防止昆虫进入。 更衣室、浴室及厕所的设置不得对洁净室(区)产生不良影响。 设 备 设备管道管线排列整齐设备表面无锈迹保温完好无跑、冒、滴、漏设备、管道及容器具、清洁工具应做到光洁无污垢 管道与设备标识要完整。 空调进风口、排风口及其他附属装置洁净无尘 设备、容器、工具定置放置并符合清洁标准放置时不应影响气流的流向。 卫生洁具 1、不同级别的洁净区的卫生洁具要分别存放不可混放。 2、生产区不得有非生产物品、个人杂物等。 6.2防止异物 因为产品是直接注射入体内故对异物要求很严格。因此在许多易引入异物的地点操作时应细心操作清洗设备时注意死角将异物和残留物完全清洁掉 罐开盖时应轻拿轻放避免碰撞掉入异物 对无菌室的工具使用前后一定要清点数目尤其是分装岗位避免丢入产品中 生产分装前的清场工作要清理与本批无关的东西如其它批产品、无关的工器具、塑料袋、标签等等。 6.3洁净区无菌环境的保持 人是最大的污染源。注意保持无菌室内人数不能太多。 注意在随时关门因为在洁净区内不同级别之间会保持一定的压差。 递物柜不得双门对开等。 6.4包装操作 注意双人复核 清点每批的数量 包装线清场注意其它批次的产品及包装标识材料 包装时注意检查封口严密性 打印标签要注意批号、生产日期、有效期等 所有的动作都应有相应的记录。 6.5万级生产区域各操作间的卫生管理 万级生产区域各操作间的卫生管理本规程分设备清洗和房间清洗两部分。设备清洗按相应清洗规程进行操作。 设备清洗设备应定期清