化验员手册48330.doc

一、实验室基础知识一、实验室安全守则(一)分析人员必须认真学习分析规程和有关的安全技术规程，了解设备性能及操作中可能发生事故原因，掌握预防和处理事故的方法。(二)玻璃管与胶管、胶塞等拆装时，应先用水润湿，手上垫棉布，以免玻璃管折断扎伤。(三)稀释浓硫酸的容器要放在塑料盆中，只能将浓硫酸慢慢到入水中，不能相反!必要时用水冷却。(四)蒸馏和提纯时不能离人，以防温度过高或冷却水突然中断。(五)化验室每瓶试剂必须贴有明显的与内容物相符的标签。严禁将用完的原装试剂空瓶不更换标签而装入别种试剂。发现试剂瓶上标签掉落或将要模糊时应立即贴好标签。(六)不准使用绝缘损坏或老化的线路及电器设备。保持电器及电线的干燥。(七)正确操作闸刀开关，应使闸刀处于安全合上或完全拉断的位置，不能若即若离，以防接触不良打火花。（八）使用酒精灯时，注意酒精切勿装满，应不超过容量的2/3，灯内酒精不足1/4容量时，应灭火后添加酒精。燃着的灯焰应用灯冒盖灭，不可用嘴吹灭，以防引起灯内酒精起燃。酒精灯应用火柴点燃，不应用另一正燃的酒精灯来点，以防失火。（九）若局部起火，应立即切断电源，用湿抹布或石棉布覆盖熄灭。若火势较猛，应立即与有关部门联系，请求救援。（十）打开浓盐酸、浓硝酸、浓氨水试剂瓶塞时应戴防护用具。（十一）打开高温烘箱前，须确认箱内温度小于100后方可打开。(十二)若遇酸碱液灼烧时，速用大量自来水冲洗患处。属酸液烧伤，用2%碳酸氢钠冲洗；属碱液烧伤，用2%硼酸冲洗，再用清水冲洗。二、化学试剂的分类和规格(一)化学试剂按其用途分为一般试剂、基准试剂、无机离子分析用有机试剂、色谱试剂与制剂、指示剂与试纸等。(二)实验室最常见试剂的规格1.基准试剂是一类用于标定滴定分析标准溶液的标准参考物质，可作为滴定分析中的基准物用，也可精确称量后直接配制标准溶液。主成分含量一般在99.95100.05，杂质含量略低于优级纯或与优级纯相当。标签颜色为浅蓝色。2.优级纯试剂，也称为保证试剂，其成分高，杂质含量低，主要用于精密的科学研究和测定工作，简称GR级。3.分析纯试剂，简称AR级，质量略低于优级纯，用于一般的科学研究和重要的测定。4.化学纯试剂，简称CP级，质量较分析纯差，用于工厂、教学实验的一般分析工作。5.实验试剂，简称IR级，杂质含量多，主要用于普通的实验或研究。三、化学试剂的使用方法和存放(一)使用方法 化验人员要熟知最常用试剂的性质，如市售酸碱的浓度，试剂在水中的溶解性，有机溶剂的沸点，试剂的毒性、危险性及其化学性质等，要注意保护试剂瓶的标签，它表明试剂的名称、规格、质量，万一掉失应照原样贴牢。分装或配置试剂后应立即贴上标签。决不可在瓶中装上不是标签指明的物质。无标签的试剂可取小样检定，不能用的要慎重处理，不应乱倒。为保证试剂不受沾污，应当用清洁的牛角勺从试剂瓶中取出试剂，决不可用手抓取。液体试剂可用干净干燥的量筒倒取或吸管吸取，取出的试剂不可倒回原瓶。打开易挥发的试剂瓶塞时不可把瓶口对准脸部。取出试剂后要盖紧塞子，不可换错瓶塞。不可用鼻子对准试剂瓶口猛吸气，如果必须嗅试剂的气味，可将瓶口远离鼻子，用手在试剂瓶上方扇动，使空气吸向自己而闻出气味。(二)存放1.易燃易暴试剂应贮于铁柜中，柜的顶部有通风口。严禁在化验室存放大于20L的瓶装易燃液体。2.药品柜和试剂溶液均应避免阳光直晒及靠近暖气等热源。要求避光的试剂应装于棕色瓶中或用黑布包好存于暗柜中。3.发现试剂瓶上标签脱落或要模糊时应立即贴好标签。无标签或标签无法辨认的试剂都要当做危险品重新鉴别后小心处理，不可随便乱仍，以免引起严重后果。4.剧毒品，如氰化钾等，应锁在专门的毒品柜中，交由保卫人员管理，领用时至少有两人签字，并做好登记。四、玻璃仪器的洗涤方法(一)沉涤仪器的一般步骤1.用水刷洗：准备一些用于洗涤各种形状仪器的毛刷，如试管刷、烧杯刷、瓶刷、滴定管刷等。首先用毛刷蘸水刷洗仪器，用水冲去可溶性物质及刷表面粘附的灰尘。2.用合成洗涤剂水刷洗：市售的餐具洗涤灵是以非离子表面活性剂为主要成分的中性洗液，可配成1020g几的水溶液，(也可用50g几的洗衣粉水溶液)刷洗仪器，它们都有较强的去油能力，必要时可温热或短时间浸泡。去污粉因含有细砂等固体摩擦物，有损玻璃，一般不要使用。 洗净的玻璃仪器倒置时，水流出后壁应不挂水珠。至此再用少量纯水刷洗仪器三次，洗去自来水带来得杂质，即可使用。(二)各种洗涤液的使用 要注意在使用各种性质不同的洗涤液时，一定要把上一种洗涤液除去后再用另一种，以免相互作用，生成的产物更难洗净。对于己知的污物使用合适的洗涤液往往事半功倍，因次最好在做完试验后及时清洗仪器，以免溶剂挥发后污物干涸或在空中发生变化生成难于清洗的物质。