REACH法规 第四卷译稿-8.doc

B.5.急性毒性（眼部发炎）1.测定方法1.1.引言见描述部分B(A)。1.2.定义见描述部分B(B)。1.3.参考物质无。1.4.测定方法原理最初考虑在可能产生严重反应的情况下，仔细考虑任一物质的所有的可获得的资料，以减少对此物质的测定步骤。以下信息将有助于这种考虑。1 物理化学特性和化学反应性。如果预期到有严重损伤，强酸或强碱物质就不必测定，例如对眼睛而言，pH小于2或大于11.5的物质。应考虑酸或碱产生的作用。2 来自有根据的选择性研究结果；有潜在腐蚀性或严重刺激性的物质不能用于进一步的眼睛感染实验，估计在这个实验中，这样的物质会使眼睛产生严重的反应。3 皮肤发炎研究的结果。在皮肤发炎研究中被证明对皮肤有明显腐蚀或刺激作用的物质不能用于眼睛感染的进一步实验，估计这样的物质会对眼睛产生严重的后果。将一份测定物涂于每一只实验动物样品的一只眼睛，另一只未处理的眼睛用于提供核对信息。在特定的时间段评估和划分发炎的等级，同时作进一步的描述完整评价所产生结果的。要有足够的观察时间完成对可消除和不可消除反应的观察。表现出强烈持久痛苦的动物应被人道宰杀。1.5质量标准无1.6测定方法描述1.6.1.预备在测定开始24小时前检查每一只被选定做测定的实验性动物样品的双眼。眼睛感染的，有缺陷的，或原有眼角膜损害的动物不能使用。1.6.2.测定条件1.6.2.1实验动物尽管可以使用过多种实验性动物，但建议实验时使用健康的白公兔。1.6.2.2动物数量如果预期到会产生显著的作用，此单一动物实验需经慎重考虑。如果用所述方法进行实验，其中一只兔子产生的反应表明测定物会引起严重的发炎（可消除的）或腐蚀（不可消除的），对随后其他动物眼部发炎的进一步测定就不必进行。特殊情况下，对附加的动物样品的进一步测定会有利于特定方面的研究。以防万一除了单一-动物测定之外，实验至少使用3只动物。附加的动物可能要用于弄清不确定的结果。1.6.2.3.试剂用量测定的液体用量为0.1毫升。测定的固体，浆糊和微粒物质用量为0.1立方厘米或约0.1克（使用量需记录）。如果测定物质是固体或颗粒状的，需将其碾碎成均匀粉末。将粉末轻轻压紧后测其体积，例如轻拍测定容器。因为测定物是装于喷雾器内，装入的液体应先喷出0.1毫升，再滴入眼睛。1.6.2.4.观察周期观察周期的持续时间不应严格固定。应该要有足够的时间观察可消除和不可消除的反应结果，但通常不超过注射后的21天。1.6.3.实验步骤动物应被单独关入笼中。轻轻拨开下眼皮，将测定物注入每只动物样品的一只眼睛的结膜囊。然后轻轻合并眼帘约1秒钟以防注射液流出。未经处理的另一只眼用做对比观察。如果预期到注射物会引起较大痛感，可以在注入测定物前对动物进行局部麻醉。局部麻醉剂的种类，浓度和使用时间需慎重考虑，以确保不会因其使用而使测定物产生明显不同的实验结果。测定眼也应实行局部麻醉。注入测定物的24小时内不可清洗实验动物样品的眼睛。如果认为可行，24小时后可对实验动物样品的眼睛进行清洗。由于测定中的部分物质会产生刺激，需用兔子作附加实验，将测定物注入兔子眼睛后立刻进行清洗并描述结果。在这个情况下，建议使用3只兔子。注射半分钟后，清洗半分钟，使用的液体量和速度应不会引起伤害。1.6.3.1.观察和评级在注射后1，24，48，72小时检查动物样品的眼睛。如果72小时后动物眼睛并无任何受损，实验可结束。如果有持久的眼部受损或其他眼部发炎，则要进行额外的观察来确定受损的程度和其是可消除的还是不可消除的。对角膜，虹膜和眼球结膜所观察到的任何受损应作记录和实验结果报告。眼部受损的等级应在实验时作记录。（眼睛的反应等级受制于各种不同的解释。因此需要使用眼睛受损程度的等级说明指南。）使用显微镜，手提缝灯，活组织显微镜或其它合适的仪器有利于实验结果的观察。记录了24小时的观察结果后，所有兔子的眼睛应用荧光素辅助实验作进一步检查。2.实验数据实验数据应制成表格的方式，列出每一只动物在指定观察时间的眼睛受损程度。描述受损的程度和特征，若出现严重的受损和除眼睛以外的任何受损都应记录。3实验结果报告3.1测定结果报告如果可能，测定结果报告应包括以下内容：- 动物资料（种类，种属，来源，环境因素，食物，等）；- 测定条件（包括测定物质的有关物理化学特性）；- 用表格列出每只动物在每个观察时间（例如1，24，48，72小时）时的受到发炎或腐蚀的反应实验数据。- 描述任何观察到的严重损害。- 叙述观察到的发炎或损害的程度和特征，包括受损眼角膜的面积和恢复程度。- 描述在1，24，48，72小时观察到的发炎程度的鉴定方法。（例如手提长缝灯，活组织显微镜，荧光素）；- 描述任何没有明显的局部的眼部作用。- 结果讨论。- 结果说明。3.2.实验结果评价与分析见综述部分B(D)。4.参考文献见综述部分B(E)。附录 视觉受损等级眼角膜不透明度：厚度（取最厚处的面积作观察）无腐烂或不透明部分 0不透明部分散乱分散（或略比正常光泽暗），虹膜细节清晰可见 1半透明部分清晰可见，虹膜细节略模糊 2受损部分如珍珠质状，虹膜细节不明，瞳孔大小几乎不可辨认 3眼角膜不透明，虹膜变暗而不可辨 4虹膜正常 0明显的深的折皱，充血，肿胀，中度角膜充血或其综合症状， 1虹膜仍然对光有反应（包括迟缓的反应） 对光无反应，出血，全部受损（其中之一） 2连接发红（指相对被测定的眼而言眼帘和球状