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文档简介

第二讲 微生物的培养与应用考情一微生物的实验室培养1(2012浙江高考)幽门螺杆菌(hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下:x请回答:(1)在配制培养基时,要加入尿素和酚红指示剂,这是因为hp含有_,它能以尿素作为氮源;若有hp,则菌落周围会出现_色环带。(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是_灭菌。a高压蒸汽b紫外灯照射c70%酒精浸泡 d过滤(3)步骤x表示_。在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液_到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得_菌落。(4)在培养时,需将培养皿倒置并放在_中。若不倒置培养,将导致_。(5)临床上用14c呼气试验检测人体是否感染hp,其基本原理是hp能将14c标记的_分解为nh3和14co2。解析此题考查微生物的分离与培养知识。(1)幽门螺杆菌(hp)含有脲酶,能以尿素为氮源,在加入尿素和酚红指示剂的培养基中培养hp,由于尿素经脲酶的降解可产生碱性的nh3,nh3能使培养基中的酚红由红黄色变为红色,故菌落周围会出现红色环带。(2)由于尿素加热会分解,对尿素溶液进行灭菌最好用g6玻璃砂漏斗过滤。(3)微生物的分离和培养步骤是:配制培养基灭菌、倒平板接种培养。为获得单菌落,接种操作前应先将菌液稀释,然后将菌液涂布到培养基平面上即可。(4)微生物培养时需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中,若不倒置培养,则无法形成单菌落。(5)幽门螺杆菌能将14c标记的尿素分解为nh3和14co2,故临床上常用14c呼气试验检测人体内幽门螺杆菌的存在。答案(1)脲酶红(2)d(3)接种涂布单(4)恒温培养箱无法形成单菌落(5)尿素考情二分解尿素细菌的分离和计数2分离土壤中分解尿素的细菌,对培养基的要求是()加尿素不加尿素加琼脂糖不加琼脂糖加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝酸盐a bc dc分离土壤中分解尿素的细菌,培养基中要有尿素、琼脂糖、葡萄糖,尿素给分解尿素的细菌提供氮源,不加硝酸盐。3自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯,然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验,请回答有关问题。实验步骤:(1)制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。(2)为了得到更加准确的结果,你选用_法接种样品。(3)适宜温度下培养。结果分析:(1)测定大肠杆菌数目时,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确可信的是_,其理由是_。a一个平板,统计的菌落数是230b两个平板,统计的菌落数是220和260,取平均值240c三个平板,统计的菌落数分别是210、50和520,取平均值260d四个平板,统计的菌落数分别是210、300、240和250,取平均值250(2)一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每毫升样品中的菌落数是_(涂布平板时所用稀释液的体积为01 ml)。(3)用这种方法测定的大肠杆菌密度,实际活菌数量要比测得的数量_,因为_。解析本题考查微生物的计数方法,可从两种接种方法的优缺点和统计菌落数目时应注意的问题入手解答该题。为了得到更加准确的结果,应用稀释涂布平板法接种样品。(1)选取多个菌落数相差不大的平板计数,取其平均值。(2)23401105234108。(3)因为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成,所以实际活菌数量要比测得的数量多。答案实验步骤:(2)稀释涂布平板结果分析:(1)d在设计实验时,一定要涂布至少三个平板作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性;在分析实验结果时,要考虑所设置的重复组的结果是否相当(2)234108(3)多当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的是一个菌落考情三分解纤维素的微生物的分离4(2014北京西城模拟)组氨酸缺陷型沙门氏菌是由野生菌种突变形成的,自身不能合成组氨酸。将其接种在缺乏组氨酸的平板培养基上进行培养,有极少量菌落形成。2氨基芴是一种致突变剂,将沾有2氨基芴的滤纸片放到上述平板培养基中,再接种组氨酸缺陷型沙门氏菌进行培养,会有较多菌落出现。以下叙述不正确的是()a在接种前,2氨基芴和滤纸片须进行灭菌处理b若用划线法接种可以根据菌落数计数活菌数量c基因突变的可逆性与是否存在致突变剂无关d此方法可以用于检测环境中的化学致突变剂b在微生物培养过程中,培养基、实验材料、实验用具都要进行灭菌处理,a项正确;计算活菌的数目常用

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