几种常用的洗涤液洗涤液及其配方使用方法铬酸洗液研细的重铬酸钾20g溶于40m1水中，慢慢加入360m1浓硫酸。用于去除器壁残留油污。用少量洗液刷洗或浸泡一夜，洗液可重复使用。洗涤废液经处理解毒方可排放。(2)工业盐酸(浓或1：1)用于洗去碱性物质及大多数无机物残渣(3)碱性洗液氢氧化钠10水溶液或乙醇溶液水溶液加热(可煮沸)使用，其去油效果较好；注意，煮的时间太长会腐蚀玻璃，碱一乙醇洗液不要加热。(4)碱性高锰酸钾溶液4g高锰酸钾溶于水中，加入10g氢氧化钠，用水稀释至100m1清洗油污或其它有机物质，洗后容器沾污处有褐色二氧化锰析出，再用浓盐酸或草酸洗液、硫酸亚铁、亚硫酸钠等还原剂去除(5)草酸洗液510g草酸溶于100ml水中，加入少量浓盐酸洗涤高锰酸钾洗液后产生的二氧化锰，必要时加热使用五、几种指示剂的配制指示剂的配制指示剂名称变色域pH颜色配制方法酸性碱性甲基橙.红黄0.1g加水100m1溴甲酚绿.黄蓝50mg，加950m1/L乙醇100m1甲基红.红黄0.1g加600m1几乙醇100m1酚酞.无色红lg加950m1几乙醇100m1六、标准溶液的配置与标定1. 0.1N NaOH和1N NaOH标准溶液1.1配制 将氢氧化钠配制成饱和溶液、注于内壁敷有石蜡的玻璃瓶中密闭放溶液清亮、倾取上层清液备用。 (1) 0.1 N NaOH标准溶液：量取52m1氢氧化钠饱和溶液、注入1000ml不含二氧化碳的水中，混匀。 (2) l N NaOH标准溶液：量取5ml氢氧化钠饱和溶液、注入1000ml不含二氧化碳的水中，混匀。1.2标定(1) 0.1 NNaOH标准溶液：称取105110烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾0.6 g，准确至0.0002g。溶于50ml水中，加热至沸，加入1酚酞指示剂23滴。用0.1N NaOH溶液滴定至溶液成粉红色。(2) 1N NaOH标准溶液：称取邻苯二甲酸氢钾6g，加水80ml其余同上。1.3计算 NWV0.2042式中 W邻苯二甲酸氢钾(g)； V氢氧化钠溶液的用量(m1)； 0.2042邻苯二甲酸氢钾(KHC8H404)的毫克当量。2. 0.1 N硫代硫酸钠标准溶液2.1配制 称取26g硫代硫酸钠和0.2g无水碳酸钠，溶于1000ml水中，缓和煮沸10min，冷却。将溶液保存于棕色具塞瓶中，放置数日后过滤备用。2.2标定2.2.1标定法一 称取于100烘至恒重的基准重铬酸钾0.2g，称准至0.0002g。置于500m1具塞锥形瓶中，溶于25ml煮沸并冷却的水中，加入碘化钾2g和4N硫酸20m1。待碘化钾溶解后，于暗处放置lOmin，加入250m1水，用0.1N硫代硫酸钠溶液进行滴定，进终点时，加入0.5淀粉指示剂3m1，继续滴定至溶液由蓝色转成亮蓝绿色。 同时作空白实验校正结果。 计算 NWV0.04903 式中 W重铬酸钾的重量(g)； V硫代硫酸钠溶液的用量(m1)； 0.4903每毫克当量重铬酸钾的克数。2.2.2标定法二 准确量取0.1N碘标准溶液3035ml，加入水100m1和0.1N盐酸5ml，用0.1N硫代硫酸钠溶液进行滴定，近终点时加入0.5淀粉指示剂3m1，继续滴定至溶液蓝色消失。(注：水100ml和0.1N盐酸5m1所消耗碘量，应作校正)。计算： NN1V1V式中N1碘标准溶液的当量浓度； V1碘标准溶液的用量(m1)； V.硫代硫酸钠的用量(m1)。. 0.05mol/LEDTA一2Na标准溶液3.1配制 称取208乙二胺四乙酸二钠溶于1000ml水中，摇匀。3.2标定(用纯锌作基准的标定方法)标定前锌粒或锌片处理：将纯锌粒或锌片放于1：4盐酸溶液中，浸沉片刻，用蒸馏水洗净，再用乙醇浸洗两遍，最后用乙醚洗净，烘干备用。称取基准锌粒或锌片6.5380g，溶于20ml盐酸(密度1.198cm)中，待全部溶解后，加水稀释至1000ml，摇匀。在20。C的恒温槽内保温至20，然后用水稀释至刻度，摇匀，即为0.1000mol/L的标准溶液，密封备用。准确量取3035ml制备的锌溶液，加100ml水，以乙二胺四乙酸二钠溶液滴定至终点时，加入PHl0缓冲液10ml和铬黑T指示剂5滴，用0.1mol乙二胺四乙酸二钠溶液滴定至溶液由紫色转变为纯兰色时，即为终点。注：1)PHl0的缓冲溶液的配制：称取54克氯化铵，称准至0.01克，溶于200毫升水中，加入350毫升氨水，稀释至1000毫升。2)铬黑T指示剂：称取0.5g铬黑T，溶于10ml缓冲溶液中，并用无水乙醇稀释至100ml，盖紧塞，此溶液保存的有效期约1个月。可用下法配置长期保存指示剂：称取0.58铬黑T，加1008固体氯化钠于乳钵中研磨均匀，装于棕色瓶中。