核磁谱仪的使用程序.doc

核磁谱仪的使用程序一. 实验前的准备工作1.查看空压机是否已开？ 磁体的防尘盖是否拿开？ 2.确认谱仪内是否有核磁管？如果仪器正在进行采样，说明仪器内已有核磁管。杜绝发生放两个样品管在谱仪内的情况发生。3.仔细检查自带的样品管是否有严重的破损现象，建议用干净无破损的好管。二. 仪器操作流程（请严格按照此操作流程进行测试）1. 进入ICON-NMR 界面，选择automation 子界面，通过个人的仪器使用帐号及密码进入实验界面。2. 点击 add，出现实验设定栏，分别输入样品名、实验号、溶剂、实验项目，修改个别参数。可对一个样品设多个实验项目，如H、C、DEPT等实验项目选择的脉冲序列1H-NMRN PROTON13C-NMRN C13CPDDEPT90N C13DEPT90DEPT135N C13DEPT135COSYCOSYGPSWHSQCHSQCETGPHMBCHMBCGPNDNOESYNOESYPHSW31P-NMRN P31 or N P31CPD(去耦)3. 选择设定的实验，点击 submit, 实验标题由available变成 Quened, 对多个实验仪器自动按照顺序进行测试并存盘。4. 点击界面左上角的图标 ，再选择Start, 根据仪器的提示，在有气体出现后才把样品放进仪器。样品的放入及取出根据仪器的提示。5. 实验结束后，根据仪器的提示取出样品，点击界面左上角 ，结束automation的运行。6. 重复步骤2 5，可进行不同样品的测试。7. 所有测试实验结束后，再点击右上角的 ，关闭整个界面。根据对话框提示，选择不需要保存实验设定（连续两个NO），最后OK。8. 如何获得高分辨一维氢谱：i 样品浓度不宜太高，最好不超过10mg, 同时氘代溶剂体积以0.5ml为宜，不要太少。 ii 测试氢谱时，可以旋转样品管以提高分辨率。方法为：在自动程序进行到lock 后，在topspin界面输入命令：ro on( 即rotation on), 如状态栏中样品管上出现旋转标志，即说明样品管已旋转。9. 二维谱参数的设定： i. 所有的二维谱都不要旋转。 ii. 二维谱设定时先同一维谱一样选择适当的脉冲序列，然后在标题栏parameters中选择edit all parameters, 再修改其中的部分参数。 iii. Cosy（H-H同核相关谱）：序列 COSYGPSW在标题栏parameters中选择edit all parameters，进入参数修改界面，修改以下参数：NS = n*1（视样品量及分子量的多少，一般20mg 4次满足要求 ）；DS=16; F2 TD=2048; F1 TD=256(谱峰不拥挤时，可用128)；SW=SW1（包含所有谱峰的化学位移范围，可以不包括溶剂峰）；O1P=谱峰范围的中心位移值，即如果SW=10ppm, o1p=7ppm, 则该谱图的采样范围从2-12ppm.；参数修改完毕后，按return to ICON NMR, 回到自动操作界面，同样 submit, 然后start。 iv. HSQC（H-C异核一键相关谱），序列 HSQCETGP：在标题栏parameters中选择edit all parameters，进入参数修改界面，修改以下参数：NS = n*4（视样品量及分子量的多少，一般20mg 8次可满足要求 ）；DS=16; F2 TD=2048; F1 TD=256(谱峰不拥挤时可用128)；SW=氢谱的谱峰范围（包含所有谱峰的化学位移范围，可以不包括溶剂峰）；SW1=碳谱的谱峰范围；O1P=氢谱谱峰范围的中心位移值，即如果SW=10ppm, o1p=7ppm, 则该谱图的采样范围从2-12ppm；O2P=碳谱谱峰范围的中心位移值，即如果SW=200ppm, o1p=95ppm, 则该谱图的采样范围从-5 -195ppm；参数修改完毕后，按return to ICON NMR, 回到自动操作界面，同样 submit, 然后start。 v. HMBC（H-C异核多键相关谱），序列HMBCGPND：在标题栏parameters中选择edit all parameters，进入参数修改界面，修改以下参数：NS = n*4（视样品量及分子量的多少，一般20mg 8次可满足要求 ）； DS=16; F2 TD=2048; F1 TD=256(谱峰不拥挤时可用128)；SW=氢谱的谱峰范围（包含所有谱峰的化学位移范围，可以不包括溶剂峰）；SW1=碳谱的谱峰范围；O1P=氢谱谱峰范围的中心位移值，即如果SW=10ppm, o1p=7ppm, 则该谱图的采样范围从2-12ppm；O2P=碳谱谱峰范围的中心位移值，即如果SW=200ppm, o1p=95ppm, 则该谱图的采样范围从-5 -195ppm；参数修改完毕后，按return to ICON NMR, 回到自动操作界面，同样 submit, 然后start。 vi. NOESY（H-H同核空间相关谱），序列NOESYPHSW：在标题栏parameters中选择edit all parameters，进入参数修改界面，修改以下参数：NS = n*4（视样品量及分子量的多少，一般20mg 16次满足要求 ）; DS=16; F2 TD=2048; F1 TD=256(谱峰不拥挤时可用128)；SW=SW1（包含所有谱峰的化学位移范围，可以不包括溶剂峰）；O1P=谱峰范围的中心位移值，即如果SW=10ppm, o1p=7ppm, 则该谱图的采样范围从2-12ppm.； 在topspin的命令行中，输入D8，屏幕给出对话框，修改D