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果寡糖对鲤鱼生长性能及消化酶的影响摘要：试验组鲤相对增重率与对照组相比均有显著提高，而饲料系数显著降低。鲤鱼肠道及肝胰脏蛋白酶最适pH值为62，淀粉酶最适pH值为70，脂肪酶最适pH值为70。在一定添加范围内，果寡糖可以促进鲤鱼生长，提高鲤鱼肝胰脏和肠道蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的活性。其适宜添加量为13 kg。关键词：鲤鱼；果寡糖；生长性能；消化酶活力果寡糖(Fructooligaccharides，FOS)又称低聚糖、遮果三糖族低聚糖等，天然存在的果寡糖是由微生物或植物中具有果糖转移活性的酶作用而产生的，目前生产的果寡糖是将微生物中呋喃苷酶或果糖转移酶作用于蔗糖而制备获得。果寡糖能够促进胃肠道理想微生物生态形成，促进动物生长，并具有无污染、无残留的优点。目前已有较多研究报道果寡糖作为一种抗生素的替代品在猪、牛、鸡、兔等畜禽生产中取得了良好的应用效果，但在水产养殖中的报道甚少，以鲤鱼为研究对象尚未见报道。因此，本试验选择了以鲤鱼为试验动物果寡糖为饲料添加剂，探讨果寡糖对鲤鱼生产性能的影响以及不同pH对鲤鱼消化酶活力的影响。1 材料与方法 11 材料来源果寡糖由高新技术有限责任公司生产，市售。试验鲤鱼种由安徽省定远县解放渔场提供。饲料原料由联合公司生产，饲料配方自制。基础日粮配方见表1。 表1 基础饲料组成和主要营养成分原 料 质量分数% 营养成分 质量分数%进口鱼粉 18 粗蛋白 29.69豆 饼 40 粗脂肪 6.26玉 米 25 粗纤维 2.28面 粉 14 粗灰分 2.28玉米油 2 矿物质预混剂 1 合计 100 12 试验时间与地点试验在安徽技术师范学院淡水养殖实验室进行，水族箱的规格为12 m06 m045 m。鱼种在分箱饲养前进行消毒，用50 rngL的高锰酸钾溶液浸洗10min，浸洗后的鱼种逐个称重，并分别将其放入水族箱中暂养。15 d后鱼种进入正常摄食试验从2004年4月15日开始至5月15日结束。13 试验设计 采用单因子试验设计进行养殖试验。对照组投喂基础饲料，14试验组分别投喂试验饲料(在基础饲料基础上分别添加03、08、13、18 gl【g的果寡糖配合而成)。试验选取相同生长阶段、体格健壮、体质量约120 g的2龄鲤鱼种30尾，每组6尾。14 饲养管理 在整个养殖期间水深保持在30 crrl左右，水温控制在(252)。投饲采取“四定”原则日投饵率2 4。投饵2060 mln后观察鲤鱼的摄食情况，若摄食缓慢或60 min后还有剩余饵料，下次投饵量适当减少，尽量使所投的饵料基本吃完。每隔2 d加入已充分曝气的自来水，且水温与原来箱内的水温一致，每次换水量约为总量的13。试验过程中24 h不断充气，以保持水质的清新、溶氧充足。15 测定项目与方法151 生产性能指标测定 试验结束前停食12 h，然后逐个称重并根据下列公式计算生产性能指标。相对增重率=(wTw0 )w0 100均净增重g=(WTW0)T饲料系数(FCR)=F(WT 一W0 )W0一试验开始时体质量g ，WT- 试验结束时体质量g 、T-试验时间d，F_一饲料摄入量g。152 酶活力测定1521 酶液制备 试验结束并禁食12 h后，在冰块上解剖活鱼取其肝胰脏和肠，然后剔除脂肪并剖开，用冷却蒸馏水冲洗内壁，滤纸吸干，分段称重。将肠分为前肠(第1个转折前)、中肠(回旋部分)、后肠(回旋后到泄殖腔前)。把样品剪碎，用电动玻璃匀浆器匀浆，用体积分数002盐酸稀释至10 mL，在温度4 、4 000 rrain下离心30 min，取上清液并定容至50 mL，24 h内测毕。