3.3计算 Ml Vl M V 式中 Ml锌标准溶液的摩尔浓度； .Vn锌标准溶液得用量(m1)； V乙二胺四乙酸二钠标准溶液的用量(m1)；七、消毒剂浓度的测定(稳定性二氧化氯含量的测定)1原理 稳定性二氧化氯在酸性溶液中与碘化钾起氧化作用，释放出一定量的碘，再以硫代硫酸钠标准溶液滴定碘，根据硫代硫酸钠标准溶液的消耗量计算出稳定性二氧化氯的含量。2试剂2.10.1N硫代硫酸钠标准溶液2.210硫酸溶液2.310碘化钾溶液2.41淀粉溶液3操作方法 取三个棕色带塞锥形瓶，分别依次加入10硫酸溶液5mL、10碘化钾溶液6mL样品1mL，用二次水冲洗瓶壁，迅速用塞子塞紧瓶口，在阴暗处放置5分钟，用0.1N硫代硫酸钠标准溶液进行滴定分析，分别记下消耗量，取三次分析值的平均值，作为分析结果V。4计算VN0.01349 CL02含量100 m式中 N硫代硫酸钠标准溶液当量浓度 V消耗硫代硫酸钠标准溶液毫升数 m被测样体积(mL)注：根据消毒液浓度大小将滴定液浓度相应稀释，方法同上。二、理化检测一、饮料用水1电导率1.1原理水样中的导电性在一定条件下与水样中所含的阳离子和阴离子的总量的多少成比例。因此可用电导仪来测定水样溶解性固体的浓度，测定水样中的电导率是根据插在水样的两个电极之间的电阻来完成的。 1.2仪器意大利产EC215电导仪 烧杯(250毫升)1.3操作1.3.1按说明书校正电导1.3.2将水样倒入烧杯中，插入电极，直接读数。2.PH值水的PH范围是：酸性水5.54.5 碱性水8.59.5弱酸性水6.55.5 弱碱性水7.58.5 中性水6.57.52.1试纸法 撕下一小片试纸，用干净的玻璃棒沾上少量水样滴在试纸的一端，使其呈色，在23秒内与标准色阶表比较。(注意：不可将试纸直接投入水样中呈色；呈色后的试纸亦不可与标准色阶表接触比色。)2.2PH计法同果汁检测(二)13碱度3.1原理碱度是水介质与氢离子反应的定量能力，通过用强酸标准溶液将一定体积的水样滴定至某一PH值而定量确定。以酚酞为指示剂，用强酸滴定至终点时的反应，称为酚酞碱度，用P表示；滴定到酚酞终点后，加入甲基橙指试液，继续用强酸滴定至终点时的反应称为总碱度，以T表示。3.2试剂3.2.10.02moL几盐酸标准溶液3.2.20.1moL/L氢氧化钠标准溶液3.3操作3.3.1吸取水样100mL于250mL三角瓶中，加23滴酚酞指示剂，水样呈红色(若不呈色，该水样无酚酞碱度)，用0.02mol/L盐酸标准溶液滴定至无色，记录消耗盐酸标准溶液的体积为V1。3.3.2再加23滴甲基橙指示剂，继续用0.02mol/L盐酸标准溶液滴定至橙黄色到桔黄色为止，记录消耗盐酸标准溶液的毫升数为V2。3.4计算 酚酞碱度(DmmoL/L)V1C1000V 总碱度(TmmoL/L)(V1十V2)C1000V式中：C盐酸标准溶液的量浓度 V水样的体积 V1用酚酞作指示剂时消耗盐酸标准溶液的毫升数 V2用甲基橙作指示剂时消耗盐酸标准溶液的毫升数4总硬度的测定4，1原理 水中的钙、镁浓度的总和称为总硬度。将水样的pH调到10i0.1后，以铬黑T为指示剂，用EDTA滴定，当滴定达到等当点(终点)时，溶液中的Ca2+、Mg2+被EDTA完全络合，溶液就从酒红色变为蓝色。由消耗已知浓度的EDTA溶液的体积，则可计算水样的Ca2、Mg2的总量。4.2试剂4.2.1 0.01moL/LEDTA标准溶液4.2.2 PH10缓冲溶液4.2.3铬黑T指示剂4.3操作用移液管取水样50mI于250mL三角瓶内，向水样中加l1.5mL缓冲液，用小勺向水样中加入米粒大小铬黑T粉末，摇动混匀后溶液出现紫色(紫红色)，用0.05moL几EDTA标准溶液滴定至溶液出现蓝色为止，准确记录EDTA消耗量后计算其结果。4.4计算总硬度(CaOmg/L)VEDTA0.05608N1000V式中：VEDTA消耗EDTA的毫升数 NEDTA的moL几浓度 V取水样mL数二、果汁(一)原料I浓缩果汁1感官检验具有其特有的风味、状态、色泽。2可溶性固型物2.1原理在20用折光仪测量待测液的折光率，并用折光率与可溶性固形物含量的换算表查得或折光计上直接读出可溶性固型物含量。2.2仪器手持折光计(测量范围090) 阿贝折光仪2.3试液制备澄清果汁要充分混匀；浑浊制品用擦镜纸或纱布挤出汁液后进行测定。2.4分析步骤2.4.1测定前按说明书校正折光计2.4.2分开折光计两面棱镜，用脱脂棉蘸乙醇擦净。2.4.3用末端熔圆之玻棒蘸取试液滴于折光计棱镜面中央(注意勿使玻璃棒触及镜面)。2.4.4迅速闭合棱镜，静置lmin，使试液均匀无气泡，并充满视野。2.4.5对准光源，读取目镜视野中的读数(手持糖量计)。2.4.5对准光源，通过目镜观察接物镜。调节指示规，使视野分成明暗两部分，再旋转微调旋钮，使明暗界限清晰，并使分界线在十字交叉点上。