柑橘果实糖、酸、Vc含量的测定方法.doc

柑橘果实糖、酸、Vc含量的测定方法熊庆娥（四川农业大学）第一部分 测定程序及计算公式一、 样品制备样品果至少10个。擦净果皮后，用水果刀在每样果对称部位切取两块。去果皮后，用纱布包好果肉，挤压果汁于干燥烧杯中，总量不少于100ml。样品液混合搅拌均匀后，可供测定可溶性固形物（TSS）、糖、酸、Vc。二、 Vc含量的测定1. 果汁5ml，用1%草酸稀释，定容至50ml，即稀释10倍。用移液管吸取稀释液5ml至50ml三角瓶，通过半微量滴定管滴入2，6-D，至溶液呈粉红色30秒内不消失止。记录所耗2，6-D（ml）。重复滴定23次。2. Vc含量（mg/100ml）= （1式）V：2，6-D滴定值（ml） A：每毫升2，6-D相当的Vc量（mg）B：滴定用样品量（ml） C：样品稀释倍数三、总酸含量的测定1. 用移液管吸取果汁5ml，转入100ml三角瓶，加酚酞12滴，用0.1N NaOH（标定浓度为准）滴至溶液出现粉红色不消失止。记录滴定所耗NaOH量（ml）。重复滴定23次。2. 总酸含量（g/100ml）= （2式）V：NaOH滴定值（ml） N：NaOH当量浓度B：滴定用样品量（ml） 0.064：柠檬酸折算系数四、糖含量的测定1. 还原糖的测定用移液管吸取果汁10ml，转入100ml容量瓶，加水稀释定容至刻度，摇匀后装入酸式滴定管。用移液管分别吸取裴林液A、B各5ml于200ml三角瓶，摇匀后，加入蒸馏水约30ml，置电炉上煮至沸腾。继续保持溶液沸腾，并用样品液滴定至兰色大部分减退，加次甲基兰2滴，继续滴定至溶液刚转砖红色止。记录样品液滴定值（ml），重复23次。2. 转化糖的测定：用移液管吸取果汁10ml，转入100ml容量瓶，加入6N HCl5ml，置沸水浴上水解15min。溶液冷却后，用NaOH中和酸（先用6N NaOH5ml，后滴加0.5N NaOH），以酚酞2滴指示。加NaOH至溶液显红色即为终点，定溶至100ml，此为转化糖测定液。将转化糖测定液装入酸式滴定管，用以滴定裴林液，方法同还原糖测定。3. 糖含量计算公式还原糖含量（g/100ml）= （3式）转化糖含量（g/100ml）= （4式）蔗糖含量（g/100ml）=（转化糖含量-还原糖含量）0.95 （5式）总糖含量（g/100ml）=还原糖含量+蔗糖含量 （6式）D：10ml裴林液相当的葡萄糖量（g）V1：还原糖液滴定值（ml）V2：转化糖液滴定值（ml）第二部分 试剂配制与标定一、 滴定Vc用试剂1. 1%的草酸 5g草酸溶于500ml蒸馏水。2. 2，6-D 称取52mgNaHCO3，溶于约50ml蒸馏水，煮沸。再称取 2，6-D 50mg，加入沸腾的NaHCO3液，溶解后冷却，转入250ml容量瓶，加蒸馏水定容至刻度。3. Vc（用于标定2，6-D） 称取烘干Vc（抗坏血酸）20mg（精确至0.1mg），溶于1%的草酸，定容至100ml。用移液管吸取5ml转入50ml容量瓶，加1%草酸稀释至刻度（稀释10倍）。现配现用。准确吸取Vc稀释液5ml转入100ml三角瓶，用2，6-D滴至粉红色，30秒不消失止。记录所耗2，6-D量（ml）。重复23次。计算1毫升2，6-D 相当的Vc毫克数（A）。A= （7式）W：Vc重量（mg） V1：滴定取Vc稀释液量（ml）X：2，6-D滴定值（ml） V2：Vc液总体积（ml），含稀释倍数二、测定酸用试剂1. 0.1N NaOH 2gNaOH溶于500ml蒸馏水。2. 1%酚酞 0.5g酚酞溶于50ml 80%的乙醇。3. 1%邻苯二甲酸氢钾 称取经100125烘干的邻苯二甲酸氢钾1g左右（精确到0.0001g）加蒸馏水溶解，定容至100ml。用以标定NaOH。4. NaOH的标定 准确吸取邻苯二甲酸氢钾10ml至100ml三角瓶中，加酚酞12滴，用NaOH滴至粉红色出现止。记录NaOH滴定值（ml），重复23次。NaOH浓度（N）= （8式）W：邻苯二甲酸氢钾的重量（g）V1：用于标定的邻苯二甲酸氢钾量（ml）V2：NaOH的滴定值（ml）204.2：邻苯二甲酸氢钾的当量三、测糖用试剂1. 裴林液A 硫酸铜（CuSO45H2O）34.639g溶于蒸馏水，定容至500ml。2. 裴林液B 酒石酸钾钠173g、NaOH50g溶于蒸馏水，定容至500ml。3. 6N HCl 取浓HCl 250ml加入250ml蒸馏水中。4. 6N NaOH 120gNaOH溶于500ml蒸馏水。5. 1%次甲基兰 0.5g次甲基兰溶于50ml蒸馏水。6. 葡萄糖液（用于标定裴林液） 在分析天平上准确称取葡萄糖1g左右精确至0.0001g（加水溶解定容至200ml），每毫升约含葡萄糖5mg。7. 裴林液的标定 用上述葡萄糖液滴定10ml裴林液，滴定方法同还原糖测定。记录葡萄糖滴定值