1522 酶活力测定蛋白酶活力测定采用福林一酚试剂法1。蛋白酶活力单位定义：1 g新鲜组织在最适pH值、底物酪蛋白质量浓度5 mgmL、温度(371)条件下，保温15 n1in，每1 min水解酪蛋白产生1 l 酪氨酸为1个活力单位。淀粉酶活力测定采用淀粉一碘显色法，淀粉酶活力单位定义：在温度(351) 、pH值70条件下，100 n1L酶液在30 min内完全水解10 mg淀粉为1个活力单位。脂肪酶活力测定采用聚乙烯醇橄榄油乳化液水解法_l川，脂肪酶活力单位的定义：在一定温度条件下，脂肪酶水解脂肪每1 min产生1旭脂肪酸的酶量，为1个脂肪酶活性单位。每组取样3尾，每样品重复测定3次，求出平均值。153 pH系统设置 采用02 molL磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液，在pH 3078范围内，以08为幅度。共设置7个梯度。分别在各pH值条件下测定酶活力。16 数据处理 采用EXCEL处理试验数据，用SPSS统计程序软件进行多重比较。2 结果与分析21 果寡糖对鲤鱼生产性能指标的影响经过30 d的饲养。鲤鱼的生长性能情况见表2。添加果寡糖的各试验组鲤鱼相对增重率与对照组相比均有显著提高(P0.05)，而饲料系数显著降低(P005)。试验第3组的净增重最大，达到17.40 g；饲料系数最低，为2.05，比对照组降低25.72。试验组饲料系数与对照组相比差异显著(P0.05)。 表2 果寡糖对鲤鱼生产性能指标的影响 组 别 对照组 实验 实验 实验 实验 1组 2组 3组 4组果寡糖/gkg 0 0.5 0.8 1.3 1.8放养/尾 6 6 6 6 6收获/尾 6 6 6 6 6成活率/% 100 100 100 100 100初均重/g 129.372.80 131.304.39 130.8012.70 129.038.55 131.7015.82 终均重/g 140.235.69 145.476.65 146.9115.42 146.438.94 145.6217.52均净增重/g 10.86 14.17 16.11 17.40 13.92相对增重率/% 8.39d 10.79c 12.31b 13.48a 10.55c饲料系数 2.76a 2.34bc 2.21bc 2.05c 2.45b 22 果寡糖及pH对鲤鱼蛋白酶活力的影响 在温度37、pH值为3078(梯度为08)时，果寡糖对鲤鱼肠道蛋白酶和肝胰脏蛋白酶活力的影响见图l和图2。使用果寡糖饲料添加剂能够明显增强鲤鱼肠道蛋白酶活力和肝胰脏蛋白酶活力其中试验3组肠道和肝胰脏蛋白酶活力最强，其次是试验2组，最弱的是对照组。不同处理组的曲线在不同pH下的变化趋势基本一致。在pH值低于54时酶活力较弱，随着pH值的逐渐升高，蛋白酶的活力同步增强，在62时达到最高峰，超过62后蛋白酶活力随pH值升高而下降。鲤鱼的肠道及肝胰脏蛋白酶活力的最适pH值为62。蛋白酶活力/U 1200 1000 800 600 400 200 0 3.0 3.8 4.6 5.4 6.2 7.0 7.8 pH值 -对照组 -试验1组 -试验2组 -试验3组 -试验4组 图1 果寡糖及pH对鲤鱼肠道蛋白酶活力的影响 蛋白酶活力/U 800 600 400 200 0 3.0 3.8 4.6 5.4 6.2 7.0 7.8 pH值 -对照组 -试验1组 -试验2组 -试验3组 -试验4组 图2 果寡糖及pH对鲤鱼肝胰脏蛋白酶活力的影响23 果寡糖及pH对淀粉酶活力的影响由图3和图4可知，在适宜pH范围内，不同添加剂量的果寡糖都能够提高鲤鱼淀粉酶的活力，但随pH值升高淀粉酶活力升高较显著，尤其以试验3组效果最明显其次是试验2组，对照组最弱。