读取目镜视野中的百分数，并记录棱镜温度(阿贝折光仪)。温度换算表见附录。2.4.6允许差 同一个样品两次测定值之差，不应大于0.5。取两次测定的算术平均值作为结果，精确小数点后一位。2.5引用标准 GBl229590GBl2143.1893总酸的测定3.1原理 根据酸碱中和原理，用碱滴定试液中的酸，以酚酞为指示剂确定滴定终点，按碱液的消耗量计算试液中的总酸含量。3.2试剂3.2.1 0.1N氢氧化钠标准溶液3.2.2 1酚酞指示剂溶液3.3 试液制备 称取10.0g样品于小烧杯中，用量筒定容至50ml(如溶液浑浊需过滤)。3.4分析步骤3.4.1取5.0ml试液置于250ml三角瓶中，加入蒸馏水3050ml及4滴1酚酞指示剂，0.1N氢氧化钠标准溶液滴定至微红色30S不褪色，记录消耗0.1N氢氧化钠标准溶液的消耗数(V1)。3.4.2空白实验 用水代替试液，以下按3.4.1条操作。记录消耗0.1N氢氧化钠标准溶液的消耗数(V2)。3.4.3计算 XC(V1一V2)KF100m式中X每100克(或每100毫升)样品中酸的克数g100g或g100m1； C氢氧化钠标准溶液浓度N； m试液体积m1； K酸的换算系数(苹果酸：0.067；柠檬酸：0.064)； F试液的稀释倍数；3.5引用标准：GBl2292904氨基态氮的测定4.1原理 氨基态氮为两性电解质。在接近中性的水溶液中，全部解离为双极离子。当甲醛溶液加入后，与中性的氨基酸中的分解离型氨基反应，生成单氢甲基和二羟基诱导体，此反应完全定量进行。此时放出氢离子可用标准碱液滴定，根据碱液的消耗量，计算出氨基态氮的含量。4.2试剂4.2.1 0.1N氢氧化钠标准溶液：GB601配置与标定。4.2.2 0.05N氢氧化钠标准溶液：用0.1N氢氧化钠标准溶液当天稀释。4.2.3中性甲醛溶液：量取200ml甲醛溶液(GB685)于400m1烧杯中，置于电磁搅拌器上，边搅拌边用0.1N氢氧化钠标准溶液调至PH为8.1。4.2.4 30过氧化氢(HG31082)。4.2.5 PH 6.8缓冲溶液：按GB604中“缓冲溶液制备”配置。 4.3仪器设备 酸度计(直接读数，测量范围014pH，精度0.lpH) 电磁搅拌器 玻璃电极和甘汞电极4.4试液的制备 加入浓缩倍数等量的水，使其成为果汁，并充分混匀，供测试用。4.5测定步骤4.5.1将酸度计接通电源，预热30min后，用PH6.8的缓冲溶液校正酸度计。4.5.2吸取试液A毫升(氨基态氮含量为15mg)于烧杯中，加5滴30过氧化氢。将烧杯置于电磁搅拌器上，电磁插入烧杯内试样中适当位置。4.5.3开动电磁搅拌器，先用0.1N氢氧化钠标准溶液慢慢中和试样中的有机酸。当pH达到7.5左右时，再用0.05N氢氧化钠标准溶液调至pH为8.1，并保持lmin不变。然后慢慢加入1015m1中性甲醛溶液。lmin后用0.05N氢氧化钠标准溶液滴定至pH为8.1。记录消耗0.05N氢氧化钠标准溶液的体积。4.5.4计算XCVK14100m式中：X每100g(100m1)试样中氨基态氮的毫克数，mg100g(mg100m1)； C氢氧化钠标准滴定溶液的浓度，mol/L； V加入中性甲醛溶液后，滴定试样消耗0.05N氢氧化钠标准溶液得体积，m1； m试样的质量g(m1)； K稀释倍数； 14lml lN氢氧化钠标准滴定溶液相当于氮的克数。同一样品两次测定结果的算术平均值作为结果，精确到小数点后第一位。 4.6同一样品两次测定结果之差： 氨基态氮10mgg，不得大于2； 氨基态氮10mgg，不得大于5。4.7引用标准：GBl2143.2895 L一抗坏血酸的测定5.1快速测定法5.1.1原理 还原型抗坏血酸能还原I2为I，反应终点时用淀粉指示剂变蓝判定。5.1.2试剂5.1.2.1 2草酸溶液5.1.2.2 1.0mgm1抗坏血酸标准溶液：准确称取抗坏血酸0.100g，用2草酸溶液溶解并定容至100ml，置冰箱内保存，保质期一周。5.1.2.3 1.0淀粉溶液：称取可溶性淀粉1.0g加水100m1溶解，并煮沸透明冷却备用。5.1.2.4 0.02N碘标准溶液：称2.54g碘和15g碘化钾，加水溶解后，定容至l升储于棕色瓶中。5.1.3操作方法5.1.3.1用移液管吸抗坏血酸标准溶液10m1放于150m1三角瓶中，加2草酸溶液，加1.0淀粉溶液lml，用0.02N碘标准溶液滴定至蓝色，15s内不变色为止记下此数为A。5.1.3.2用移液管吸果汁20m1于250ml三角瓶中，加25m12草酸溶液，加1.0淀粉溶液lml，用0.02N碘标准溶液滴至蓝色为止(若果汁为橙色、浑浊、由于与蓝色相加合，终点色泽为蓝褐色)，并记上毫升数为B。