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文档简介

选修1期末考复习学案(基础知识部分)一、传统发酵技术的应用1、几种常用发酵菌种的比较菌种项目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类真核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧异养需氧异养需氧异养厌氧生产应用酿酒酿醋制作腐乳制作泡菜发酵条件前期需氧,后期不需氧一直需氧一直需氧不需氧2、果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌种及控制条件的比较 制作内容比较项目 果酒果醋腐乳泡菜所用菌种酵母菌醋酸菌主要是为毛霉乳酸菌控制条件o2的有无无氧有氧有氧无氧最适温度182530351518常温时间控制1012天78天腌制8天左右腌制10天左右其他条件封闭充气口适时充气控制盐酒用量控制盐水比例相关反应式3、果酒、果醋、腐乳和泡菜制作过程的比较及亚硝酸盐含量的检测比较项目果酒和果醋制作腐乳的制作制作泡菜并检测亚硝酸盐含量制作原理果酒:无氧呼吸果醋:有氧呼吸 多种微生物发酵泡菜制作:乳酸菌无氧呼吸亚硝酸盐检测:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与n1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料实验流程图挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵醋酸发酵果酒 果醋让豆腐上长也毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制二、微生物的培养与应用1、培养基的分类和应用划分标准培养基种类特点用途物理性质 液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂,如琼脂观察微生物的运动、分类、鉴定固体培养基加凝固剂,如琼脂微生物分离、鉴定、活菌计数化学组成天然培养基含化学成分不明确的天然物质 工业生产 合成培养基培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成) 分类、鉴定 目的用途选择培养基培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物鉴别培养基根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物注意:培养基的配方一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。2、消毒与灭菌的区别比较项目消毒灭菌条件使用较为温和的理化方法使用强烈的理化因素结果杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 适用实验操作的空间、操作者的衣服和手 微生物的培养器皿、接种用具和培养基等 常用方法煮沸消毒法(如在100,煮沸56 min)、巴氏消毒法(如在80,煮15 min);使用酒精、氯气、石炭酸等化学药剂进行消毒 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 3、三种常用灭菌方法的比较灭菌方法灭菌条件灭菌时间适用材料或用具灼烧灭菌酒精灯火焰的充分燃烧层直至烧红接种环、接种针或其他金属工具干热灭菌干热灭菌箱内,16017012 h玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等高压蒸汽灭菌100kpa,1211530 min培养基等4、微生物的纯化培养包括培养基的制备和纯化微生物两个阶段:1)培养基的制备:计算称量溶化(牛肉膏需连同称量纸溶解)灭菌倒平板(50oc)2)纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后,就可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。稀释涂布平板法:将菌液进行一系列梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。5、微生物的分离和计数(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数筛选菌株:利用选择培养基筛选菌株(以尿素为唯一氮源的培养基)。测定微生物数量的常用方法:统计菌落数目(选择30-300平板)和显微镜直接计数。土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察。(2)分解纤维素的微生物的分离实验原理(刚果红染色法)即:可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。流程:土壤取样选择培养(增加纤维素分解菌浓度)梯度稀释涂布平板(鉴别培养基)挑选产生透明圈菌落。三、植物的组织培养技术1、菊花茎的组织培养与月季的花粉培养的比较比较项目菊花茎的组织培养月季的花药培养理论依据细胞的全能性基本过程脱分化、再分化影响因素选材、营养、激素、ph、温度、光照等 选材、营养、激素、ph、温度等 比较材料选取生长旺盛的嫩枝单核靠边期的花粉(醋酸洋红法确定时期)ph5.85.8温度182225光照每日光照12h开始时不需要光照,幼小植株形成后才光照操作流程制备培养基外植体消毒接种培养移栽栽培 选材材料消毒接种和培养筛选和诱导移栽栽培选育 2、植物激素(生长素和细胞分裂素)对实验结果的影响影响因素实验结果植物激素用量生长素细胞分裂素有利于根的分化、抑制芽的形成生长素细胞分裂素有利于芽的分化、抑制根的形成生长素细胞分裂素促进愈伤组织的形成使用顺序先生长素,后细胞分裂素有利于细胞分裂,但细胞不分化先细胞分裂素,后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高四、酶的研究和应用酵母细胞的固定化(1)常用方法 包埋法:适合于固定化细胞(多空载体:明胶、琼脂、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺)适用于酶的固定 化学结合法物理吸附法(2)固定化酶、固定化细胞的比较方法优点缺点固定化酶既能与反应物接触,又能与产物分离;可以反复利用不利于催化一系列的酶促反应固定化细胞成本低、操作容易反应物不易与酶接近,尤其是大分子物质,反应效率下降(3)制备固定化酵母细胞:酵母细胞活化配置cacl2溶液配制海藻酸钠溶液酵母细胞与海藻酸钠混合固定化酵母细胞(滴加混合液至cacl2溶液溶液中形成凝胶珠)五、dna和蛋白质技术 植物有效成分提取1、提取方法总结提取物质提取方法提取原理步骤dna盐析法dna在不同浓度的nacl溶液中溶解度不同;dna不溶于酒精,但某些蛋白质则溶于酒精溶解在2mol/l的nacl溶液中;加水稀释至0.14mol/lnacl溶液使dna析出过滤;加入冷却酒精析出。血红蛋白凝胶色谱法根据相对分子质量的大小样品处理;粗提取;纯化;纯度鉴定sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳法蛋白质分子大小玫瑰精油水蒸气蒸馏法利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来水蒸气蒸馏;分离油层;除水过滤橘皮精油压榨法通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油石灰水浸泡、漂洗;压榨、过滤、静置;再次过滤胡萝卜素萃取法使提取物溶解在有机溶剂(石油醚)中,蒸发后得到提取物粉碎、干燥;萃取、过滤;浓缩2、dna粗提取与鉴定哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核,不适于作dna提取的材料,但却是提取血红蛋白的理想材料。实验过程中两次用到蒸馏水:第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出dna,第二次目的是稀释nacl溶液。实验中用到洗涤剂是用于瓦解细胞膜,冷酒精是用于提取杂质较少的dna白色乳状丝状物。鉴定dna加入二苯胺试剂并沸水浴加热,观察是否出现蓝色。3、血红蛋白的提取和分离操作程序样品处理:红细胞的洗涤(除去血浆蛋白等杂质)、血红蛋白的释放(使红细胞胞破裂,血红蛋白释放出来)、分离血红蛋白溶液(经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来)。粗分离透析:除去样品中分子量较小的杂质。纯化:一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。(分子量大的移动速度快)纯度鉴定:一般用sds聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,来鉴定蛋白质的纯度。4、植物有效成分的提取方法蒸馏法:芳香油具有挥发性,把含有芳香油的花、叶等放入水中加热,水蒸气能将挥发性较强的芳香油携带

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