不同处理组的曲线在不同pH值下的变化趋势总体是一致的，其中pH为70时，鲤鱼肠道和肝胰脏淀粉酶活力达到最大。淀粉酶活性力/U 800 600 400 200 0 3.0 3.8 4.6 5.4 6.2 7.0 7.8 pH值 -对照组 -试验1组 -试验2组 -试验3组 -试验4组 图3 果寡糖及pH对鲤鱼肠道淀粉酶活力的影响 淀粉酶活性力/U 800 600 400 200 0 3.0 3.8 4.6 5.4 6.2 7.0 7.8 pH值 -对照组 -试验1组 -试验2组 -试验3组 -试验4组 图4 果寡糖及pH对鲤鱼肝胰脏淀粉酶活力的影响24 果寡糖及pH对鲤鱼脂肪酶活力的影响由图5和图6可知，在适宜pH范围内，不同添加剂量的果寡糖都能够增强鲤鱼脂肪酶的活力，其中试验2组肠道脂肪酶活力最高，试验3组肝胰脏脂肪酶最高，对照组最低。在pH值降低或升高时，鲤鱼肠道脂肪酶活力下降较快，而鲤鱼肝胰脏脂肪酶活力下降相对较慢，不同处理组的曲线在不同pH值下的变化趋势大体是一致的。鲤鱼肠道及肝胰脏脂肪酶活力在pH70时达到最大。 脂肪酶活力/U 800 60040020003.0 3.8 4.6 5.4 6.2 7.0 7.8 pH值 -对照组 -试验1组 -试验2组 -试验3组 -试验4组 图5 果寡糖及pH对鲤鱼肠道脂肪酶活力的影响 脂肪酶活力/U 1200 1000 800 600 400 200 0 3.0 3.8 4.6 5.4 6.2 7.0 7.8 pH值 -对照组 -试验1组 -试验2组 -试验3组 -试验4组 图6 果寡糖及pH对鲤鱼肝胰脏脂肪酶活力的影响3 讨论31 果寡糖对鲤鱼生长性能的影响 大量研究表明，果寡糖可提高仔猪日增重和饲料转化率。Houdijk发现，猪对果寡糖有一个适应期，用果寡糖饲喂的前3周对猪生长有抑制作用，而后3周则有促进作用，而且弥补了前3周的损失。据报道，添加质量分数0.05果寡糖能够显著提高雏鸡增重和饲料转化率(P0.05) 。木源稔等将低聚果糖(FOS)应用于鱼饲料中，发现低聚果糖能够促进鱼类生长，降低粪便中氨的排放量 。在本次试验中，果寡糖饲料能够显著提高2龄鲤鱼种的相对增重率，降低饲料系数。促进其生长。可能是果寡糖通过促进小肠中双歧杆菌和乳酸杆菌的增殖而抑制梭状杆菌等有害菌的增殖，促进消化酶的分泌并抑制消化酶的降解，从而提高肠道内容物中消化酶的活性。消化酶活力提高意味着分解饲料的速度加快，胃肠蠕动加强，摄食时间缩短，进而促进生长。试验3组的相对增重率最高饲料系数最小，养殖效果最好，果寡糖适宜添加量为1.3 kg。32 果寡糖对鲤鱼消化酶活力的影响 另据报道，育肥猪日粮中添加质量分数0.5和075果寡糖可以使十二指肠内容物中总蛋白水解酶、胰蛋白酶、淀粉酶活性显著提高，果寡糖对胰脏中消化酶活性的影响不显著。报道，果寡糖可促进猪小肠中双歧杆菌、乳酸杆菌等有益菌的增殖而抑制大肠杆菌、梭状杆菌等有害菌的增殖。本试验结果，投喂不同水平果寡糖的饲料对鲤鱼消化酶活力影响不同。在饲料蛋白质总量相同的情况下，随着果寡糖添加量的增加鲤鱼的消化酶活力在提高，但超过一定量时，鲤鱼的消化酶活性反而在减弱，其中果寡糖在1.3 lg/kg水平时鲤鱼各种消化酶活力最高。其机理与促进生长性能相同。消化酶活力高低决定着鲤鱼对营养物质的消化吸收能力，从而决定其生长速度，而肠道内容物中消化酶的活性反映了酶分泌与酶降解的动态平衡。酶活性的增加主要与酶分泌增多或酶降解减少有关。双歧杆菌、乳酸杆菌及其代谢产物能够促进动物消化酶的分泌和肠道蠕动