5.1.4计算VcB50A(以mg100m1计)5.1.5允许差：为提高准确度，A、B两数值最好控制在1lml内。5.2紫外分光光度计法5.2.1原理紫外快速测定法是根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定性，于243nm处测定样品液与碱处理样品液两者的消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中维生素C的含量。5.2.2试剂抗坏血酸标准溶液的配制：精确称取抗坏血酸100mg，加2m110盐酸溶液，加蒸馏水定容至1000m1，混匀。此液浓度为100gml。5.2.3测定方法5.2.3.1标准曲线的制作：取带塞刻度试管8支并编号，分别加入不同量抗坏血酸标准液。以蒸馏水为空白，在243nm处测定标准系列抗坏血酸溶液的吸光值。以抗坏血酸的含量(118)为横坐标，以相应的吸光值为纵坐标作标准曲线。5.2.3.2样品提取：将果蔬样品洗净、擦干、切碎、混匀，称取5.00g于研钵中，加入2.5m11盐酸溶液，匀浆，转移到25m1容量瓶中，定容至刻度。若提取液澄清透明，则可直接取样分析，若有浑浊现象，则可离心(1000rmin，10min)取上清液分析。5.2.3.3样品测定：样品测定：取0.10.2ml提取液，放入盛有0.20.4m110盐酸溶液的10m1容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。以蒸馏水为空白，在243nm处测定其光值。碱处理液的制备与测定：分别取0.10.2m1提取液、2m1蒸馏水和0.60.8m11mol1氢氧化钠溶液依次放入10m1容量瓶中，混匀，15min后加入0.60.8m110盐酸溶液，混匀，并定容至刻度。以蒸馏水为空白，在243nm处测定其消光值。5.2.4计算维生素含量(gg)mVVlm式中 m从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量(11g) Vl测定时吸取样液提取液的体积(m1) V样品提取液总体积(m1) m样品质量(g)5.2.5说明5.2.5.1根据待测提取液与待测碱处理液的消光值之差，查维生素C标准曲线或直接以待测碱处理液为空白，测出待测提取液的消光值，查标准曲线，两者均可。5.2.5.2标准抗坏血酸液要在使用前临时配制。II原汁1感官检验：应有该果汁特有的风味、状态、色泽。2检验方法2.1试样制备：混匀后直接取样。2.2分析步骤同II(二)成品1PH值的测定1.1原理 当以pH玻璃电极为指示电极，甘汞电极为参比电极，插入水样中时，便构成电池反应，两者之间产生一个电位差。由于参比电极的电位是固定的，因而该电位差的大小取决于水样中(氢离子活度的负对数即为pH值)。因此可用电位测定仪测定其电动势，再换算成PH，一般可直接用PH计读得PH值。1.2仪器：F一20PH计1.3试剂1.3.1混合磷酸盐(6.86pH 25)标准缓冲溶液1.3.2邻苯二甲酸氢钾(4.00pH 25)标准缓冲溶液(用不含二氧化碳的水配制，并储存在塑料瓶中，可稳定l至2个月。)1.4仪器操作1.4.1PH值校准1.4.1.1将已活化的电极插入仪器下端的插座中，并将电极用去离子水冲洗用滤纸吸干后，将复合电极插入标准缓冲溶液中，电极稍做搅动，停留约1分钟左右。1.4.1.2按“”键，再用键将温度调至被测溶液实际的温度。1.4.1.3按“pH/MV”键，左下角标记“PH”亮，为“pH”功能。1.4.1.4按“CAL”键2秒钟，当标记闪烁表示进入标准状态，释放该键。1.4.1.5校准完后，“PH”停止闪动。1.4.1.6将电极从标准液中取出，常规清洗后，即可放入另外一个标准溶液进行第二点校正，即重复上述步骤，直到校正完毕。两点校正后，仪器就可进行正常测量操作了。1.4.2pH值测量 校准完后，把电极用去离子水冲洗干净，用滤纸吸干，然后把复合电极插入被测溶液中，稍做搅动，此时等待读数稳定后，即可记录pH值。1.4.3电池更换当电池电压低于6.5V时，显示屏左上出现“1”符号，提示用户电池电压己低于正常工作电压，虽还能工作一段时间，但应尽快更换新电池。2净容量检验2.1仪器容量瓶(1000毫升或250毫升)温度计(0100)2.2检测步骤2.2.1将待测液温度调至20。2.2.2将样液倒入容量瓶内，若液面超过刻度线，则用吸量管吸出多余样液并读其刻度数；若液面低于刻度线，则用吸量管补足相同样液并读其刻度数。3可溶性固形物检测 同(一)24 L一抗坏血酸的检测同(一)55总酸度检测5.1原理 根据酸碱中和原理，用碱滴定试液中的酸，以酚酞为指示剂确定滴定终点，按碱液的消耗量计算试液中的总酸含量。