实验课件-实验一.ppt

动物生理学实验课的要求 遵守学习纪律 准时上 下课 人员及分组 组长负责制 必须严肃认真地进行实验操作 观察实验结果 各组的仪器和用品 由本组使用 不得与别组调换 以免混乱 爱护公共财物 注意节约各种实验用品 实验结果存在固定的盘上 每组上课时记住带一张盘 实验结束后立即将结果拷出 切勿在电脑上设置密码 带的盘要干净 免得电脑被感染病毒 保持实验室清洁整齐 随时清除污物 实验前必须仔细预习实验指导 了解实验的目的要求 基本原理以及简要的操作步骤 实验报告 动物生理学实验基本操作技术 一 常用手术器械蛙类实验手术器械 哺乳动物手术器械 止血钳 手术刀 手术剪和手术镊 二 手术器械的消毒方法 煮沸消毒法 水沸3 5min后 将器械放入消毒锅内 等第二次水沸后15min 高压蒸汽灭菌法 高压灭菌锅 蒸汽压15 20lb in2 温度121 6 126 6 C 30min左右 不宜于橡胶制品和锐利器械的灭菌 化学药品消毒法 常用消毒剂有 LJ 强化戊二醛 70 乙醇 不适于金属器械的消毒 0 1 新洁尔灭 酶皂溶液 甲醛溶液等 金属器械应浸泡30min以上 见下表 烧灼灭菌法 适用于金属器械 三 常用实验动物 青蛙和蟾蜍家兔大白鼠和小白鼠鱼类鸟类等 实验动物的抓取固定方法 蟾蜍蛙类抓取方法宜用左手将动物背部贴紧手掌固定 以中指 无名指 小指压住其左腹侧和后肢 拇指和食指分别压住左 右前肢 右手进行操作 在抓取是蟾蜍时 注意勿挤压其两则耳部突起之毒腺 以免毒液射进眼中 实验如需长时间观察 可破坏其脑脊髓 观察神经系统反应时不应破坏脑脊髓 或麻醉后用大头针固定在蛙板上 依实验需要采取俯卧位或仰卧位固定 家兔 抓取 实验家兔多数饲养在笼内 所以抓取较为方便 一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起 然后左手托其臀部或腹部 让其体重重量的大部分集中在左手上 这样就避免了抓取过程中的动物损伤 不能采用抓双耳或抓提腹部 1 2 3均为不正确的抓取方法 1 可损伤两肾 2 可造成皮下出血 3 可伤两耳 4 5为正确的抓取方法 颈后部的皮厚可以抓 并用手托兔体 台式固定 做血压测量 呼吸等实验和手术时 则需将兔固定在兔台上 图11 7 四肢用粗棉绳活结绑住 拉直四肢 将绳绑在兔台四周的固定木块上 头以固定夹固定或用一根粗棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上 几种常用生理盐溶液的配制 生理性溶液为代体液 用于维持离体的组织 器官及细胞的正常生命活动 它必须具备下列条件 渗透压与组织也相等 应含有组织 器官维持正常机能所必需的比例适宜的各种盐类离子 酸碱度应与血浆相同 并具有充分的缓冲能力 应含有氧气和营养物质 动物实验中常用的生理盐溶液有生理盐水 任氏 Ringer 溶液 乐氏 Locke 溶液和台氏 Tyrode 溶液四种 其成分各异 如下表所示 各种生理盐溶液的用途 生理盐水 即与血清等渗之NaCl溶液 在冷血动物应用0 6 0 65 在温血动物应用0 85 0 9 任氏溶液 用于青蛙及其他冷血动物 乐氏溶液 用于温血动物之心脏 子宫及其它离体脏器 用作灌注液者须于用前通入氧气泡15分钟 低钙乐氏液 含无水氯化钙0 05g 用于离体小肠及豚鼠的离体支气管灌注 台氏溶液 用于温血动物之离体小肠 动物的麻醉 在急 慢性动物实验中 手术前均应将动物麻醉 以减轻或消除动物的痛苦 保持安静状态 从而保证实验顺利进行 由于麻醉药品的作用特点不同 动物的药物耐受性有种属或个体间差异及实验内容及要求不同 