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课题4:生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的检测【课标要求】检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质。【考向瞭望】生物组织中化合物的检测及注意事项,也有可能与其他实验相结合。【知识梳理】一、生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的检测原理利用某些化学试剂与生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。(一)还原糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。(二)淀粉遇碘变蓝。(三)脂肪被苏丹染液染成橘黄色,或被苏丹染液染成红色。(四)蛋白质与双缩脲试剂作用产生紫色。二、实验流程归纳:(一)选材制备组织样液显色反应。(二)脂肪的检测还可利用显微镜观察法,实验流程为:取材切片制片观察。三、实验材料的选择:(一)可溶性还原糖的鉴定实验中,最理想的实验材料是还原糖含量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,易于观察。可选用苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。(二)脂肪的鉴定实验中,实验材料最好选富含脂肪的生物组织,若利用显微镜观察,则最好选择花生种子。如果是新鲜花生种子,可不必浸泡,浸泡效果反而不好,如果是干种子,需浸泡3h4h最适宜切片(浸泡时间短,不容易切片;浸泡时间过长,组织太软,切下的薄片不易成形)。(三)蛋白质的鉴定实验,最好选用富含蛋白质的生物组织。植物材料常用大豆,且浸泡1d2d,适于研磨,动物材料常用鸡卵清蛋白。四、实验操作中的注意事项(一)在鉴定可溶性还原糖的实验中,加热试管中的溶液时,应该用试管夹夹住试管上部,放入盛5065温水的大烧杯中加热。注意试管底部不要接触烧杯底部;斐林试剂不稳定易变性,应现配现用。(二)还原糖、蛋白质的鉴定实验中,在加相应试剂鉴定之前,要留出一部分组织样液,以便与鉴定后的样液颜色作对比,增强实验的说明力。(三)在蛋白质的鉴定实验中,如果用蛋清稀释液作为实验材料,一定要稀释到一定程度,否则,与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管的内壁上,使反应不彻底,试管也不易洗刷干净。五、斐林试剂与双缩脲试剂比较斐林试剂双缩脲试剂甲液乙液a液b液成分0.1g/mlnaoh溶液0.05g/mlcuso4溶液0.1g/mlnaoh溶液0.01g/mlcuso4溶液鉴定物质可溶性还原糖蛋白质添加顺序甲乙两液等量混匀后立即使用先加入a液1ml,摇匀,再加入b液4滴,摇匀反应条件水浴5065加热不需加热,摇匀即可反应现象样液变砖红色样液变紫色(一)浓度不同。斐林试剂中cuso4溶液浓度为0.05g/ml,双缩脲试剂中cuso4溶液浓度为0.01g/ml。(二)原理不同。斐林试剂的实质是新配制的cu(oh)2浊液;双缩脲试剂实质是碱性环境中的cu2。(三)使用方法不同。斐林试剂是先将naoh溶液与cuso4溶液混合后再使用;双缩脲试剂是先加入naoh溶液,再滴加cuso4溶液。【思考感悟】该实验原理、方法、步骤在生产、生活中还有什么用途?可用于对生物组织、消化液(如唾液)、食品(如奶粉)进行某种成分的检测或鉴定,也可用于医学上某些疾病的诊断,如糖尿病、肾炎等。【基础训练】1、广东省质量技术监督局曾从亨氏美味源(广州)食品有限公司272箱美味源金唛桂林辣椒酱中检验出含有“苏丹”成分。“苏丹”型色素是一种人造偶氮苯类化学制剂,在人体内可形成二苯胺,二苯胺具有强烈的致癌性,全球多数国家都禁止将其用于食品生产。科学家通过实验发现,“苏丹”会导致鼠类患癌,癌变部位具明显的肿块,它在人类肝细胞研究中也显现出可能致癌的特性。据此回答下列问题:(1)苏丹红作为生物组织染色剂,用它对大豆子叶染色镜检,可被染色的成分或结构是( c )a、多糖b、蛋白质c、油滴d、核酸(2)利用苏丹或苏丹对(1)中的答案选项进行染色时的颜色反应分别是橘黄色和红色。(3)为了证明“苏丹”具有强烈的致癌性,某学校课外小组的同学做了一个实验:实验课题名称:验证“苏丹”能强烈诱发小白鼠肝细胞癌变。材料用具药品:生长状况一样的健康小白鼠12只;“苏丹”;解剖盘;解剖剪;放大镜等。实验步骤:第一步:将小白鼠等分为两组,编号为a、b; 第二步:a组小白鼠饲喂拌有足量“苏丹”的饲料,b组小白鼠饲喂普通饲料,两组放在相同的适宜条件下饲养;第三步:一段时间后,观察两组小白鼠的长势并解剖小白鼠,用放大镜观察其肝脏并记录结果。预期结果及结论:a组小白鼠长势明显不如b组,且放大镜下观察,a组小白鼠肝脏有明显肿块,而b组小白鼠生长正常,解剖观察肝脏无明显肿块,说明“苏丹”可诱发小白鼠肝细胞癌变。2、青苹果遇碘液显蓝色,熟苹果汁能与斐林试剂反应,产生砖红色沉淀,这说明( c )a、青苹果中含淀粉不含糖类b、熟苹果中只含糖类不含淀粉c、苹果转熟时淀粉水解为还原糖d、苹果转熟时单聚糖合成淀粉3、现提供新配制的斐林试剂甲液(0.1g/mlnaoh溶液)、乙液(0. 05g/mlcuso4溶液)、蒸馏水,则充分利用上述试剂及必需的实验用具,能鉴别出下列哪些物质(c )葡萄糖蔗糖胰蛋白酶dnaa、只有b、和c、和d、和【高考模拟】4、(2007广东高考)下列健康人的4种液体样本中,能与双缩脲试剂发生紫色反应的是( d )尿液胃液汗液唾液a、b、c、d、5、(20
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