5.2试剂5.2.10.1N氢氧化钠标准溶液5.2.2 1酚酞指示剂溶液5.3分析步骤5.3.1取5.0ml试液置于250ml三角瓶中，加入蒸馏水3050ml及4滴1酚酞指示剂，0.1N氢氧化钠标准溶液滴定至微红色30S不褪色，记录消耗0.1N氢氧化钠标准溶液的毫升数(V1)。5.3.2空白实验 用水代替试液，以下按5.3.1条操作。记录消耗0.1N氢氧化钠标准溶液的毫升数(V2)。5.4计算XC(VnVz)KF100m式中 X每100克(或每100毫升)样品中酸的克数g100g或g/100m1 C氢氧化钠标准溶液浓度N m试液体积ml K酸的换算系数(苹果酸：0.067；柠檬酸：0.064) F试液的稀释倍数5.5引用标准：GBl229290三、茶饮料(一)原料1取样规则：1.1取样条件： 取样工作应在清洁、干燥、光线充足的室内进行，避免日光直接照射，防止外来杂质的混入；取样用具和器皿必须清洁、干燥、无异味；盛器应密闭性良好。1.2取样方法：1.2.1取样件数原料数量(件)取样数量(件)151150250件以上每增加50件(不足50件按50件计)增加l件500件以上每增加100件(不足100件按100件计)增加1件1000件以上每增加500件(不足500件按500件计)增加1件注：在取样时如果发现茶叶的品质、包装或堆存情况等有异常情况时，可酌情增加或扩大取样数量，以保证样品的代表性，必要时应停止取样。1.2.2取样程序在所取定的样品从其上、中、下部用取样器取出500g，将所取的样品混合后采取四分法逐步分至5001000g，作为平均样品分装于有盖的洁净的广口瓶中，贴好标签，供检验用。1.2.3操作方法(四分法)将原始的样品充分混和均匀后堆放在干净的玻璃板上，压成厚度为3cm以下的圆形，并划成“十”字线。将样品分成四份，取两对角的二份，再如上混合，分为四份，取对角的二份。(所取样品应当及时送往检验室，最迟不得超过24h.)3填写取样报告茶原料取样报告品种： 取样时间：项目内 容批号供货商包装质量数量开箱感官碎渣感官气味1.4引用标准GB8302872滋味评审： 采用茶水比例为1：100；取3g茶用300m1沸水冲泡，沸水应当采用纯净水。8min左右，首先闻茶汤气味，然后观察茶汤色泽，最后品尝茶汤滋味。填写报告单。3茶多酚含量测定：3.1原理茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫兰色络合物，用分光光度法测定其含量。3.2仪器 实验室常规仪器及下列各项：分析天平(0.0001克)、分光光度计。3.3试剂制备3.3.1酒石酸亚铁溶液 称取1g(准确至O.0001g)硫酸亚铁(GB66477)和5g(准确至0.0001g)酒石酸钾钠(GBl28881)，用水溶解并定容至1L(溶液应当避光，低温保存，有效期个月)。3.3.2 PH7.5磷酸盐缓冲溶液3.3.2.1 115M磷酸氢钠：称取23.377g磷酸氢二钠(GBl263。77)，加水溶解后定容至1L。3.3.2.2 115M磷酸二氢钾：称取9.078g磷酸二氢钾(GBl27477)，加水溶解后定容至lL。3.3.2.3取上述l15M的磷酸氢钠溶液85m1和115M的磷酸二氢钾溶液15m1混合均匀。3.4样品处理： 先用磨碎机将少量试样磨碎，弃取，再磨碎其余部分。若水分含量太高则应当进行干燥处理(烘温不超过100)后待样品冷却，将样品装入干燥容器，并立即密封。3.5试液制备：称取3g(准确至0.0001g)磨碎试样于500m1锥形瓶(500m1)中，加沸蒸馏水450m1，立即移入沸水浴(恒温水浴)中，浸提45min(每隔10min动一次)。浸提完毕后立即趁热减压过滤。滤液移入500ml容量瓶中，残渣用少量热蒸馏水洗涤23次。并将滤液滤入上述容量瓶中，冷却后用蒸馏水稀释至刻度。3.6分析方法 准确吸取上述试液lml，注入25m1的容量瓶中，加水4ml和酒石酸亚铁溶液5m1充分混合，再加入PH7.5的缓冲液至刻度，用10mm比色皿在波长540nm处，以试剂空白溶液作为参比，用721分光光度计测定吸光度(A)。3.7计算公式 A1.9572 L1茶多酚() 100 100 L2Mm L1：试液总量，m1. L2：测定时用液量，m1. M：试样的质量，g m：试样干物质含量百分率， A：试液的吸光度3.8重复性. 如果同一样品两次测定值之差，每100g试样不得超过0.5g,则取两次测定的算术平均值作为结果。(测定结果取小数点后一位)3.9引用标准GB8313874咖啡碱测定：4.1原理 茶叶中的咖啡碱易溶于水，除去干物质后，用特定波长测定其含量。4.2试剂制备：4.2.1碱性乙酸铅溶液：称取50g碱性乙酸铅(HG3139681)，加水100ml，静置过夜。