因此正确选择麻醉药品的种类 用药剂量及给药途径十分重要 理想的麻醉药品应当是对动物麻醉完善 其毒性和对生理功能干扰最小 使用方便 1 常用麻醉剂的种类和用法局部麻醉剂 0 5 1 0 盐酸普鲁卡因或2 盐酸可卡因用作皮肤或黏膜表面麻醉 全身麻醉剂 发挥性的乙醚 非挥发性的巴比妥类 氨基甲酸乙酯等 在生理学实验中 多采用全身麻醉剂 2 麻醉前的准备工作 熟悉麻醉药品的特点根据实验内容合理选用麻醉药 麻醉前应核对药物名称 检查药品有无变质或过期失效 狗 猫等手术前应禁食12小时 以减轻呕吐反应 需在全麻下进行手术的慢性实验动物 可适当给予麻醉辅助药 例如 皮下注射吗啡镇静止痛 注射阿托品减少呼吸道分泌物的产生等 3 给药方法 1 全身性麻醉 吸入麻醉 乙醚注射麻醉 常用乌拉坦 戊巴比妥钠及氯醛糖等 主要给药途径有 静脉注射 腹腔注射 肌肉注射 皮下注射 皮下淋巴囊注射等2 局部麻醉 表面麻醉 药物通过点眼 喷雾或涂布作用于粘膜表面 转而透过粘膜接触粘膜下神经末梢而发挥作用 该药物除具有麻醉作用外 还有较强的穿透力 如的卡因 利多卡因 浸润麻醉 用注射的方法将药物送到神经纤维旁 此类药物只需有局部麻醉作用 不一定要求有强大的穿透力 如普鲁卡因 对氨苯甲酸酯 可卡因 利多卡因 其效力是普鲁卡因的2倍 用作局部麻醉的药物的浓度一般为1 2 通常用0 5 1 4 麻醉效果的观察 呼吸 深慢而平稳角膜反射 明显迟钝肌张力 全身肌肉松弛皮肤夹捏反射消失 5 兔耳缘静脉注射时的注意事项 麻醉前应正确选用麻醉药品 用药剂量及给药途径 进行静脉麻醉时 先将总用药量的三分之一快速注入 使动物迅速渡过兴奋期 余下的三分之二量则应缓慢注射 并密切观察动物麻醉状态及反应 以便准确判断麻醉深度 如麻醉较浅 动物出现挣扎或呼吸急促等 需补充麻醉药以维持适当的麻醉 一次补充药量不宜超过原总用药量的五分之一 麻醉过程中 应随时保持呼吸道通畅 并注意保温 手术中 若遇到出血 常用的止血方法有 钳夹止血法 压迫止血法 结扎止血法 烧烙止血法兔的采 取 血方法有耳中央动脉取血 股动脉取血 耳缘静脉取血 心脏穿刺取血 实验一生理机能系统的使用血型测定 一 生理机能系统的使用 开机顺序 贵重仪器先关后开熟悉系统操作仪器使用 二 血型测定 实验原理 一 血型血型 指的是红细胞膜上特异性抗原的类型 所以 所谓的血型 主要指红细胞血型 红细胞凝集 红细胞凝集反应是一种抗原 抗体反应 它是免疫反应的一种形式 凝集原 agglutinogen 红细胞膜上存在着特异的抗原凝集素 agglutinogen 血液中与红细胞膜上的凝集原起反应的特异抗体 血型的分类 目前已知人类的RBC除ABO血型系统外 还有Rh P等23个血型系统 ABO血型是根据红细胞表面存在的凝集原 A或B 决定的 分为A B AB O四型 1 输血型相合的血液 最好成分输血 2 输血前必须进行血型交叉配血试验 二 输血的原则 两侧均不凝 配血相合 可以输血 主侧凝集 配血不合 绝对不能输 主侧不凝次侧凝集 配血基本相合 紧急时考虑少量输 总结 输血的原则 1 准备输血时 首先必须鉴定血型2 保证供血者与受血者ABO血型相合 且必须进行交叉配血试验配血相合 可进行输血配血不合 不可输血基本相合 原则同O型血输给其他血型者或AB型血接受其他型血3 紧急情况无同型血 少量 缓慢 紧密观察 实验方法 取双凹玻片一块 用干净纱布轻拭使之洁净 在玻片两端用腊笔标明A及B 并分别各滴入A及B标准血清一滴 取血 采左手无名指血 70 酒精消毒 风干 用一次性针头扎手指 滴血 血量 血清约为1 1 用牙签迅