4.2.2盐酸(GB 622。77)：0.01N溶液，取0.9m1盐酸，用水稀释至lL，摇匀。4.2.3硫酸(GB 62577)：9N溶液，取硫酸250m1，用水稀释至1L，摇匀。4.2.4咖啡碱标准液：称取100mg咖啡碱(纯度不低于99)溶于100m1水作为母液，准确吸取5ml，加水至100ml作为工作液(1m1含咖啡碱0.05mg)。4.3试液制备 称取3g(准确至O.0001g)磨碎试样于500m1锥形瓶(500m1)中，加沸蒸馏水450m1，立即移入沸水浴(恒温水浴)中，浸提45min(每隔10min摇动一次)。浸提完毕后立即趁热减压过滤。滤液移入500ml容量瓶中，残渣用少量热蒸馏水洗涤23次。并将滤液滤入上述容量瓶中，冷却后用蒸馏水稀释至刻度。4.4测定方法 用移液管准确称取试液20ml移入250ml容量瓶中，加入10m10.01N盐酸和2m1碱性乙酸铅溶液，用水准确稀释至刻度，充分混匀，静置澄清过滤，准确吸取滤液50m1，注入100ml容量瓶中，加入0.2m19N硫酸溶液，加水稀释至刻度，.混匀，静置澄清过滤。用10m1比色杯，在波长274nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A)。4.5咖啡碱标准曲线的制作：分别吸取0、5、10、15、20、25、30m1咖啡碱工作液于一组100m1容量瓶中，各加入4.0m1盐酸溶液用水稀释至刻度，混匀，用10mm石英比色杯，在紫外分光光度计上选择狭缝0.10.18mm，在波长274nm处，以试剂溶液作为参比，测定吸光度(A)。将测得的吸光度与对应的咖啡碱浓度绘制标准曲线。4.2.1碱性乙酸铅溶液：称取50g碱性乙酸铅(HG3139681)，加水100ml，静置过夜。4.2.2盐酸(GB 622-77)：0.01N溶液，取0.9m1盐酸，用水稀释至lL，摇匀。4.2.3硫酸(GB 62577)：9N溶液，取硫酸250m1，用水稀释至1L，摇匀。4.2.4咖啡碱标准液：称取100mg咖啡碱(纯度不低于99)溶于100m1水作为母液，准确吸取5ml，加水至100ml作为工作液(1m1含咖啡碱0.05mg)。4.3试液制备 称取3g(准确至O.0001g)磨碎试样于500m1锥形瓶(500m1)中，加沸蒸馏水450m1，立即移入沸水浴(恒温水浴)中，浸提45min(每隔10min摇动一次)。浸提完毕后立即趁热减压过滤。滤液移入500ml容量瓶中，残渣用少量热蒸馏水洗涤23次。并将滤液滤入上述容量瓶中，冷却后用蒸馏水稀释至刻度。4.4测定方法用移液管准确称取试液20ml移入250ml容量瓶中，加入10m10.01N盐酸和2m1碱性乙酸铅溶液，用水准确稀释至刻度，充分混匀，静置澄清过滤，准确吸取滤液50m1，注入100ml容量瓶中，加入0.2m19N硫酸溶液，加水稀释至刻度，混匀，静置澄清过滤。用10m1比色杯，在波长274nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A)。4.5咖啡碱标准曲线的制作： 分别吸取0、5、10、15、20、25、30m1咖啡碱工作液于一组100m1容量瓶中，各加入4.0m1盐酸溶液用水稀释至刻度，混匀，用10mm石英比色杯，在紫外分光光度计上选择狭缝0.10.18mm，在波长274nm处，以试剂溶液作为参比，测定吸光度(A)。将测得的吸光度与对应的咖啡碱浓度绘制标准曲线。4.6计算公式： C1000Ll2502010050咖啡碱() 100 Mm C：根据试样测得的吸光度(A)，从咖啡碱标准曲线上查得的咖啡碱含量，mgm1； L1：试液总量，m1； M：试样用量，g； m：试样干物质含量百分率。4.7重复性 同一样品的两次测定值之差，每100g试样不得超过0.2g。则取两次测定的算术平均值作为结果(测定结果取小数点后一位)。4.8引用标准8312875水分测定：5.1原理 试样于103i2的恒温干燥箱中加热至恒重，称量。5.2试样制备 按GB830387茶磨碎试样的制备极其干物质含量的测定的规定，制备试样。5.3铝质烘皿的准备 将洁净的烘皿连同皿盖置于103+2的干燥箱中，加热lh，加盖取出于干燥器内冷却至室温，称量(精确至0.001g)。5.4测定方法 称取充分混匀的试样5g(准确至0.001g)于已知重量的烘皿中，置于103土2的干燥箱中(皿盖斜置皿边)，加热4h，于干燥器内冷却至室温，称量。再置于干燥箱中加热1h，加盖取出，于干燥器内冷却，称重。重复加热lh的操作，直至连续两次称量差不超过0.005g即为恒重，以最小称量为准。5.5计算公式 M1一M2 水分() 100 M0 M1：试样和铝质烘皿烘前的质量，g； M2：试样和铝质烘皿烘后的质量，g； M0：试样质量，g；5.6重复性 同一样品的两次测定值之差，每100g试样不得超过0.2g。则取两次测定的算术平均值作为结果(测定结果取小数点后一位)。(二)成品检测l.PH值 同果汁检测(二)12.净容量 同果汁检测(二)23.酸度 同果汁检测(二)54.可溶性固形物 同果汁检测(一)25.茶多酚5.1原理 茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫兰色络合物，用分光光度法测定其含量。5.2仪器 实验室常规仪器及下列各项：分析天平(0.0001克)、分光光度计。5.3试剂制备5.3.1酒石酸亚铁溶液称取lg(准确至0.0001g)硫酸亚铁(GB66477)和5g(准确至0.0001g)酒石酸钾钠(GBl28881)，用水溶解并定容至lL(溶液应当避光，低温保存，有效期一个月)。5.3.2 PH7.5磷酸盐缓冲溶液：5.3.2.1 115M磷酸氢钠：称取23.377g磷酸氢二钠(GB126377)，加水溶解后定容至lL。5.3.2.2 115M磷酸二氢钾：称取9.078g磷酸二氢钾(GBl274。77)，加水溶解后定容至1L。5.3.2.3取上述l15M的磷酸氢钠溶液85ml和115M的磷酸二氢钾溶液15m1混合均匀。5.4试液制备5.4.1较透明的样液(如果味茶饮料)：充分摇匀后，备用。5.4.2较浑浊的样液(如果汁茶饮料)：称取25毫升充分摇匀的样液于50毫升量瓶中，加入15毫升95乙醇，充分摇匀，放置15分钟后，用水定容至刻度。用慢速定量滤纸过滤，滤液备用。5.4.3含碳酸气的样液：量取100毫升充分混匀的样液于250毫升烧杯中，称取其总质量，然后置于电炉上加热至沸，在微沸状态下加热10分钟，将二氧化碳气排出。冷却后，用水补足其原来的质量。摇匀后，备用。5.5测定精确移取上述制备的试液1毫升一5毫升于25毫升容量瓶中，加4毫升水、5毫升酒石酸亚铁溶液，充分摇匀，用PH7.5缓冲液定容至刻度，用lO毫米比色皿，在波长540nm处，以试剂空白做参比，测定其吸光度(A1)。同时移取等量的试液于25毫升容量瓶中，加4毫升水，用PH7.5的缓冲液定容至刻度，测定其吸光度(A2)。5.6分析结果的表述 (A1一A2)1.9752K X1000 L式中： X样品中茶多酚的含量，mg/L； A1试液显色后的吸光度； A2试液底色的吸光度； K稀释倍数； I测定时吸取试液的体积，m1； 1.975用10mm比色皿，当吸光度等于0.50时，1m1茶汤中茶多酚的含量相当于1.957mg.5.7允许差：同一样品的量次测定结果之差，不得超过平均值的5.0。四、乳品(一) 原材料I鲜乳1感官检查：呈乳白色或稍带微黄色的胶态液体，无沉淀，无凝块，无杂质，具有新鲜牛乳固有的香味，无异味。2理化检验：密度，脂肪，酸度，蛋白质，酒精实验。2.1密度2.1.1仪器2.1.1.1乳稠计 有204及1515两种，前者较后者测得的结果低2。2.1.1.2玻璃圆筒或200250ml量筒 圆筒高度应大于乳稠计的长度，其直径大小应使在沉入乳稠计时使乳稠计周边和圆筒内壁的距离不小于5mm。2.1.2测量取混匀并调节温度为1025。C的样品，小心倒入玻璃圆筒内，勿使发生泡沫并测量样品温度。小心将乳稠计沉入样品中到相当刻度30外，然后让其自然浮动，但不能与筒壁接触。静置23分钟，眼睛对准筒内牛乳液面的高度，读出乳稠计数值。根据样品的温度和乳稠计读数查表换算成20时的度数。相对密度d与乳稠计刻度关系如下：Xl (d1.000)1000式中：X1乳稠计读数 d 样品的相对密度注：乳稠计读数转换为温度20时的密度换算表见后附录。2.2脂肪(盖勃法)2.2.1原理：是一种容量法，用酸解的方法使脂肪分离，然后测定其体积。2.2.1.1在牛乳中加入一定浓度的硫酸，可破坏牛乳的胶质性，使牛乳中的酪蛋白钙盐变成可溶性的重硫酸酪蛋白化合物，并能减小脂肪球的附着力，同时还可增加液体的相对密度，使脂肪更容易浮出。2.2.1.2加入异戊醇促使脂肪从蛋白质中游离出来，并能强烈地降低脂肪球的表面张力，从而促使其结合成为脂肪集团。2.2.1.3在操作过程中加热(6570水浴)和离心，使脂肪能完全而又迅速的分离。2.2.2试剂：硫酸(比重1.8201.825) 异戊醇(上海产)2.2.3仪器：乳脂肪离心机，盖勃氏乳脂计。2.2.4分析步骤 在乳脂计中先加入10ml硫酸，在沿管壁小心准确地加入10.73ml样品，不要使其混合，然后加入lml异戊醇，塞上橡皮塞，用力振摇(瓶口向外，向下，避免溶液冲出)使之成为均匀棕色液体，静置数分钟(瓶口向下)，置6570。C水浴中5分钟，取出后放入乳脂肪离心机中以1000rmin的转速离心5分